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水稻T-DNA插入黄叶突变体基因克隆与功能分析

摘要第1-8页
Abstract第8-15页
第一章 文献综述第15-32页
   ·水稻叶色突变体的产生方法第15-17页
     ·物理、化学诱变第15-16页
     ·T-DNA插入突变第16页
     ·转座子插入突变第16-17页
   ·水稻叶色突变体的类型第17-18页
   ·水稻叶色突变体的遗传规律第18页
   ·水稻叶色突变基因的定位第18-23页
   ·水稻叶色突变相关基因的克隆第23页
   ·叶色突变表型的光温调控第23-24页
   ·水稻叶色突变的分子机制第24-29页
     ·叶绿素合成受阻第24-27页
     ·叶绿体分化与发育受阻第27页
     ·质—核信号传导途径受阻第27-28页
     ·叶绿体蛋白转运受阻第28-29页
   ·叶色突变体的应用前景第29-31页
     ·叶色突变体在光形态建成中的应用第29页
     ·叶色突变体在植物激素生理中的应用第29-30页
     ·叶色突变体在植物病理中的应用第30页
     ·叶色突变体在功能基因组学研究中的应用第30页
     ·作为标记性状应用于水稻杂交育种第30-31页
     ·叶色突变体在高光效育种中的应用第31页
   ·本研究的目的和意义第31-32页
第二章 vyl突变体的鉴定与遗传分析第32-38页
   ·材料与方法第32-33页
     ·供试材料及其种植第32页
     ·DNA提取第32页
     ·除草剂Basta处理第32页
     ·PCR检测第32-33页
     ·Southern blot第33页
   ·结果与分析第33-36页
     ·vyl突变体的表型第33页
     ·vyl突变体的鉴定第33-36页
     ·vyl突变体的遗传分析第36页
   ·讨论第36-38页
第三章 vyl突变体的光合特性研究第38-44页
   ·材料与方法第38-39页
     ·供试材料及其种植第38页
     ·叶片叶绿素和β-胡萝卜素的测定第38页
     ·透射电子显微镜(TEM)分析第38-39页
     ·荧光动力学参数测定第39页
     ·类囊体膜色素蛋白复合体的分离与分析第39页
   ·结果与分析第39-42页
     ·vyl突变体的叶绿素含量动态分析第39页
     ·vyl突变体叶绿体发育的电镜动态分析第39页
     ·vyl突变体成熟叶的荧光动力学分析第39-42页
     ·vyl突变体类囊体膜色素蛋白复合体SDS-PAGE分析第42页
   ·讨论第42-44页
第四章 vyl突变体基因克隆与功能分析第44-58页
   ·材料与方法第44-47页
     ·供试材料第44页
     ·试剂第44-46页
     ·DNA提取第46页
     ·T-DNA插入位点右翼序列的扩增第46页
     ·质粒DNA的小量提取第46页
     ·琼脂糖凝胶DNA回收第46页
     ·DH5α大肠杆菌感受态的转化第46页
     ·T-DNA插入位点右翼序列生物信息学分析相关软件或工具第46页
     ·T-DNA插入与vyl突变体表型共分离的PCR检测第46页
     ·候选基因VYL的cDNA克隆第46-47页
     ·转基因植物表达载体的构建第47页
     ·候选基因VYL的功能互补验证第47页
     ·目的基因VYL组织与阶段表达特异性的Northern blot分析第47页
     ·目的基因VYL的亚细胞定位第47页
   ·结果与分析第47-57页
     ·T-DNA插入位点右翼序列扩增及其生物信息学分析第47-49页
     ·T-DNA插入与vyl突变体表型共分离分析第49页
     ·侯选基因VYL的cDNA克隆与序列分析第49-54页
     ·侯选基因VYL的功能互补验证第54-55页
     ·转基因植株的PCR鉴定第55页
     ·目的基因VYL的组织表达特异性分析第55页
     ·目的基因VYL在叶片不同发育阶段的表达特异性分析第55-56页
     ·目的基因VYL在洋葱表皮细胞中的亚细胞定位第56-57页
   ·讨论第57-58页
第五章 光照强度对水稻黄叶突变体yl光合特性的影响第58-64页
   ·材料与方法第58-59页
     ·供试材料及其种植第58页
     ·试剂第58页
     ·实验方法第58-59页
   ·结果与分析第59-63页
     ·yl突变体叶绿体发育的电镜观察与分析第59-61页
     ·yl突变体叶绿素含量测定与分析第61页
     ·yl突变体吸收光谱分析第61-62页
     ·yl突变体成熟叶片的荧光动力学分析第62-63页
     ·yl突变体的(Z+A)/(Z+A+V)测定与分析第63页
   ·讨论第63-64页
第六章 全文结论第64-65页
 1. vyl突变体是一种新型水稻叶色突变体第64页
 2. vyl变体是一个叶绿素b减少型突变体第64页
 3. VYL是一个新的叶色突变基因第64页
 4. 光照强度对yl突变体光合特性具有显著影响第64-65页
参考文献第65-76页
致谢第76-77页
作者简历第77-78页
附录第78-91页

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