中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-11页 |
文献综述 | 第11-26页 |
1 鸡胚原始生殖细胞(PGCs)的研究进展 | 第11-16页 |
·PGCs 的起源与迁移 | 第11-12页 |
·PGCs 的分离提纯 | 第12页 |
·PGCs 的体外培养、建系 | 第12-13页 |
·PGCs 的生物学特性检测 | 第13-16页 |
2 胚胎干细胞(ES)体外诱导分化的研究进展 | 第16-23页 |
·诱导胚胎源性干细胞分化的分子调控 | 第16-17页 |
·体外诱导分化的方法 | 第17-19页 |
·体外定向诱导分化的细胞类型 | 第19-23页 |
3 PGCs 与嵌合体 | 第23-25页 |
4 本实验研究的目的和意义 | 第25-26页 |
实验一鸡胚原始生殖细胞的体外诱导分化 | 第26-53页 |
材料与方法 | 第26-36页 |
1 实验材料 | 第26-27页 |
·鸡胚的来源与孵化 | 第26页 |
·主要试剂 | 第26-27页 |
·主要仪器 | 第27页 |
2 实验方法 | 第27-36页 |
·鸡胚胎成纤维细胞的制备 | 第27-28页 |
·鸡胚胎成纤维细胞的传代 | 第28页 |
·饲养层细胞的制备 | 第28-29页 |
·PGCs 的分离与提纯 | 第29页 |
·PGCs 的培养体系 | 第29页 |
·PGCs 传代 | 第29-30页 |
·PGCs 的鉴定 | 第30-32页 |
·PGCs 体外诱导分化为成骨细胞 | 第32-33页 |
·PGCs 体外诱导分化为脂肪细胞 | 第33-35页 |
·PGCs 体外诱导分化为神经元样细胞 | 第35-36页 |
3 数据处理 | 第36页 |
实验结果 | 第36-48页 |
1 PGCs 的培养结果 | 第36-39页 |
·鸡PGCs 的一般形态特征 | 第36-37页 |
·过碘酸雪夫特异性染色(periodic acid-schiff, PAS)鉴定 | 第37页 |
·碱性磷酸酶(AKP)染色 | 第37页 |
·免疫荧光染色 | 第37-39页 |
2 PGCs 体外诱导分化为成骨细胞 | 第39-43页 |
·成骨细胞特异性化学染色鉴定 | 第40页 |
·成骨细胞免疫组化鉴定 | 第40-43页 |
3 PGCs 体外诱导分化为脂肪细胞 | 第43-45页 |
·油红O 染色鉴定 | 第44-45页 |
·RT-PCR 检测脂肪细胞中PPAR-γ的表达 | 第45页 |
4 PGCs 分化为神经元样细胞 | 第45-48页 |
·甲苯胺蓝染色鉴定 | 第46-47页 |
·神经元样细胞免疫组化鉴定 | 第47-48页 |
讨论 | 第48-53页 |
1 PGCs 体外诱导分化为成骨细胞 | 第48-49页 |
2 PGCs 体外诱导分化为脂肪细胞 | 第49-51页 |
3 PGCs 体外诱导分化为神经元样细胞 | 第51-53页 |
实验二利用鸡胚原始生殖细胞制备嵌合体的初探 | 第53-59页 |
材料与方法 | 第53-55页 |
1 实验材料 | 第53-54页 |
·鸡胚的来源与孵化 | 第53页 |
·主要试剂 | 第53页 |
·主要仪器 | 第53-54页 |
2 实验方法 | 第54-55页 |
·PGCs 的分离与培养 | 第54页 |
·PGCs 嵌合体的制备 | 第54-55页 |
实验结果 | 第55-57页 |
1. 显微注射 | 第55-56页 |
2. 嵌合体鸡 | 第56-57页 |
讨论 | 第57-59页 |
结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-67页 |
附录 | 第67-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第69页 |