人乳头瘤病毒16亚型L1基因在毕赤酵母GS115中的优化表达
| 内容提要 | 第1-8页 |
| 第一章 前言 | 第8-20页 |
| ·HPV 研究背景 | 第8-18页 |
| ·HPV 的分子生物学 | 第8-11页 |
| ·HPV 的流行病学 | 第11-12页 |
| ·HPV 疫苗的研究现状 | 第12-17页 |
| ·表达载体的选择 | 第17-18页 |
| ·本论文设计思路 | 第18-20页 |
| ·实验目的 | 第18-19页 |
| ·设计思路 | 第19-20页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第20-40页 |
| ·材料、仪器和试剂 | 第20-24页 |
| ·材料 | 第20-21页 |
| ·主要仪器 | 第21-22页 |
| ·常用试剂配制 | 第22-24页 |
| ·实验方法 | 第24-40页 |
| ·HPV16L1 基因的优化设计与合成 | 第24-29页 |
| ·将HPV16L1 基因构建至表达载体 | 第29-33页 |
| ·毕赤酵母重组子的制备与筛选 | 第33-38页 |
| ·酵母重组子的5L 发酵罐表达 | 第38-39页 |
| ·蛋白的纯化与鉴定 | 第39-40页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第40-57页 |
| ·HPV16L1 基因的设计合成 | 第40-42页 |
| ·合成L1 基因第一段 | 第40页 |
| ·合成L1 基因第二段 | 第40-41页 |
| ·合成L1 基因第三段 | 第41页 |
| ·三段连接得到完整的HPV16L1 基因 | 第41-42页 |
| ·HPV16L1 基因构建至表达载体 | 第42-46页 |
| ·L1 基因连T-easy 载体 | 第42-45页 |
| ·L1 连pPICZαB 真核表达载体 | 第45-46页 |
| ·酵母重组子的获得与筛选 | 第46-49页 |
| ·转化子的获得 | 第46页 |
| ·PCR 筛选酵母重组子 | 第46-47页 |
| ·摇瓶筛选酵母重组子 | 第47-49页 |
| ·摇瓶发酵优化HPV16L1 基因表达条件 | 第49-53页 |
| ·优化基础盐培养基 | 第50页 |
| ·添加维生素 | 第50-52页 |
| ·添加蛋白胨 | 第52-53页 |
| ·重组子发酵罐表达 | 第53-54页 |
| ·VLP 蛋白纯化及电镜观察 | 第54-57页 |
| ·VLP 蛋白纯化 | 第54-56页 |
| ·VLP 电镜结果 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 摘要 | 第61-65页 |
| Abstract | 第65-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 导师简介 | 第70-72页 |
| 作者简介 | 第72页 |
