摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
1. 文献综述 | 第10-23页 |
·油菜杂种优势利用 | 第10-13页 |
·油菜杂种优势利用的特点 | 第10页 |
·油菜细胞核不育在杂种优势中的利用 | 第10-13页 |
·细胞核雄性不育机理的研究 | 第13-15页 |
·芸薹属分子标记发展策略 | 第15-18页 |
·分子标记的种类 | 第15-16页 |
·基于限制性酶切的分子标记 | 第15页 |
·基于PCR技术的分子标记 | 第15页 |
·基于限制性酶切和PCR技术相结合的分子标记 | 第15-16页 |
·基于单核苷酸多态性的分子标记 | 第16页 |
·分子标记遗传连锁图谱构建 | 第16-17页 |
·同源序列法 | 第17页 |
·PCR Walking技术的应用 | 第17-18页 |
·拟南芥与芸薹属的比较基因组研究 | 第18-20页 |
·拟南芥基因组与白菜基因组(AA)的比较 | 第18-19页 |
·拟南芥基因组与甘蓝基因组(CC)的比较 | 第19页 |
·拟南芥基因组与甘蓝型油菜基因组(AACC)的比较 | 第19-20页 |
·甘蓝型油菜重要基因定位与图位克隆 | 第20-21页 |
·本研究的目的意义 | 第21-23页 |
2. 材料与方法 | 第23-31页 |
·实验材料 | 第23页 |
·DNA提取 | 第23-24页 |
·AFLP分析 | 第24-26页 |
·样品集团的构建 | 第24页 |
·总DNA的酶切与连接 | 第24页 |
·预扩增 | 第24-25页 |
·选择性扩增 | 第25页 |
·差异片段的电泳检测 | 第25-26页 |
·PAGE胶制备 | 第25-26页 |
·电泳分离 | 第26页 |
·染色与显影 | 第26页 |
·SCAR标记的转化 | 第26-28页 |
·差异片段回收及再扩增、再回收 | 第26-27页 |
·连接反应 | 第27页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第27页 |
·重组子筛选、鉴定、测序 | 第27-28页 |
·SCAR引物设计及扩增 | 第28页 |
·小群体分析 | 第28页 |
·分子标记的大群体检验 | 第28页 |
·标记差异序列的BLAST分析 | 第28-30页 |
·两侧最近标记侧翼序列的分离 | 第28-29页 |
·基因组DNA的酶切、连接 | 第29页 |
·步行引物的设计 | 第29页 |
·PCR扩增 | 第29页 |
·扩增片段的回收、克隆、测序 | 第29页 |
·BLAST分析 | 第29-30页 |
·新标记的开发 | 第30页 |
·同源序列的筛选 | 第30页 |
·特异引物的设计 | 第30页 |
·PCR扩增和交换单株检测 | 第30页 |
·新序列的获得及侧翼序列的分离 | 第30-31页 |
·扩增产物的回收、克隆、测序 | 第30页 |
·步行引物的设计及侧翼序列的分离 | 第30-31页 |
3. 结果与分析 | 第31-45页 |
·SCAR标记的转化 | 第31-33页 |
·差异片段的回收、克隆与测序 | 第31页 |
·SCAR引物的设计及检测 | 第31-33页 |
·大群体分析 | 第33-37页 |
·第一次验证 | 第33-35页 |
·第二次验证 | 第35-37页 |
·BLAST分析 | 第37-40页 |
·标记侧翼序列的分离 | 第37-39页 |
·BLAST分析 | 第39-40页 |
·新标记的获得 | 第40-42页 |
·同源序列的获得及其特异引物的设计 | 第40页 |
·SCAR标记的获得 | 第40-41页 |
·交换单株检测 | 第41页 |
·目的基因的精细定位 | 第41-42页 |
·目的基因两侧(区域)新序列的获得 | 第42-45页 |
·扩增片段的回收、克隆与测序 | 第42-43页 |
·PCR步行引物设计及扩增 | 第43-44页 |
·侧翼序列分析 | 第44-45页 |
4. 讨论 | 第45-49页 |
·本研究结果与前人研究结果比较 | 第45页 |
·本研究中不同定位群体的比较 | 第45-46页 |
·甘蓝型油菜隐性核不育恢复基因定位 | 第46-49页 |
·其他分子标记技术的应用 | 第46-47页 |
·分子标记遗传连锁图谱的应用 | 第47页 |
·大片段基因组文库的应用 | 第47-49页 |
参考文献 | 第49-55页 |
附录 | 第55-64页 |
致谢 | 第64页 |