| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 1 引言 | 第12-15页 |
| 2 材料与方法 | 第15-28页 |
| ·实验材料 | 第15-21页 |
| ·菌株 | 第15页 |
| ·质粒 | 第15-17页 |
| ·培养基 | 第17-18页 |
| ·溶液和缓冲液 | 第18-21页 |
| ·实验方法 | 第21-28页 |
| ·芽孢杆菌总DNA的提取 | 第21页 |
| ·大肠杆菌的转化 | 第21-22页 |
| ·枯草芽孢杆菌的转化 | 第22页 |
| ·短小芽孢杆菌转化 | 第22页 |
| ·大肠杆菌质粒的提取 | 第22页 |
| ·芽孢杆菌质粒的提取 | 第22-23页 |
| ·蛋白酶活性的平板检测 | 第23页 |
| ·碱性蛋白酶在枯草杆菌WB600中的发酵培养 | 第23页 |
| ·蛋白酶酶活检测 | 第23-24页 |
| ·变性不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第24-25页 |
| ·SDS聚丙烯酰胺凝胶的银染 | 第25页 |
| ·温度交替不对称PCR | 第25-26页 |
| ·常规PCR | 第26-27页 |
| ·DNA片段的回收和PCR产物的纯化 | 第27页 |
| ·DNA序列测定分析与引物合成 | 第27页 |
| ·限制酶切和凝胶电泳 | 第27页 |
| ·载体的去磷酸化和DNA连接 | 第27-28页 |
| 3 结果 | 第28-51页 |
| ·短小芽孢杆菌碱性蛋白酶基因启动子的克隆 | 第28-33页 |
| ·碱性蛋白酶基因启动子的序列分析 | 第33-38页 |
| ·启动子序列的鉴别 | 第33-35页 |
| ·碱性蛋白酶基因启动子的保守序列分析 | 第35-36页 |
| ·启动子序列的同源分析 | 第36-38页 |
| ·碱性蛋白酶基因的表达 | 第38-43页 |
| ·表达质粒pSUBpWAp的构建 | 第38-39页 |
| ·pSUBpWAp在枯草芽孢杆菌WB600中的表达 | 第39-42页 |
| ·pSUBpWAp在短小芽孢杆菌中的表达 | 第42-43页 |
| ·碱性蛋白酶基因启动子的功能研究 | 第43-45页 |
| ·碱性蛋白酶基因整合载体的构建 | 第45-51页 |
| ·短小芽孢杆菌16s rDNA的克隆 | 第46-48页 |
| ·碱性蛋白酶基因整合质粒的构建 | 第48-51页 |
| 4 讨论 | 第51-55页 |
| ·基因启动子的克隆 | 第51-52页 |
| ·启动子序列的识别 | 第52-53页 |
| ·整合型载体同源整合的效率 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-59页 |
| 文献综述 启动子与转录调控研究进展 | 第59-88页 |
| 摘要 | 第60-61页 |
| 1 启动子概述 | 第61-62页 |
| ·启动子的概念 | 第61页 |
| ·启动子的研究意义 | 第61-62页 |
| 2 启动子的分类 | 第62-63页 |
| 3 启动子结构 | 第63-70页 |
| ·原核生物的启动子结构 | 第63-68页 |
| ·操纵子 | 第63页 |
| ·启动子的序列 | 第63-68页 |
| ·真核生物的启动子结构 | 第68-70页 |
| ·真核生物RNA聚合酶Ⅱ启动子 | 第68页 |
| ·启动子保守序列 | 第68-70页 |
| 4 启动子的克隆方法 | 第70-72页 |
| ·利用启动子探针载体筛选启动子 | 第70-71页 |
| ·利用PCR技术克隆启动子 | 第71-72页 |
| 5 启动子的识别与预测 | 第72-74页 |
| 6 启动子与转录调控 | 第74-82页 |
| ·转录的定义 | 第74页 |
| ·原核生物的转录调控 | 第74-80页 |
| ·RNA聚合酶与启动子的结合 | 第74-75页 |
| ·σ因子与启动子 | 第75-78页 |
| ·调节蛋白与启动子 | 第78-80页 |
| ·真核生物的转录调控 | 第80-82页 |
| ·RNA聚合酶 | 第80-81页 |
| ·启动子对转录的调控 | 第81-82页 |
| 展望 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 在读期间发表论文情况 | 第89-90页 |