表索引 | 第1-6页 |
图索引 | 第6-7页 |
中英文缩略词表 | 第7-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
前言 | 第11-25页 |
一、食管癌研究进展 | 第11-19页 |
二、miRNA研究进展 | 第19-23页 |
三、PDK1与PI3K/Akt信号通路在细胞周期调控中的作用 | 第23-25页 |
实验材料 | 第25-31页 |
一、实验样本 | 第25页 |
二、主要试剂 | 第25-27页 |
三、溶液配制 | 第27-29页 |
四、主要仪器设备 | 第29-31页 |
实验方法 | 第31-60页 |
一、组织样本采集 | 第31页 |
二、细胞系 | 第31-32页 |
三、总RNA提取及miRNA富集 | 第32-35页 |
四、TaqMan(?) Human MicroRNA Arrays检测 | 第35-38页 |
五、半定量RT-PCR检测mRNA表达水平 | 第38-40页 |
六、实时定量PCR(real-time RT-PCR) | 第40-43页 |
七、蛋白印迹Western Blotting | 第43-46页 |
八、细胞转染 | 第46-48页 |
九、细胞功能实验 | 第48-50页 |
十、质粒构建 | 第50-56页 |
十一、双荧光素酶报告基因实验 | 第56-59页 |
十二、PDK1回复实验 | 第59页 |
十三、统计分析方法 | 第59-60页 |
实验结果 | 第60-81页 |
一、miRNA在食管黏膜鳞状上皮癌变不同阶段的差异表达 | 第60-65页 |
二、细胞miR-375检测及细胞功能实验 | 第65-74页 |
三、miR-375下游靶基因生物信息学预测 | 第74-75页 |
四、miR-375下游靶基因生物学实验验证 | 第75-81页 |
讨论 | 第81-88页 |
小结 | 第88-89页 |
基金资助 | 第89-90页 |
参考文献 | 第90-99页 |
文献综述 | 第99-119页 |
参考文献 | 第110-119页 |
致谢 | 第119-120页 |
个人简历 | 第120-121页 |