摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-14页 |
第一章 引言 | 第14-35页 |
·DDIT 蛋白家族 | 第14-16页 |
·DDIT1、DDIT2 以及 DDIT3 蛋白的结构和功能 | 第14-16页 |
·DDIT4,即 REDD1 的结构及生物学特性 | 第16-24页 |
·REDD1 的结构和生化特征 | 第16-17页 |
·REDD1 的表达调控及生物学功能 | 第17-22页 |
·REDD1 与胚胎发育 | 第22-24页 |
·DDIT4L,即 REDD2 的结构及生物学特性 | 第24-26页 |
·REDD2 的发现及生物学功能 | 第24-25页 |
·REDD1 和 REDD2 的异同 | 第25-26页 |
·Wnt 信号通路系统概述 | 第26-31页 |
·Wnt 基因、蛋白 | 第26-27页 |
·经典 Wnt 信号通路 | 第27-28页 |
·非经典 Wnt 信号通路 | 第28-30页 |
·靶基因的激活和抑制调节 | 第30页 |
·Wnt 信号通路在肿瘤和人类疾病中的作用 | 第30-31页 |
·斑马鱼及其早期胚胎发育 | 第31-34页 |
·斑马鱼 | 第31-32页 |
·斑马鱼早期胚胎发育 | 第32-33页 |
·经典 Wnt 信号通路在中囊胚转换时期的作用 | 第33-34页 |
·立题依据和研究意义 | 第34-35页 |
第二章 斑马鱼 redd1 和 redd2 的克隆、表达和基因调控 | 第35-66页 |
·引言 | 第35-36页 |
·材料和方法 | 第36-49页 |
·化学试剂 | 第36页 |
·实验仪器 | 第36-37页 |
·实验动物 | 第37页 |
·提取总 RNA | 第37-38页 |
·扩增开放阅读框 | 第38-39页 |
·5’RACE 和 3’RACE | 第39-42页 |
·Blast 分析和序列比对 | 第42-43页 |
·系统进化分析 | 第43页 |
·基因结构和染色体定位分析 | 第43页 |
·普通 RT-PCR | 第43-44页 |
·原位杂交探针的合成 | 第44-45页 |
·整胚原位杂交 | 第45-48页 |
·基因表达调控实验样品的获得 | 第48页 |
·基因表达调控 | 第48-49页 |
·统计分析 | 第49页 |
·结果 | 第49-63页 |
·斑马鱼 redd1 和 redd2 基因的克隆和序列分析 | 第49-57页 |
·斑马鱼 redd1 和 redd2 基因具有不同的时空表达方式 | 第57-59页 |
·斑马鱼 redd1 和 redd2 基因具有不同的表达调控方式 | 第59-63页 |
·讨论 | 第63-66页 |
第三章 斑马鱼 redd1 和 redd2 基因通过拮抗经典 Wnt 信号通路来调节胚胎背腹轴发育 | 第66-85页 |
·引言 | 第66-68页 |
·材料和方法 | 第68-73页 |
·化学试剂 | 第68页 |
·实验仪器 | 第68页 |
·实验动物 | 第68页 |
·RNA 的提取和反转录合成 cDNA | 第68页 |
·mRNA 的合成 | 第68-70页 |
·显微注射 | 第70页 |
·Western 免疫印迹中样品的制备 | 第70页 |
·Western 免疫印迹 | 第70-71页 |
·整胚原位杂交 | 第71页 |
·细胞培养和转染 | 第71-72页 |
·荧光素酶活性检测 | 第72-73页 |
·统计分析 | 第73页 |
·结果 | 第73-82页 |
·过表达斑马鱼 redd1 和 redd2 基因使胚胎产生腹部化表型 | 第73-75页 |
·redd1 和 redd2 基因敲降的胚胎呈现背部化表型 | 第75-77页 |
·斑马鱼 redd1 和 redd2 基因影响胚胎的背腹轴发育 | 第77-78页 |
·过表达斑马鱼Redd1和Redd2在体内和体外均拮抗经典Wnt信号通路 | 第78-80页 |
·斑马鱼 Redd1 和 Redd2 抑制经典 Wnt 信号通路的机制探讨 | 第80-82页 |
·讨论 | 第82-85页 |
第四章 总结与展望 | 第85-88页 |
参考文献 | 第88-96页 |
致谢 | 第96-97页 |
个人简历 | 第97-98页 |
博士期间发表与撰写的文章 | 第98页 |