摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-28页 |
·BT 毒素的研究进展 | 第12-14页 |
·Bt 毒素的分类 | 第12-13页 |
·Bt 毒蛋白的作用机理 | 第13页 |
·Bt 基因工程 | 第13-14页 |
·昆虫对BT 抗性研究进展 | 第14-21页 |
·昆虫对Bt 抗性的发展 | 第14-15页 |
·昆虫对Bt 的抗性机制 | 第15页 |
·Bt 受体的研究进展 | 第15-21页 |
·蛋白转导研究进展 | 第21-24页 |
·蛋白转导结构域的发现 | 第21-22页 |
·TAT-PTD 转导机制的研究 | 第22-24页 |
·PTD 应用概述 | 第24页 |
·昆虫杆状病毒表达系统 | 第24-27页 |
·杆状病毒/昆虫表达系统的发展历史 | 第24-26页 |
·昆虫杆状病毒表达系统的优点 | 第26页 |
·重组杆状病毒的构建 | 第26页 |
·BEVS 的应用 | 第26-27页 |
·本研究的目的和意义 | 第27-28页 |
第二章 研究内容和技术路线 | 第28-30页 |
·研究内容 | 第28页 |
·技术路线 | 第28-30页 |
第三章 融合蛋白的毒力测定 | 第30-38页 |
·材料和试剂 | 第30-32页 |
·实验方法 | 第32-34页 |
·融合蛋白TAT-Cry1Ac 的构建 | 第32-33页 |
·TAT-Cry1Ac 融合基因在大肠杆菌BL21 中的诱导表达 | 第33-34页 |
·融合蛋白的生物测定 | 第34页 |
·结果与分析 | 第34-36页 |
·融合蛋白的诱导表达 | 第34-35页 |
·六种融合杀虫蛋白的毒力测定结果 | 第35-36页 |
·小结 | 第36-38页 |
第四章 小菜蛾类钙粘蛋白基因的克隆及序列分析 | 第38-59页 |
·试验材料 | 第38-40页 |
·试验方法 | 第40-44页 |
·小菜蛾中肠RNA 的提取 | 第40页 |
·反转录 | 第40-41页 |
·钙粘蛋白(CAD)的PCR 扩增 | 第41页 |
·PCR 产物的回收纯化 | 第41-42页 |
·PCR 纯化产物与pEASY-T1 载体的连接 | 第42页 |
·转化感受态细胞TOP 10 | 第42页 |
·质粒DNA 的提取 | 第42页 |
·检测 | 第42-43页 |
·钙粘蛋白序列测定 | 第43-44页 |
·结果与分析 | 第44-58页 |
·小菜蛾中肠RNA 提取 | 第44页 |
·CAD 的PCR 扩增 | 第44-45页 |
·质粒酶切及PCR | 第45-46页 |
·核酸序列结果与分析 | 第46-58页 |
·小结 | 第58-59页 |
第五章 CAD 的表达及鉴定 | 第59-73页 |
·材料和试剂 | 第59-61页 |
·试验方法 | 第61-67页 |
·双酶切重组质粒(pEASY-T/CAD)和供体质粒(pFastBacHTb) | 第61页 |
·胶回收 | 第61-62页 |
·连接 | 第62页 |
·转化至TOP10 | 第62页 |
·质粒DNA 的提取 | 第62页 |
·双酶切及PCR 鉴定 | 第62-63页 |
·DH108ac 感受态细胞的制备 | 第63页 |
·转化至DH108ac | 第63页 |
·提取杆粒Bac/CAD DNA | 第63-64页 |
·PCR 鉴定 | 第64页 |
·共转染 | 第64-66页 |
·亲和能力测定(采用ELISA) | 第66-67页 |
·结果与分析 | 第67-72页 |
·重组转移载体pFastBacHTb/CAD 的构建 | 第67-68页 |
·重组杆状病毒的鉴定 | 第68-69页 |
·重组病毒转染Tn 细胞 | 第69-70页 |
·CAD 在昆虫细胞中的表达 | 第70-71页 |
·亲和能力测定 | 第71-72页 |
·小结 | 第72-73页 |
第六章 结论 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-84页 |
致谢 | 第84-85页 |
作者简历 | 第85页 |