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腺病毒介导的KDRP-CDglyTK-GFP系统对胃癌细胞靶向杀伤作用及机制的实验研究

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-21页
前言第21-26页
第一章 KDR启动子驱动双自杀基因的重组腺病毒的扩增和鉴定第26-39页
   ·实验材料第26-28页
   ·实验方法第28-33页
  1 293细胞的复苏和培养第28-29页
  2 从重组腺病毒质粒产生基因组结构均一的重组腺病毒第29-31页
  3 重组腺病毒的扩增第31页
  4 重组腺病毒的纯化第31页
  5 重组腺病毒滴度的测定第31-32页
  6 重组腺病毒外源基因的鉴定第32-33页
   ·实验结果第33-35页
  1 荧光显微镜检测重组腺病毒的转染包装过程第33-34页
  2 细胞病变第34页
  3 快速CPE法测定病毒滴度第34-35页
  4 重组腺病毒外源基因的鉴定第35页
   ·讨论第35-38页
   ·小结第38-39页
第二章 AdKDR-CDglyTK双自杀基因系统的体外实验第39-87页
   ·实验材料第39-42页
   ·实验方法第42-51页
  1 转基因细胞的形态学及生长特性观察第42-43页
  2 转染重组腺病毒细胞融合基因表达的鉴定第43-46页
  3 体外杀伤作用观察第46-48页
  4 双自杀基因诱导肿瘤细胞凋亡的观察第48-49页
  5 双自杀基因系统治疗肿瘤的旁观者效应与缝隙连接关系的研究第49-51页
  6 统计学处理第51页
   ·实验结果第51-80页
  1 转基因细胞的形态学及生长特性观察第51-58页
  2 转染重组腺病毒细胞融合基因表达的鉴定第58-60页
  3 体外杀伤作用观察第60-65页
  4 双自杀基因诱导肿瘤细胞凋亡的观察第65-72页
  5 双自杀基因系统治疗肿瘤的旁观者效应与缝隙连接关系的研究第72-80页
   ·讨论第80-86页
   ·小结第86-87页
第三章 AdKDR-CDglyTK双自杀基因系统的体内抑制实验第87-105页
   ·实验材料第87-88页
   ·实验方法第88-95页
  1 重组腺病毒的扩增及SCG7901细胞的培养第88页
  2 裸鼠胃癌动物模型的建立第88页
  3 裸鼠移植瘤治疗实验第88-89页
  4 肿瘤细胞形态学观察第89页
  5 双自杀基因CD/TK表达的RT-PCR检测第89-91页
  6 原位杂交第91-92页
  7 微血管密度的免疫组化检测第92-93页
  8 原位缺口末端标记法TUNEL第93-94页
  9 统计学处理第94-95页
   ·实验结果第95-101页
  1 荷瘤鼠肿瘤生长情况第95页
  2 肿瘤细胞以及重要脏器的病理学检查第95-98页
  3 肿瘤组织目的基因表达的RT-PCR检测第98-99页
  4 透射电镜结果第99页
  5 原位杂交的结果第99页
  6 CD34免疫组化结果第99-101页
  7 TUNEL法检测移植瘤细胞凋亡率第101页
   ·讨论第101-104页
   ·小结第104-105页
参考文献第105-112页
综述第112-122页
中英文对照缩略词第122-123页
攻读学位期间成果第123-124页
致谢第124-125页

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