| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-15页 |
| 第一节 转录中介因子KAP1 | 第9-11页 |
| 第二节 组蛋白去乙酰化酶SIRT1 | 第11-13页 |
| 第三节 蛋白磷酸酶PPM1A | 第13-15页 |
| 第二章 材料与方法 | 第15-44页 |
| 第一节 实验材料 | 第15-18页 |
| 1. 菌种和细胞株 | 第15页 |
| 2. 质粒 | 第15页 |
| 3. 酶和抗体 | 第15-16页 |
| 4. 其他主要试剂和耗材 | 第16-17页 |
| 5. 实验仪器设备 | 第17-18页 |
| 第二节 实验方法 | 第18-44页 |
| 1. 课题研究路线 | 第18页 |
| 2. shPPM1A克隆构建 | 第18-21页 |
| 3. 重组质粒的转化和鉴定 | 第21-22页 |
| 4. 质粒大量抽提 | 第22-23页 |
| 5. 细胞总RNA的提取 | 第23-24页 |
| 6. 逆转录反应(RT-PCR) | 第24-25页 |
| 7. 实时荧光定量PCR(Real-time Quantitative PCR) | 第25-27页 |
| 8. 细胞培养 | 第27-28页 |
| 9. 细胞的转染 | 第28-30页 |
| 10. 慢病毒的包装、感染和稳定单克隆细胞株的筛选 | 第30-33页 |
| 11. 免疫荧光染色技术 | 第33-34页 |
| 12. 免疫(共)沉淀技术 | 第34-35页 |
| 13. Western blot技术 | 第35-44页 |
| 第三章 结果与分析 | 第44-52页 |
| 第一节 PPM1A和KAP1的关系研究 | 第44-49页 |
| 1. PPM1A是KAP的磷酸酶 | 第44-46页 |
| 2. 抑制PPM1A的表达对KAP1的功能有影响 | 第46-49页 |
| 第二节 PPM1A和SIRT1的关系研究 | 第49-52页 |
| 1. PPM1A是SIRT1的磷酸酶 | 第49-51页 |
| 2. PPM1A能影响SIRT1去乙酰化活性 | 第51-52页 |
| 第四章 总结和讨论 | 第52-54页 |
| 附录 | 第54-61页 |
| 硕士期间科研成果 | 第54-55页 |
| 1. 常用试剂配方 | 第55-56页 |
| 2. 质粒大量抽提试剂配方 | 第56-58页 |
| 3. Western Blot中所用溶液 | 第58-59页 |
| 4. 琼脂糖凝胶电泳所用溶液 | 第59页 |
| 5. IF实验中所用溶液 | 第59-60页 |
| 6. 英文名词和缩写 | 第60-61页 |
| References | 第61-65页 |
| 致谢 | 第65页 |