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抗性浸矿细菌的选育及抗性机理研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-13页
第一章 文献综述第13-28页
   ·前言第13-14页
   ·嗜酸氧化亚铁硫杆菌的生物学特征第14-15页
     ·形态特征第14页
     ·生长条件第14-15页
     ·分类地位第15页
   ·影响嗜酸氧化亚铁硫杆菌生长的因素第15-19页
     ·pH值的影响第15页
     ·温度的影响第15页
     ·金属离子的影响第15-19页
   ·金属离子对细胞毒性作用的机理第19-20页
   ·细胞对重金属离子的抗性机制研究第20-24页
     ·细胞壁与膜的表面富集第20-21页
     ·细胞外的沉淀和结晶作用第21页
     ·与细胞运输有关的抗性机制第21-22页
     ·细胞内的隔离作用和解毒作用第22页
     ·金属离子的转化作用第22页
     ·重金属离子抗性的抗性基因研究第22-23页
     ·同价阳离子的存在会增加微生物的重金属抗性第23-24页
   ·嗜酸氧化亚铁硫杆菌驯化诱变育种理论第24-26页
   ·嗜酸氧化亚铁硫杆菌在细菌浸出中存在的问题和本文的研究内容第26-28页
第二章 嗜酸氧化亚铁硫杆菌的筛选及16S rDNA鉴定第28-43页
   ·前言第28-29页
   ·实验材料与方法第29-33页
     ·实验菌株及培养方法第29页
     ·实验仪器第29页
     ·实验试剂第29-30页
     ·实验菌株的分离及对亚铁的氧化第30页
     ·实验菌株对硫的氧化及pH值的变化第30页
     ·实验菌株基因组DNA提取第30-31页
     ·基因组DNA的琼脂糖凝胶电泳检测第31页
     ·实验菌株16S rDNA PCR扩增第31-32页
     ·PCR扩增产物检测第32页
     ·PCR扩增产物的纯化及测序第32-33页
   ·实验结果与分析第33-41页
     ·实验菌株分离纯化第33-34页
     ·实验菌株对亚铁及升华硫的氧化能力分析第34-35页
     ·基因组DNA的提取及16S rDNA PCR扩增第35-36页
     ·实验菌株16S rDNA序列分析第36-41页
     ·实验菌株的系统发育分析第41页
   ·本章小结第41-43页
第三章 抗铜嗜酸氧化亚铁硫杆菌的驯化诱变育种及抗铜机理分析第43-70页
   ·前言第43-44页
   ·材料与方法第44-50页
     ·实验菌株与培养基第44-45页
     ·菌株的富集第45页
     ·筛选天然抗铜能力最高菌株第45页
     ·菌株的驯化第45页
     ·紫外诱变第45页
     ·制作驯化诱变菌与驯化菌生长曲线第45-46页
     ·基因组DNA的提取第46页
     ·琼脂糖凝胶电泳检测第46页
     ·抗铜基因的引物设计及PCR扩增第46-47页
     ·琼脂糖凝胶电泳检测及PCR反应产物分析第47-48页
     ·用real time PCR进行抗铜基因差异表达分析第48-50页
     ·铜蓝浸出实验第50页
   ·实验结果及分析第50-67页
     ·天然铜抗能力最强菌株的选择第50-51页
     ·26~#菌株最高铜耐受能力测定第51页
     ·菌株驯化第51页
     ·诱变菌的致死率及生长曲线第51-52页
     ·抗铜基因与AFE0454的比对分析第52-56页
     ·抗铜蛋白的同源蛋白的搜索第56-57页
     ·抗铜蛋白序列分析第57-58页
     ·抗铜蛋白的进化分析第58-59页
     ·嗜酸氧化亚铁硫杆菌抗铜机理的预测第59-60页
     ·AFE0454基因的差异表达第60-65页
     ·铜蓝浸出实验第65-67页
   ·讨论第67-68页
   ·本章小结第68-70页
第四章 银抗性嗜酸氧化亚铁硫杆菌的选育诱变及抗银机理研究第70-82页
   ·前言第70页
   ·材料与方法第70-73页
     ·菌种来源及富集第70-71页
     ·银抗性菌株的驯化及分离纯化第71页
     ·银抗性菌对Fe~(2+)的氧化能力测定第71页
     ·银抗性菌对其它重金属离子的耐性实验第71页
     ·银抗性菌的16S rDNA鉴定第71-73页
     ·银抗性菌的紫外诱变第73页
     ·银抗性菌的抗银机理分析第73页
   ·实验结果第73-78页
     ·菌种来源与富集第73-74页
     ·银抗性菌的驯化及分离纯化第74页
     ·Ag~+对DX16和H1的Fe~(2+)氧化能力的影响第74页
     ·银抗性菌对其它重金属离子的耐受能力第74-75页
     ·DX16及H1的16 SrDNA鉴定第75-76页
     ·DX16的紫外诱变第76-78页
     ·DX16的抗银机理分析第78页
   ·分析讨论第78-81页
   ·本章小结第81-82页
第五章 嗜酸氧化亚铁硫杆菌抗砷基因arsH的克隆测序及功能分析第82-92页
   ·前言第82-84页
   ·材料与方法第84-85页
     ·实验菌株与生长条件第84页
     ·纯化菌株的总DNA提取第84页
     ·抗砷基因arsH引物设计及PCR增幅第84页
     ·PCR扩增产物的纯化及克隆第84-85页
     ·PCR克隆产物的序列分析第85页
   ·实验结果第85-89页
     ·细菌基因组DNA的提取及鉴定第85页
     ·细菌arsH基因的扩增克隆及测序第85-87页
     ·arsH基因表达产物arsH蛋白分析第87-88页
     ·arsH蛋白的结构分析第88-89页
   ·讨论第89-91页
   ·本章小结第91-92页
第六章 阴离子对嗜酸氧化亚铁硫杆菌亚铁氧化活性的影响第92-101页
   ·前言第92页
   ·材料与方法第92-94页
     ·菌种来源和富集第92页
     ·菌种的分离纯化第92-93页
     ·菌种氧化活性研究第93页
     ·纯化菌株的16S rDNA鉴定第93页
     ·不同金属盐对细菌Fe~(2+)氧化活性的影响第93-94页
   ·实验结果第94-98页
     ·菌种富集及分离纯化第94页
     ·实验菌株对Fe~(2+)的氧化第94页
     ·实验菌株对硫的氧化第94页
     ·At.ferrooxidans在不同阴离子锌盐条件下的生长活性第94-98页
   ·结果分析第98-100页
   ·本章小结第100-101页
第七章 结论第101-103页
参考文献第103-114页
致谢第114-115页
攻读学位期间主要的研究成果第115-116页

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