| 提要 | 第1-8页 |
| 英文缩略词 | 第8-9页 |
| 引言 | 第9-25页 |
| 1 口蹄疫简介 | 第9-12页 |
| 2 口蹄疫新型疫苗研究进展 | 第12-17页 |
| ·亚单位疫苗 | 第12-13页 |
| ·合成肽疫苗 | 第13-14页 |
| ·病毒载体疫苗 | 第14页 |
| ·核酸疫苗 | 第14-15页 |
| ·转基因植物疫苗 | 第15-16页 |
| ·重组蛋白疫苗 | 第16-17页 |
| 3 重组表位疫苗的设计与结构分析 | 第17-24页 |
| ·表位疫苗研制的理论基础 | 第17-18页 |
| ·重组蛋白疫苗中抗原表位的筛选 | 第18-20页 |
| ·重组蛋白疫苗中抗原表位的串联 | 第20-22页 |
| ·重组蛋白疫苗结构的预测 | 第22-24页 |
| 4 本课题的意义和内容 | 第24-25页 |
| 材料与方法 | 第25-43页 |
| 1 实验材料与仪器 | 第25-27页 |
| ·限制性内切酶及其他试剂 | 第25页 |
| ·菌种及质粒 | 第25页 |
| ·培养基 | 第25-26页 |
| ·实验动物及其他 | 第26页 |
| ·主要实验设备 | 第26-27页 |
| ·引物由上海生工生物工程有限公司合成 | 第27页 |
| 2 引物的设计 | 第27页 |
| ·重组牛O型口蹄疫蛋白疫苗基因片段引物的设计 | 第27页 |
| ·重组牛O型口蹄疫蛋白疫苗突变体基因片段引物的设计 | 第27页 |
| 3 实验方法 | 第27-43页 |
| ·牛O型口蹄疫病毒B细胞表位，T细胞表位的确定 | 第27-28页 |
| ·重组牛O型口蹄疫蛋白疫苗3-D结构的预测 | 第28页 |
| ·重组牛O型口蹄疫蛋白疫苗及突变体的构建 | 第28-33页 |
| ·重组牛O型口蹄疫蛋白工程菌的筛选 | 第33-34页 |
| ·重组牛O型口蹄疫蛋白工程菌的发酵 | 第34-37页 |
| ·重组牛O型口蹄疫蛋白疫苗的纯化 | 第37-39页 |
| ·重组牛O型口蹄疫蛋白的鉴定 | 第39-40页 |
| ·重组牛O型口蹄疫蛋白疫苗豚鼠免疫 | 第40-41页 |
| ·重组牛O型口蹄疫蛋白疫苗中和抗体检测 | 第41-42页 |
| ·重组牛O型口蹄疫蛋白疫苗突变体抗原性检测 | 第42-43页 |
| 实验结果 | 第43-68页 |
| 1 重组牛O型口蹄疫蛋白疫苗的设计 | 第43-46页 |
| ·牛O型口蹄疫病毒B细胞表位和T细胞表位的确定 | 第43-44页 |
| ·重组牛O型口蹄疫蛋白疫苗3-D结构的预测 | 第44-46页 |
| 2 重组牛O 型口蹄疫蛋白疫苗的构建，表达及鉴定 | 第46-50页 |
| ·重组牛O型口蹄疫蛋白疫苗的构建 | 第46-49页 |
| ·重组牛O型口蹄疫蛋白疫苗的表达及鉴定 | 第49-50页 |
| 3 重组牛O型口蹄疫蛋白疫苗的工程菌种筛选 | 第50-52页 |
| ·高效表达菌株筛选 | 第51-52页 |
| ·稳定性研究 | 第52页 |
| 4 重组牛O 型口蹄疫蛋白疫苗基因工程菌中试规模发酵培养 | 第52-55页 |
| 5 重组牛O 型口蹄疫蛋白疫苗的纯化 | 第55-57页 |
| 6 重组牛O 型口蹄疫蛋白疫苗的活性检测 | 第57-59页 |
| ·ELISA方法检测豚鼠血清FMDV特异性抗体 | 第57-58页 |
| ·乳鼠中和实验检测豚鼠血清FMDV中和抗体 | 第58-59页 |
| 7 重组牛O 型口蹄疫蛋白疫苗的结构优化 | 第59-68页 |
| ·FMD-J11 突变体的构建 | 第60-65页 |
| ·FMD-J11 突变体的表达及纯化 | 第65-67页 |
| ·FMD-J11 突变体抗原性的初步研究 | 第67-68页 |
| 讨论 | 第68-75页 |
| 1 重组蛋白空间结构与功能的关系 | 第68-70页 |
| 2 关于FMD-J11 包涵体复性问题的讨论 | 第70-72页 |
| 3 关于FMD-J11 重组蛋白免疫问题的讨论 | 第72-73页 |
| 4 关于FMD-J11 重组蛋白结构优化的讨论 | 第73-75页 |
| 结论 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-86页 |
| 中文摘要 | 第86-90页 |
| ABSTRACT | 第90-97页 |
| 致谢 | 第97页 |