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黄瓜花叶病毒M株系引致烟草症状恢复的初步研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
第一章 文献综述第12-24页
   ·黄瓜花叶病毒第12-14页
   ·卫星病毒及其对黄瓜花叶病毒致病性的影响第14页
   ·植物病毒dsRNA 检测技术及其应用第14-16页
   ·恢复现象第16页
   ·RNA 沉默及其与恢复现象第16-21页
     ·RNA 沉默的定义及其发现第16-17页
     ·RNA 沉默中的几种重要物质第17-18页
     ·RNA 沉默的理论过程第18-20页
     ·RNA silencing 的作用特点第20页
     ·RNA 沉默与恢复现象第20-21页
   ·黄瓜花叶病毒2a 基因在RNA 沉默中的作用及研究进展第21页
   ·黄瓜花叶病毒2b 基因在 RNA 沉默中的作用及研究进展第21页
   ·DAS-ELISA 定量检测病毒浓度研究进展第21-23页
     ·酶联技术第21-22页
     ·双抗体夹心酶联(DAS-ELISA)原理第22-23页
     ·本实验适合用 DAS-ELISA 定量测定第23页
   ·基因表达及抗体制备技术及研究进展第23页
   ·本论文研究目的及意义第23-24页
第二章 材料与方法第24-39页
   ·试验材料与试剂第24页
   ·烟草症状恢复的初步研究第24-30页
     ·病毒接种及症状观察第24页
     ·病毒提纯第24-25页
     ·提纯病毒的测定第25-27页
     ·DAS-ELISA 方法的建立及病毒定量检测第27-29页
     ·恢复叶中病毒侵染性检测第29页
     ·恢复叶中病毒 PCR 检测第29-30页
   ·黄瓜花叶病毒突变株的筛选及病毒双链鉴定第30-32页
     ·黄瓜花叶病毒 M 株的筛选第30页
     ·黄瓜花叶病毒 M 株病毒双链的提取及鉴定第30-32页
   ·RNA2 部分序列测定、分析及2b 基因的克隆第32-35页
       ·RNA2 部分序列测定及分析第32-33页
       ·2b 基因的克隆第33-34页
     ·P2b-T 的线性化及探针的制备第34-35页
   ·2a 基因的分段克隆、重组表达载体构建及在大肠杆菌中的表达第35-36页
     ·2a 基因分段扩增、克隆第35页
     ·2a 基因重组表达载体的分段够建第35-36页
     ·2a 基因主要抗原区在大肠杆菌中的表达第36页
   ·2a 基因主要抗原区抗血清的制备及特异性测定第36-39页
     ·抗血清的制备第36-37页
     ·ACP-ELISA 测定效价第37页
     ·特异性检测第37-39页
第三章 结果分析第39-47页
   ·发病规律第39页
   ·病毒纯度分析第39-40页
   ·DAS-ELISA 定量检测方法的建立第40页
   ·DAS-ELISA 检测结果第40-41页
   ·生物学检测结果第41页
   ·RT-PCR 检测结果结果第41-42页
   ·黄瓜花叶病毒M 株的双链鉴定结果第42页
   ·黄瓜花叶病毒 M 株突变株筛选结果第42-43页
   ·RNA2 部分序列测定结果及序列大致分析第43页
   ·2b 基因的获得、克隆及探针的制备第43-44页
   ·2a 基因的分段获得、克隆第44页
   ·重组表达载体的够建及鉴定第44-45页
   ·2a 基因主要抗原区在大肠杆菌中的表达第45-46页
   ·抗体效价及特异性检测结果第46-47页
第四章 讨论第47-50页
   ·恢复叶片中存在高效的抗病机制第47页
   ·卫星病毒与症状恢复无关第47页
   ·有必要找到影响症状恢复的关键因子第47-48页
   ·寄主植物在恢复过程中有特殊的影响第48页
   ·2a 基因研究的重要意义第48页
   ·基因分段表达是一种好方法第48页
   ·2b 基因研究的重要意义第48-49页
   ·DAS-ELISA 检测病毒是一种好方法第49页
   ·恢复现象是一个很有前途的研究领域第49-50页
第五章 结论第50-51页
参考文献第51-58页
附录第58-59页
缩略词第59-61页
致谢第61-62页
作者简介第62页

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