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鸡胚原始生殖细胞体外诱导分化及其嵌合体的制备

中文摘要第1-5页
英文摘要第5-11页
文献综述第11-26页
 1 鸡胚原始生殖细胞(PGCs)的研究进展第11-16页
   ·PGCs 的起源与迁移第11-12页
   ·PGCs 的分离提纯第12页
   ·PGCs 的体外培养、建系第12-13页
   ·PGCs 的生物学特性检测第13-16页
 2 胚胎干细胞(ES)体外诱导分化的研究进展第16-23页
   ·诱导胚胎源性干细胞分化的分子调控第16-17页
   ·体外诱导分化的方法第17-19页
   ·体外定向诱导分化的细胞类型第19-23页
 3 PGCs 与嵌合体第23-25页
 4 本实验研究的目的和意义第25-26页
实验一鸡胚原始生殖细胞的体外诱导分化第26-53页
 材料与方法第26-36页
  1 实验材料第26-27页
   ·鸡胚的来源与孵化第26页
   ·主要试剂第26-27页
   ·主要仪器第27页
  2 实验方法第27-36页
   ·鸡胚胎成纤维细胞的制备第27-28页
   ·鸡胚胎成纤维细胞的传代第28页
   ·饲养层细胞的制备第28-29页
   ·PGCs 的分离与提纯第29页
   ·PGCs 的培养体系第29页
   ·PGCs 传代第29-30页
   ·PGCs 的鉴定第30-32页
   ·PGCs 体外诱导分化为成骨细胞第32-33页
   ·PGCs 体外诱导分化为脂肪细胞第33-35页
   ·PGCs 体外诱导分化为神经元样细胞第35-36页
  3 数据处理第36页
 实验结果第36-48页
  1 PGCs 的培养结果第36-39页
   ·鸡PGCs 的一般形态特征第36-37页
   ·过碘酸雪夫特异性染色(periodic acid-schiff, PAS)鉴定第37页
   ·碱性磷酸酶(AKP)染色第37页
   ·免疫荧光染色第37-39页
  2 PGCs 体外诱导分化为成骨细胞第39-43页
   ·成骨细胞特异性化学染色鉴定第40页
   ·成骨细胞免疫组化鉴定第40-43页
  3 PGCs 体外诱导分化为脂肪细胞第43-45页
   ·油红O 染色鉴定第44-45页
   ·RT-PCR 检测脂肪细胞中PPAR-γ的表达第45页
  4 PGCs 分化为神经元样细胞第45-48页
   ·甲苯胺蓝染色鉴定第46-47页
   ·神经元样细胞免疫组化鉴定第47-48页
 讨论第48-53页
  1 PGCs 体外诱导分化为成骨细胞第48-49页
  2 PGCs 体外诱导分化为脂肪细胞第49-51页
  3 PGCs 体外诱导分化为神经元样细胞第51-53页
实验二利用鸡胚原始生殖细胞制备嵌合体的初探第53-59页
 材料与方法第53-55页
  1 实验材料第53-54页
   ·鸡胚的来源与孵化第53页
   ·主要试剂第53页
   ·主要仪器第53-54页
  2 实验方法第54-55页
   ·PGCs 的分离与培养第54页
   ·PGCs 嵌合体的制备第54-55页
 实验结果第55-57页
  1. 显微注射第55-56页
  2. 嵌合体鸡第56-57页
 讨论第57-59页
结论第59-60页
参考文献第60-67页
附录第67-68页
致谢第68-69页
攻读硕士学位期间发表的论文第69页

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