| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 论文中缩写说明表 | 第11-12页 |
| 1.前言 | 第12-27页 |
| ·油菜雄性不育的研究 | 第12-15页 |
| ·油菜细胞质不育 | 第12-13页 |
| ·油菜核不育 | 第13-15页 |
| ·植物雄配子发育研究 | 第15-17页 |
| ·雄配子败育的相关因素及基因 | 第15-17页 |
| ·RAD基因的研究进展 | 第17-19页 |
| ·RAD基因的功能 | 第17页 |
| ·RAD基因的研究 | 第17-19页 |
| ·XPC基因的研究进展 | 第19-20页 |
| ·NER修复过程 | 第19-20页 |
| ·XPC基因的研究 | 第20页 |
| ·克隆全长cDNA技术 | 第20-24页 |
| ·克隆全长cDNA常用方法 | 第20-23页 |
| ·EST技术的应用 | 第23-24页 |
| ·植物启动子特征及克隆启动子的方法 | 第24-25页 |
| ·植物启动子特征 | 第24页 |
| ·植物启动子的分类 | 第24-25页 |
| ·植物启动子的克隆方法 | 第25页 |
| ·本课题研究的目的和意义 | 第25-27页 |
| 2.材料与方法 | 第27-36页 |
| ·材料 | 第27页 |
| ·Bnrad23基因全长cDNA的克隆测序分析 | 第27-32页 |
| ·总RNA的提取 | 第27页 |
| ·利用RACE技术分别获得Bnrad23基因的两端侧翼序列 | 第27-30页 |
| ·3'Race扩增 | 第28-29页 |
| ·5'Race扩增 | 第29-30页 |
| ·RACE产物的检测、纯化及克隆测序 | 第30-31页 |
| ·RACE产物的检测 | 第30页 |
| ·RACE产物的纯化 | 第30页 |
| ·RACE产物的克隆测序 | 第30-31页 |
| ·RACE技术所获cDNA序列的生物信息学分析 | 第31页 |
| ·基因组DNA序列的克隆 | 第31-32页 |
| ·引物设计 | 第31页 |
| ·基因组DNA提取 | 第31页 |
| ·基因组扩增 | 第31-32页 |
| ·基因组DNA序列分析 | 第32页 |
| ·半定量RT-PCR | 第32-33页 |
| ·Rs1046AB和9012AB的RNA提取 | 第32页 |
| ·引物设计 | 第32页 |
| ·循环数确定 | 第32页 |
| ·半定量PCR检测 | 第32-33页 |
| ·Bnrad23基因启动子的分离测序 | 第33-36页 |
| ·合成寡核苷酸制作接头 | 第33-34页 |
| ·Bnrad23基因启动子的分离及序列测定 | 第34-36页 |
| ·限制性内切酶消化基因组DNA | 第34页 |
| ·纯化DNA片段 | 第34页 |
| ·接头与纯化后酶切产物的连接 | 第34-35页 |
| ·巢式PCR扩增 | 第35-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-50页 |
| ·总RNA质量检测和浓度测定 | 第36页 |
| ·Bnrad23基因全长cDNA克隆及序列分析 | 第36-43页 |
| ·3'RACE扩增Bnrad23基因3'端侧翼序列 | 第36-37页 |
| ·5'RACE扩增Bnrad23基因5'端侧翼序列 | 第37-38页 |
| ·Bnrad23基因组全长扩增结果 | 第38-39页 |
| ·序列结构分析 | 第39-43页 |
| ·Bnrad23基因全长cDNA序列阅读框分析 | 第39-40页 |
| ·Bnrad23基因编码蛋白分析 | 第40-43页 |
| ·Bnrad23基因组DNA序列分析 | 第43-44页 |
| ·基因组预测 | 第43页 |
| ·Bnrad23基因在Rs1046AB中的序列比对 | 第43-44页 |
| ·Bnrad23基因启动子的分离 | 第44-45页 |
| ·Bnrad23基因编码区在9012AB中的扩增 | 第45-46页 |
| ·Brassica napus RAD23-like protein cDNA的克隆 | 第46-47页 |
| ·Brassica napus RAD23-like protein cDNA的部分cDNA克隆 | 第46页 |
| ·Brassica napus RAD23-like protein cDNA序列分析和蛋白预测 | 第46-47页 |
| ·2个EST的半定量结果 | 第47-50页 |
| ·指数期循环参数的确定 | 第47-48页 |
| ·半定量RT-PCR的结果 | 第48-50页 |
| 4.讨论 | 第50-54页 |
| ·部分技术手段的讨论 | 第50-51页 |
| ·实验结果的讨论 | 第51-53页 |
| ·下一步研究策略 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 附录1 Bnrad23全长cDNA | 第62页 |
| 附录2 Bnrad23基因组信息(含部分启动子序列) | 第62-64页 |
| 附录3 Brassica napus RAD23-like protein cDNA序列 | 第64-65页 |
| 附录4 UNIQ-10柱式DNA胶回收试剂盒操作说明 | 第65页 |
| 附录5 热激感受态的制备 | 第65-66页 |
| 附录6 总RNA提取 | 第66页 |
| 附录7 大量法提取油菜总DNA | 第66-67页 |
