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鸡Mx基因的克隆、表达及其抗病活性的研究

中文摘要第1-8页
英文摘要第8-10页
第一篇 文献综述第10-30页
 禽类Mx 蛋白与抗病育种的研究进展第10-30页
  1 Mx 蛋白的发现第10页
  2 不同动物的Mx 蛋白第10-11页
  3 Mx 蛋白的结构与功能第11页
  4 Mx 蛋白的表达调控第11-13页
  5 Mx 蛋白的抗病毒活性第13-14页
  6 禽类Mx 蛋白的研究进展第14-15页
  7 动物抗病性的遗传基础第15-17页
  8 抗病育种存在的问题第17-18页
  9 抗病育种的途径第18-20页
  10 精原干细胞第20-21页
  11 精原干细胞在转基因技术中的应用第21-24页
  12 研究展望第24页
  参考文献第24-30页
第二篇 试验研究第30-60页
 实验一 鸡Mx 基因全长cDNA 序列的克隆及序列分析第30-39页
  1 材料和方法第30-35页
   ·菌种及试剂第30-31页
   ·受精蛋第31页
   ·成纤维细胞的制备与培养第31页
   ·Mx 蛋白的诱导第31-32页
   ·RNA 的提取第32页
   ·RT-PCR 扩增第32-33页
   ·Mx cDNA 的克隆第33-35页
   ·序列分析第35页
  2 结果与分析第35-37页
   ·鸡成纤维细胞总RNA 的提取第35页
   ·鸡全长Mx cDNA 的扩增第35-36页
   ·测序结果第36-37页
   ·序列分析第37页
  3 讨论第37-38页
  参考文献第38-39页
 实验二 鸡Mx 蛋白基因的修饰、表达及抗病活性的研究第39-51页
  1 材料和方法第39-43页
   ·实验材料第39页
   ·试剂第39-40页
   ·引物设计第40页
   ·PCR 诱变修饰第40-41页
   ·表达载体的构建第41页
   ·脂质体法转染细胞第41-42页
   ·Mx 基因转染COS-Ⅰ细胞第42页
   ·RT-PCR 检测Mx 的表达第42页
   ·IFA 检测转染Mx 蛋白基因的表达第42页
   ·新城疫病毒接种细胞第42-43页
   ·新城疫病毒TCID_(50) 测定第43页
   ·抗新城疫病毒活性的检测第43页
  2 结果与分析第43-48页
   ·PCR 诱变修饰第43-44页
   ·真核表达载体的构建第44页
   ·RT-PCR 检测Mx 的表达第44-45页
   ·IFA 检测转染Mx 蛋白基因的表达第45-46页
   ·新城疫病毒TCID_(50) 测定第46-47页
   ·抗新城疫病毒试验第47-48页
  3 讨论第48-49页
  参考文献第49-51页
 实验三 精原干细胞体内介导Mx 基因生产转基因鸡的研究第51-60页
  1 材料和方法第51-53页
   ·实验材料第51页
   ·试剂第51页
   ·转染液制备第51-52页
   ·睾丸内注射pcDNA3.0-MMx 质粒DNA 片段第52页
   ·转染公鸡日常活动观察和鸡精子常规检测第52页
   ·人工授精第52页
   ·PCR 检测第52-53页
   ·统计方法第53页
  2 结果与分析第53-58页
   ·pcDNA3.0-MMx 质粒线性酶切第53-54页
   ·转染公鸡精子常规检测结果第54-55页
   ·转染精子检测第55页
   ·转基因F1 代检测第55-56页
   ·阳性转基因F1 代检测第56-58页
  3 讨论第58-59页
  参考文献第59-60页
全文结论第60-61页
致谢第61-62页
攻读学位期间发表的论文目录第62-63页

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