伪狂犬病病毒gE基因在大肠杆菌中的表达
| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第10-22页 |
| ·伪狂犬病病毒研究进展 | 第10-15页 |
| ·病原学 | 第10-11页 |
| ·病毒囊膜与糖蛋白 | 第11-14页 |
| ·病毒感染和复制 | 第14-15页 |
| ·潜伏性 | 第15页 |
| ·伪狂犬病病毒的诊断学研究进展 | 第15-22页 |
| ·病毒分离(Ⅵ) | 第15-16页 |
| ·动物接种试验 | 第16页 |
| ·电镜技术 | 第16页 |
| ·血清学检测方法 | 第16-19页 |
| ·分子生物学检测技术 | 第19-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-36页 |
| ·材料 | 第22-25页 |
| ·菌种和载体 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22-23页 |
| ·主要溶液配方 | 第23-25页 |
| ·方法 | 第25-36页 |
| ·引物的设计与合成 | 第25-26页 |
| ·PRV Min-A株DNA的提取 | 第26页 |
| ·PCR扩增 | 第26-27页 |
| ·PCR扩增产物的凝胶电泳 | 第27页 |
| ·PCR扩增产物的回收 | 第27-28页 |
| ·目的片段与载体的连接 | 第28页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第28-29页 |
| ·连接产物的转化 | 第29页 |
| ·碱裂解法小量提取质粒 | 第29页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第29-31页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第31-33页 |
| ·重组质粒的诱导表达 | 第33页 |
| ·最佳诱导条件的确定 | 第33-34页 |
| ·表达产物的检测 | 第34-36页 |
| 3 结果 | 第36-41页 |
| ·PCR扩增结果 | 第36-37页 |
| ·重组质粒PET-gE的鉴定结果 | 第37-38页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第37页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定 | 第37-38页 |
| ·重组质粒的序列测定 | 第38页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE电泳检测 | 第38-40页 |
| ·不同IPTG浓度的诱导表达 | 第38-39页 |
| ·不同时间的诱导表达 | 第39-40页 |
| ·Western-blot分析 | 第40-41页 |
| 4 讨论 | 第41-43页 |
| ·本研究的必要性 | 第41页 |
| ·实验中遇到的困难与问题 | 第41-42页 |
| ·gE-ELISA的优点 | 第42页 |
| ·伪狂犬病的根除 | 第42-43页 |
| 5 结论 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-49页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第49页 |