| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 引言 | 第9-18页 |
| ·立题背景及意义 | 第9页 |
| ·阪崎肠杆菌简介 | 第9-10页 |
| ·阪崎肠杆菌生物学性状 | 第9-10页 |
| ·阪崎肠杆菌耐热性、毒力和传播途径 | 第10页 |
| ·阪崎肠杆菌检测研究现状 | 第10-13页 |
| ·阪崎肠杆菌传统检测方法 | 第10-11页 |
| ·阪崎肠杆菌分子检测方法 | 第11-13页 |
| ·荧光定量PCR技术及应用 | 第13-15页 |
| ·荧光定量PCR技术 | 第13-14页 |
| ·荧光定量PCR技术的应用 | 第14-15页 |
| ·内标 | 第15-17页 |
| ·内标的作用 | 第15页 |
| ·内标的类型 | 第15-16页 |
| ·内标的构建 | 第16页 |
| ·内标的保存 | 第16-17页 |
| ·研究内容 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-30页 |
| ·实验材料 | 第18-20页 |
| ·菌株 | 第18页 |
| ·质粒 | 第18-19页 |
| ·培养基 | 第19页 |
| ·仪器设备 | 第19页 |
| ·生化试剂与样品 | 第19-20页 |
| ·实验方法 | 第20-30页 |
| ·阪崎肠杆菌培养 | 第20页 |
| ·阪崎肠杆菌基因组DNA制备 | 第20-21页 |
| ·阪崎肠杆菌149bp基因片段的PCR扩增 | 第21-22页 |
| ·PCR产物胶回收纯化 | 第22页 |
| ·目的重组质粒的构建 | 第22-24页 |
| ·内标重组质粒的构建 | 第24-26页 |
| ·荧光定量PCR检测阪崎肠杆菌方法的建立 | 第26-28页 |
| ·婴儿配方奶粉中阪崎肠杆菌基因组DNA提取方法比较 | 第28-29页 |
| ·荧光定量PCR方法灵敏度确定 | 第29页 |
| ·人工污染样品,确定检测限 | 第29页 |
| ·实际样品检测 | 第29-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-50页 |
| ·阪崎肠杆菌149基因片段的PCR扩增 | 第30页 |
| ·目的重组质粒的鉴定 | 第30-32页 |
| ·目的重组质粒电泳 | 第30-31页 |
| ·目的重组质粒PCR产物鉴定 | 第31页 |
| ·目的重组质粒测序鉴定 | 第31-32页 |
| ·内标重组质粒构建 | 第32-35页 |
| ·内标序列构成 | 第32-33页 |
| ·内标重组质粒构建 | 第33页 |
| ·内标重组质粒DNA电泳 | 第33-34页 |
| ·内标重组质粒鉴定 | 第34-35页 |
| ·荧光定量PCR方法的建立 | 第35-50页 |
| ·用阴性反应检测荧光定量PCR反应试剂 | 第35-36页 |
| ·条件的优化 | 第36-40页 |
| ·引物、探针特异性 | 第40-42页 |
| ·标准曲线的建立 | 第42-43页 |
| ·婴儿配方奶粉中阪崎肠杆菌DNA提取方法比较 | 第43-45页 |
| ·荧光定量PCR方法灵敏度确定 | 第45-47页 |
| ·人工污染样品,确定检测限 | 第47-49页 |
| ·实际检测结果 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-54页 |
| ·阪崎肠杆菌检测 | 第50-51页 |
| ·靶基因的选择和检测方法 | 第50页 |
| ·内标的应用 | 第50-51页 |
| ·荧光定量PCR技术 | 第51-54页 |
| ·定量原理 | 第51-52页 |
| ·荧光定量PCR使用的酶 | 第52页 |
| ·双温循环 | 第52页 |
| ·荧光定量PCR污染的防控 | 第52-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 硕士期间发表学术论文 | 第61-62页 |
| 作者简介 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |