| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 1 绪论 | 第11-20页 |
| ·白桦简介 | 第11页 |
| ·三萜类化合物概述 | 第11-14页 |
| ·三萜类化合物分类 | 第11-12页 |
| ·三萜类化合物合成途径 | 第12-14页 |
| ·植物悬浮培养技术生产次生代谢产物的研究进展 | 第14页 |
| ·诱导子对次生代谢产物合成的影响 | 第14-15页 |
| ·水杨酸对次生代谢产物的影响 | 第14-15页 |
| ·茉莉酸甲酯对次生代谢产物合成的影响 | 第15页 |
| ·一氧化氮对次生代谢产物合成的影响 | 第15页 |
| ·抑制性消减杂交(SSH)研究进展 | 第15-18页 |
| ·SSH技术的基本原理 | 第15-16页 |
| ·SSH技术的优缺点 | 第16-17页 |
| ·SSH技术的应用 | 第17-18页 |
| ·实时荧光定量PCR研究进展 | 第18页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第18-20页 |
| 2 诱导子及其组合处理下活性氧清除酶系与白桦三萜积累的关系 | 第20-38页 |
| ·材料与方法 | 第20-26页 |
| ·植物材料来源 | 第20页 |
| ·白桦细胞培养 | 第20页 |
| ·培养条件 | 第20页 |
| ·诱导子的配制及添加 | 第20-21页 |
| ·总三萜的提取及含量测定 | 第21页 |
| ·齐墩果酸和白桦脂醇的提取及含量测定 | 第21-22页 |
| ·防御酶活性测定 | 第22-26页 |
| ·结果与分析 | 第26-34页 |
| ·不同诱导子及其组合处理对白桦悬浮细胞总三萜积累的影响 | 第26页 |
| ·不同诱导子及其组合处理对白桦悬浮细胞中齐墩果酸积累的影响 | 第26-27页 |
| ·不同诱导子及其组合处理对白桦悬浮细胞白桦脂醇积累的影响 | 第27-28页 |
| ·不同诱导子及其组合处理对白桦悬浮细胞PAL活性的影响 | 第28-29页 |
| ·不同诱导子及其组合处理对白桦悬浮细胞SOD活性的影响 | 第29-30页 |
| ·不同诱导子及其组合处理对白桦悬浮细胞CAT活性的影响 | 第30页 |
| ·不同诱导子及其组合处理对白桦悬浮细胞POD活性的影响 | 第30-31页 |
| ·不同诱导子及其组合处理对白桦悬浮细胞APX活性的影响 | 第31-32页 |
| ·不同诱导子及其组合处理对白桦悬浮细胞丙二醛(MDA)含量的影响 | 第32页 |
| ·MeJA对白桦悬浮细胞NADPH氧化酶活性的影响 | 第32-33页 |
| ·活性氧清除酶系与白桦三萜积累相关性分析 | 第33-34页 |
| ·讨论 | 第34-36页 |
| ·诱导子及其组合处理对三萜类物质积累的影响 | 第34-35页 |
| ·诱导子及其组合处理对次级代谢相关酶活性的影响 | 第35-36页 |
| ·本章小结 | 第36-38页 |
| 3 MeJA诱导下白桦正向消减文库的构建及差异表达基因的分析 | 第38-55页 |
| ·材料与方法 | 第38页 |
| ·实验材料及处理 | 第38页 |
| ·主要酶及化学试剂 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-39页 |
| ·白桦悬浮细胞总RNA提取(Tris-CTAB法) | 第38-39页 |
| ·mRNA纯化 | 第39页 |
| ·mRNA浓度测定 | 第39页 |
| ·消减文库的构建 | 第39-46页 |
| ·cDNA第一链合成 | 第40页 |
| ·cDNA第二链合成 | 第40-41页 |
| ·Rsa I酶切 | 第41页 |
| ·接头的连接 | 第41-42页 |
| ·第一轮杂交 | 第42页 |
| ·第二轮杂交 | 第42-43页 |
| ·第一次PCR反应 | 第43页 |
| ·第二次PCR反应 | 第43页 |
| ·PCR产物纯化 | 第43-44页 |
| ·载体的连接及转化 | 第44页 |
| ·重组体插入片段长度的PCR检测 | 第44-45页 |
| ·消减文库的测序和EST生物信息学分析 | 第45页 |
| ·利用实时荧光定量PCR对MeJA诱导差异基因表达特性分析 | 第45-46页 |
| ·结果与分析 | 第46-53页 |
| ·总RNA的提取和mRNA的分离 | 第46-47页 |
| ·cDNA文库消减效率的分析 | 第47页 |
| ·PCR扩增检测插入片段长度 | 第47页 |
| ·ESTs序列分析 | 第47-49页 |
| ·利用实时荧光定量PCR对MeJA诱导差异表达基因验证 | 第49-53页 |
| ·讨论 | 第53-54页 |
| ·本章小结 | 第54-55页 |
| 结论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-64页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
