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5-酮基阿维菌素基因工程菌的研究

中文摘要第1-11页
英文摘要第11-13页
第一章 前言第13-24页
   ·阿维菌素概述第13-15页
   ·阿维菌素的安全性第15页
   ·阿维菌素的生物合成第15-20页
     ·阿维菌素的合成途径第15-17页
     ·阿维菌素生物合成的基因簇及有关酶第17-20页
   ·阿维菌素生产菌的遗传改良第20-22页
     ·选择性生产阿维菌素B_(1a),B_(2a)第20页
     ·选择性产生5-酮阿维菌素B_(1a),B_(2a)第20-21页
     ·阿维菌素B_(2a)的选择性产出第21页
     ·选择性产生6,8a-开环-6,8a-脱氧阿维菌素第21页
     ·选择性产生C25不同的新型阿维菌素第21-22页
     ·有毒化合物Oligomycin的去除第22页
   ·阿维菌素的结构改造第22-23页
   ·本研究的立题依据、目的与意义第23-24页
     ·研究背景第23页
     ·目的与意义第23-24页
第二章 实验材料与方法第24-33页
 实验材料第24-28页
     ·菌种与质粒第24页
     ·培养基第24-25页
     ·试剂第25-26页
     ·溶液第26-27页
     ·主要仪器第27-28页
 实验方法第28-33页
     ·大肠杆菌质粒DNA小量提取第28页
     ·链霉菌总DNA的提取第28-29页
     ·大肠杆菌DH-5α感受态细胞的制备和DNA转化第29页
     ·DNA酶切和连接第29-30页
     ·DNA电泳和凝胶片段回收第30页
     ·PCR反应第30-31页
     ·接合转移及双交换菌株的筛选第31-32页
     ·发酵产物的提取及检测第32-33页
第三章 实验结果与讨论第33-51页
 第一部分 5-酮阿维菌素基因工程菌的构建第33-44页
     ·构建5-酮阿维菌素基因工程菌的理论依据第33-35页
     ·插入失活质粒pPC5的构建第35-39页
     ·接合转移第39页
     ·双交换菌株的筛选第39页
     ·重组菌株发酵产物的HPLC分析第39-41页
     ·对重组菌株的验证第41-42页
     ·小结第42-44页
 第二部分 只产阿维菌素"2"组分的基因工程菌株的构建第44-51页
     ·插入失活质粒pMYS5的构建第44-48页
     ·接合转移第48页
     ·双交换菌株的筛选第48页
     ·重组菌株发酵产物的HPLC分析第48-49页
     ·对重组菌株的验证第49-50页
     ·小结第50-51页
第四章 结论第51-52页
参考文献第52-54页
致谢第54-55页
附录第55-58页

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