| 摘要 | 第1-19页 |
| ABSTRACT | 第19-21页 |
| 第一章 文献综述 Literature review | 第21-43页 |
| 第一节 小麦遗传转化研究进展 Advances in wheat genetic transformation | 第21-31页 |
| 一、遗传转化的受体 Explants for genetic transformation | 第21页 |
| 二、遗传转化的方法 Methods of genetic transformation | 第21-25页 |
| (一) 基因枪法 Microparticle bombardment | 第21-22页 |
| (二) 农杆菌介导法 Agrobacterium-mediated transformation | 第22-23页 |
| (三) 花粉管通道法 Pollen-tube pathway transformation | 第23-24页 |
| (四) 以原生质体为受体的遗传转化 Transformation of wheat protoplasts | 第24-25页 |
| (五) 其它转化方法 Other approaches | 第25页 |
| 三、遗传转化载体的组成 Components of transformation vectors | 第25-27页 |
| (一) 报告基因 Reporter markers | 第25-26页 |
| (二) 标记基因 Selectable markers | 第26页 |
| (三) 启动子 Promoter | 第26-27页 |
| 四、遗传转化在小麦遗传改良中的应用 The application of transformation in genetic improvement | 第27-29页 |
| (一) 提高小麦品质 Grain quality | 第27页 |
| (二) 提高小麦抗病虫性 Resistance to biotic stress | 第27-28页 |
| (三) 提高小麦抗逆性 Resistance to abiotic stress | 第28-29页 |
| (四) 雄性不育 Nuclear male sterility | 第29页 |
| (五) 抗除草剂 Resistance to herbicide | 第29页 |
| 五、利用遗传转化创造变异或诱发突变 Create gene mutation | 第29-31页 |
| (一) 插入突变 T-DNA insertion | 第29-30页 |
| (二) RNA干扰 RNA interference | 第30-31页 |
| 六、转基因小麦的基因沉默现象 Transgenic silencing in wheat | 第31页 |
| 第二节 小麦组织培养研究进展 Advances in wheat tissue culture studies | 第31-43页 |
| 一、小麦幼胚组织培养 Immature embryo tissue culture | 第31-37页 |
| (一) 外植体的选择 Selection of explants | 第32-33页 |
| 1、基因型 Genotypes | 第32页 |
| 2、幼胚胚龄 Age of immature embryos | 第32页 |
| 3、幼胚形成阶段的外界环境 Growth environment of immature embryos | 第32-33页 |
| (二)、培养基的调节 Optimization of media | 第33-37页 |
| 1、 基本培养基 Basic media | 第33-35页 |
| 2、 碳源 Carbohydrate sources | 第35页 |
| 3、 胶凝物 Gelling agents | 第35-36页 |
| 4、 激素 Hormones | 第36-37页 |
| 二、小麦成熟胚组织培养 Mature embryo tissue culture | 第37-38页 |
| 三、禾谷类作物组织培养相关性状的QTL定位 QTL mapping associated with tissue culture in Triticeae | 第38-43页 |
| (一) 小麦 Wheat | 第38-39页 |
| (二) 大麦 Barley | 第39-40页 |
| (三) 水稻 Rice | 第40-42页 |
| (四) 小麦、大麦和水稻QTL定位结果的比较 Comparison of tissue culture QTLs in wheat, barely and rice | 第42-43页 |
| 第二章 小麦成熟胚组培性状的分子遗传分析 Molecular genetic analysis of the tissue culture response of wheat mature embryos | 第43-57页 |
| 摘要 Abstract | 第43-44页 |
| 引言 Introduction | 第44-45页 |
| 材料与方法 Materials and methods | 第45-47页 |
| 一、植物材料 Plant materials | 第45页 |
| 二、方法 Methods | 第45-47页 |
| (一) 种子消毒和预处理 Seeds sterilization and pre-tratment | 第45页 |
| (二) 培养基 Media | 第45页 |
| (三) 愈伤组织的诱导 Calli induction | 第45页 |
| (四) 愈伤组织的继代和分化 Calli subculture and regeneration | 第45-46页 |
| (五) 数据分析及QT定位 Data analysis and QTL mapping | 第46-47页 |
| 结果与分析 Results and analysis | 第47-52页 |
| 一、愈伤组织的诱导与再生 Calli induction and regeneration | 第47-50页 |
| (一) 愈伤组织的诱导 Calli induction | 第47页 |
| (二) 愈伤组织的再生 Calli regeneration | 第47-50页 |
| 二、QTL分析 QTL analysis | 第50-52页 |
| (一) 愈伤组织诱导率 Percent calli induction | 第50-52页 |
| (二) 植株再生潜力 Capicity of plant regeneration | 第52页 |
| (三) 植株再生效率 Efficiency of plant regeneration | 第52页 |
| 讨论 Discussion | 第52-57页 |
| 第三章 小麦幼胚组培性状的分子遗传分析 Molecular genetic analysis of the tissue culture response of wheat immature embryos | 第57-69页 |
| 摘要 Abstract | 第57-58页 |
| 引言 Introduction | 第58-59页 |
| 材料与方法 Materials and methods | 第59-60页 |
| 一、植物材料 Plant materials | 第59页 |
| 二、方法 Methods | 第59-60页 |
| (一) 取材 Sampling | 第59页 |
| (二) 籽粒消毒和预处理 Seeds sterilization and pre-treatment | 第59页 |
| (三) 培养基 Media | 第59页 |
| (四) 愈伤组织的诱导 Calli induction | 第59-60页 |
| (五) 愈伤组织的分化 Calli regeneration | 第60页 |
| (六) 数据分析及QTL定位 Data analysis and QTL mapping | 第60页 |
| 结果与分析 Results and analysis | 第60-66页 |
| 一、愈伤组织的诱导 Calli induction | 第60页 |
| 二、非胚性愈伤组织的分化 Non-embryogenetic calli regeneration | 第60-62页 |
| 三、胚性愈伤组织诱导率的QTL分析 QTL analysis of percent embryogenetic calli induction | 第62-66页 |
| 四、胚性愈伤组织的分化及再生效率的QTL分析 Embryogenetic calli regeneration and QTL analysis of regeneration capacity | 第66页 |
| 讨论 Discussion | 第66-69页 |
| 第四章 农杆菌介导的小麦遗传转化研究 Studies on Agrobacterium-mediated genetic transformation of wheat | 第69-82页 |
| 摘要 Abstract | 第69-70页 |
| 引言 Introduction | 第70-71页 |
| 材料与方法 Materials and methods | 第71-73页 |
| 一、实验材料 Materials | 第71页 |
| 二、方法 Methods | 第71-73页 |
| (一) 取材 Sampling | 第71页 |
| (二) 材料消毒及愈伤组织诱导 Sterilization and calli induction | 第71页 |
| (三) 愈伤组织的继代及预分化 Calli subculture and pre-regeneration | 第71页 |
| (四) 农杆菌的制备 Preparation of Agrobacterium stains | 第71-72页 |
| (五) 遗传转化 Genetic transformation | 第72页 |
| (六) 转化株系的筛选和移栽 Transgenic screening and transplanting | 第72页 |
| (七) 转基因植株的PCR检测 PCR detection of transgenic plants | 第72-73页 |
| 结果与分析 Results and analysis | 第73-80页 |
| 一、影响农杆菌遗传转化效率的因素 Factors effecting Agrobacterium-mediated genetic transformation | 第73-76页 |
| (一) 愈伤组织预培养时间 Pre-culture time | 第73-74页 |
| (二) 农杆菌菌液浓度 Cell density of Agrobacterium | 第74-75页 |
| (三) 农杆菌菌株 Agrobacteria strains | 第75页 |
| (四) G418的筛选效应 G418 screening | 第75-76页 |
| 二、基因型的筛选 Selection of genotypes | 第76页 |
| 三、转基因苗的鉴定 Evaluation of transgenic plants | 第76-78页 |
| 四、外源基因在转基因后代中的传递 Transmission of transgenic genes | 第78-80页 |
| 讨论 Discussion | 第80-82页 |
| 第五章 遗传转化载体的构建 Construction of vectors for genetic transformation | 第82-100页 |
| 摘要 Abstract | 第82-83页 |
| 引言 Introduction | 第83-84页 |
| 材料与方法 Materials and methods | 第84-85页 |
| 一、实验材料 Materials | 第84页 |
| 二、方法 Methods | 第84-85页 |
| (一) 目的片段的PCR扩增 PCR amplification | 第84页 |
| (二) 质粒DNA的提取 Plasmid DNA extraction | 第84页 |
| (三) 酶切 Digestion | 第84页 |
| (四) 目的片段的回收、连接和转化 Extraction,ligation and transformation | 第84-85页 |
| 结果与讨论 Results and discussion | 第85-100页 |
| 一、RNA干扰载体的构建 Construction of RNAi vecors | 第85-95页 |
| (一) 中间载体的构建 Construction of intermediate vectors | 第85-89页 |
| (二) UFD-RNAi表达载体的构建 Construction of the UFD-RNAi expression vector | 第89-95页 |
| 二、LEA基因过量表达载体的构建 Construction of the LEA expression vector | 第95-100页 |
| (一) 35S启动子载体p35S 35S promoter Vector p35S | 第95页 |
| (二) pSNN和pSGN载体 Vector pSNN and pSGN | 第95-96页 |
| (三) LEA基因表达盒载体 LEA expression cassette | 第96-97页 |
| (四) LEA基因表达盒与左右边界序列的连接 LEA expression cassette linked to the left and right borders | 第97页 |
| (五) LEA基因过量表达载体 LEA over-expression vector | 第97-100页 |
| 参考文献 References | 第100-121页 |
| 致谢 Thanks | 第121-122页 |
| 发表文章情况 | 第122页 |
