摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-21页 |
前言 | 第21-26页 |
第一章 KDR启动子驱动双自杀基因的重组腺病毒的扩增和鉴定 | 第26-39页 |
·实验材料 | 第26-28页 |
·实验方法 | 第28-33页 |
1 293细胞的复苏和培养 | 第28-29页 |
2 从重组腺病毒质粒产生基因组结构均一的重组腺病毒 | 第29-31页 |
3 重组腺病毒的扩增 | 第31页 |
4 重组腺病毒的纯化 | 第31页 |
5 重组腺病毒滴度的测定 | 第31-32页 |
6 重组腺病毒外源基因的鉴定 | 第32-33页 |
·实验结果 | 第33-35页 |
1 荧光显微镜检测重组腺病毒的转染包装过程 | 第33-34页 |
2 细胞病变 | 第34页 |
3 快速CPE法测定病毒滴度 | 第34-35页 |
4 重组腺病毒外源基因的鉴定 | 第35页 |
·讨论 | 第35-38页 |
·小结 | 第38-39页 |
第二章 AdKDR-CDglyTK双自杀基因系统的体外实验 | 第39-87页 |
·实验材料 | 第39-42页 |
·实验方法 | 第42-51页 |
1 转基因细胞的形态学及生长特性观察 | 第42-43页 |
2 转染重组腺病毒细胞融合基因表达的鉴定 | 第43-46页 |
3 体外杀伤作用观察 | 第46-48页 |
4 双自杀基因诱导肿瘤细胞凋亡的观察 | 第48-49页 |
5 双自杀基因系统治疗肿瘤的旁观者效应与缝隙连接关系的研究 | 第49-51页 |
6 统计学处理 | 第51页 |
·实验结果 | 第51-80页 |
1 转基因细胞的形态学及生长特性观察 | 第51-58页 |
2 转染重组腺病毒细胞融合基因表达的鉴定 | 第58-60页 |
3 体外杀伤作用观察 | 第60-65页 |
4 双自杀基因诱导肿瘤细胞凋亡的观察 | 第65-72页 |
5 双自杀基因系统治疗肿瘤的旁观者效应与缝隙连接关系的研究 | 第72-80页 |
·讨论 | 第80-86页 |
·小结 | 第86-87页 |
第三章 AdKDR-CDglyTK双自杀基因系统的体内抑制实验 | 第87-105页 |
·实验材料 | 第87-88页 |
·实验方法 | 第88-95页 |
1 重组腺病毒的扩增及SCG7901细胞的培养 | 第88页 |
2 裸鼠胃癌动物模型的建立 | 第88页 |
3 裸鼠移植瘤治疗实验 | 第88-89页 |
4 肿瘤细胞形态学观察 | 第89页 |
5 双自杀基因CD/TK表达的RT-PCR检测 | 第89-91页 |
6 原位杂交 | 第91-92页 |
7 微血管密度的免疫组化检测 | 第92-93页 |
8 原位缺口末端标记法TUNEL | 第93-94页 |
9 统计学处理 | 第94-95页 |
·实验结果 | 第95-101页 |
1 荷瘤鼠肿瘤生长情况 | 第95页 |
2 肿瘤细胞以及重要脏器的病理学检查 | 第95-98页 |
3 肿瘤组织目的基因表达的RT-PCR检测 | 第98-99页 |
4 透射电镜结果 | 第99页 |
5 原位杂交的结果 | 第99页 |
6 CD34免疫组化结果 | 第99-101页 |
7 TUNEL法检测移植瘤细胞凋亡率 | 第101页 |
·讨论 | 第101-104页 |
·小结 | 第104-105页 |
参考文献 | 第105-112页 |
综述 | 第112-122页 |
中英文对照缩略词 | 第122-123页 |
攻读学位期间成果 | 第123-124页 |
致谢 | 第124-125页 |