| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 英文缩略表 | 第13-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-30页 |
| ·禽流感病毒简介 | 第15-17页 |
| ·禽流感病毒的基因组结构 | 第15-16页 |
| ·禽流感病毒的形态结构 | 第16-17页 |
| ·禽流感的流行及危害 | 第17-21页 |
| ·H5 和H7 亚型AI 的流行现状 | 第17-19页 |
| ·H9N2 亚型AI 流行现状 | 第19-21页 |
| ·禽流感的实验室诊断及研究进展 | 第21-28页 |
| ·病原学的诊断方法 | 第21-22页 |
| ·血清学的诊断方法 | 第22-26页 |
| ·分子生物学诊断技术 | 第26-28页 |
| ·展望与讨论 | 第28页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第28-30页 |
| 第二章 H9 亚型禽流感病毒单克隆抗体的制备及鉴定 | 第30-43页 |
| ·材料 | 第30-31页 |
| ·毒株 | 第30页 |
| ·试验用动物及细胞 | 第30页 |
| ·试验用主要试剂 | 第30-31页 |
| ·主要仪器与耗材 | 第31页 |
| ·方法 | 第31-36页 |
| ·全病毒纯化抗原的制备 | 第31页 |
| ·小鼠免疫 | 第31页 |
| ·单抗筛选方法的建立 | 第31-32页 |
| ·杂交瘤细胞株的建立 | 第32-33页 |
| ·杂交瘤细胞的选择性培养及单克隆抗体的筛选检测 | 第33-34页 |
| ·杂交瘤细胞的冻存和复苏 | 第34页 |
| ·单克隆抗体的大量制备 | 第34页 |
| ·杂交瘤细胞培养上清及腹水中单抗效价的测定 | 第34-35页 |
| ·抗体亚类的测定 | 第35页 |
| ·特异性实验 | 第35页 |
| ·间接免疫荧光实验（IFA） | 第35页 |
| ·杂交瘤细胞的染色体分析 | 第35-36页 |
| ·中和试验 | 第36页 |
| ·结果与分析 | 第36-40页 |
| ·抗原的制备 | 第36页 |
| ·ELISA 筛选方法的建立 | 第36页 |
| ·细胞融合与筛选 | 第36-37页 |
| ·针对病毒HA 蛋白单克隆抗体细胞株的建立 | 第37页 |
| ·腹水效价的测定 | 第37页 |
| ·单抗的抗体亚类鉴定 | 第37-38页 |
| ·与H9 亚型不同分离株的抗原性交叉反应实验 | 第38页 |
| ·单抗特异性试验 | 第38页 |
| ·间接免疫荧光（IFA） | 第38-39页 |
| ·杂交瘤细胞的染色体分析 | 第39-40页 |
| ·单抗的中和试验 | 第40页 |
| ·讨论 | 第40-43页 |
| ·免疫原的制备 | 第40-41页 |
| ·细胞融合 | 第41页 |
| ·杂交瘤细胞系的筛选 | 第41-42页 |
| ·单抗对H9 亚型病毒分离株的交叉反应性 | 第42页 |
| ·中和试验 | 第42-43页 |
| 第三章 H9亚型禽流感病毒抗原捕获ELISA 方法的建立 | 第43-67页 |
| ·材料 | 第43-44页 |
| ·病毒 | 第43页 |
| ·单抗 | 第43页 |
| ·实验动物 | 第43页 |
| ·实验用阴阳性对照抗原 | 第43页 |
| ·主要仪器设备及耗材 | 第43-44页 |
| ·主要试剂和溶液 | 第44页 |
| ·实验方法 | 第44-49页 |
| ·单克隆抗体的筛选 | 第44-45页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第45页 |
| ·单克隆抗体纯度测定 | 第45页 |
| ·酶标抗体的制备 | 第45-46页 |
| ·酶标抗体工作浓度滴定 | 第46页 |
| ·单抗夹心ELISA 方法的建立 | 第46-48页 |
| ·检测病毒尿囊液阴阳性判定标准的确定 | 第48页 |
| ·抗原捕获ELISA 方法与H9 亚型禽流感不同分离株的交叉试验 | 第48页 |
| ·特异性试验 | 第48页 |
| ·H9 亚型禽流感病毒人工感染样本的检测 | 第48页 |
| ·人工感染样本阴阳性判定标准的确定 | 第48页 |
| ·敏感性试验 | 第48-49页 |
| ·重复性试验 | 第49页 |
| ·保存期试验 | 第49页 |
| ·实验结果 | 第49-64页 |
| ·单抗筛选 | 第49-50页 |
| ·抗体的纯化及浓度测定 | 第50-51页 |
| ·酶标单抗的制备及工作浓度滴定 | 第51-52页 |
| ·捕获抗体最佳稀释度选择 | 第52页 |
| ·抗原最佳稀释度的确定 | 第52-54页 |
| ·酶标抗体稀释倍数的确定 | 第54页 |
| ·包被液的选择 | 第54-55页 |
| ·包被条件的选择 | 第55页 |
| ·不同封闭液的选择 | 第55-56页 |
| ·封闭时间的确定 | 第56-57页 |
| ·抗原作用时间的确定 | 第57-58页 |
| ·酶标抗体作用时间的确定 | 第58-59页 |
| ·显色时间的选择 | 第59页 |
| ·检测病毒尿囊液阴阳性判定标准的确定 | 第59-60页 |
| ·抗原捕获ELISA 方法与H9 亚型禽流感不同分离株的交叉试验 | 第60页 |
| ·特异性试验 | 第60-61页 |
| ·敏感性试验 | 第61页 |
| ·H9 亚型禽流感病毒人工感染样本的检测 | 第61-63页 |
| ·重复性实验 | 第63-64页 |
| ·保存期试验 | 第64页 |
| ·讨论 | 第64-67页 |
| ·关于抗原捕捉ELISA 检测方法的建立 | 第64-65页 |
| ·ELISA 反应条件的优化 | 第65-66页 |
| ·ELISA 反应形式的选择 | 第65-66页 |
| ·捕获单抗和标记单抗最佳配对的选择 | 第66页 |
| ·单抗的纯化和酶标记 | 第66页 |
| ·本试验的不足之处 | 第66-67页 |
| 第四章 全文结论 | 第67-68页 |
| ·获得三株H9 亚型HA 特异性单克隆抗体 | 第67页 |
| ·建立了H9 亚型禽流感病毒抗原捕获ELISA 方法 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 作者简历 | 第78页 |
