中文摘要 | 第1-11页 |
英文摘要 | 第11-13页 |
第一章 前言 | 第13-24页 |
·阿维菌素概述 | 第13-15页 |
·阿维菌素的安全性 | 第15页 |
·阿维菌素的生物合成 | 第15-20页 |
·阿维菌素的合成途径 | 第15-17页 |
·阿维菌素生物合成的基因簇及有关酶 | 第17-20页 |
·阿维菌素生产菌的遗传改良 | 第20-22页 |
·选择性生产阿维菌素B_(1a),B_(2a) | 第20页 |
·选择性产生5-酮阿维菌素B_(1a),B_(2a) | 第20-21页 |
·阿维菌素B_(2a)的选择性产出 | 第21页 |
·选择性产生6,8a-开环-6,8a-脱氧阿维菌素 | 第21页 |
·选择性产生C25不同的新型阿维菌素 | 第21-22页 |
·有毒化合物Oligomycin的去除 | 第22页 |
·阿维菌素的结构改造 | 第22-23页 |
·本研究的立题依据、目的与意义 | 第23-24页 |
·研究背景 | 第23页 |
·目的与意义 | 第23-24页 |
第二章 实验材料与方法 | 第24-33页 |
实验材料 | 第24-28页 |
·菌种与质粒 | 第24页 |
·培养基 | 第24-25页 |
·试剂 | 第25-26页 |
·溶液 | 第26-27页 |
·主要仪器 | 第27-28页 |
实验方法 | 第28-33页 |
·大肠杆菌质粒DNA小量提取 | 第28页 |
·链霉菌总DNA的提取 | 第28-29页 |
·大肠杆菌DH-5α感受态细胞的制备和DNA转化 | 第29页 |
·DNA酶切和连接 | 第29-30页 |
·DNA电泳和凝胶片段回收 | 第30页 |
·PCR反应 | 第30-31页 |
·接合转移及双交换菌株的筛选 | 第31-32页 |
·发酵产物的提取及检测 | 第32-33页 |
第三章 实验结果与讨论 | 第33-51页 |
第一部分 5-酮阿维菌素基因工程菌的构建 | 第33-44页 |
·构建5-酮阿维菌素基因工程菌的理论依据 | 第33-35页 |
·插入失活质粒pPC5的构建 | 第35-39页 |
·接合转移 | 第39页 |
·双交换菌株的筛选 | 第39页 |
·重组菌株发酵产物的HPLC分析 | 第39-41页 |
·对重组菌株的验证 | 第41-42页 |
·小结 | 第42-44页 |
第二部分 只产阿维菌素"2"组分的基因工程菌株的构建 | 第44-51页 |
·插入失活质粒pMYS5的构建 | 第44-48页 |
·接合转移 | 第48页 |
·双交换菌株的筛选 | 第48页 |
·重组菌株发酵产物的HPLC分析 | 第48-49页 |
·对重组菌株的验证 | 第49-50页 |
·小结 | 第50-51页 |
第四章 结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
附录 | 第55-58页 |