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苦马豆素单链抗体基因的初步研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-12页
文献综述第12-42页
 第一章噬菌体抗体库技术研究进展第12-30页
   ·噬菌体表面展示技术的原理第12-14页
     ·丝状噬菌体简介第12-13页
     ·噬菌体表面展示技术的原理第13-14页
   ·噬菌体抗体库技术产生基础第14页
   ·噬菌体抗体库技术的原理第14-15页
   ·抗体库的发展第15-16页
     ·单域抗体库第15页
     ·组合抗体库第15-16页
     ·噬菌体抗体库第16页
   ·噬菌体抗体库的类型第16-18页
     ·天然抗体库第16-17页
     ·免疫抗体库第17页
     ·合成抗体库第17-18页
   ·噬菌体抗体库常用载体第18-19页
   ·噬菌体抗体库的构建与表达第19-21页
     ·构建噬菌体抗体库的细胞来源第19-20页
     ·噬菌体抗体库的构建途径第20-21页
     ·抗体可变区基因的表达第21页
   ·噬菌体抗体库的筛选第21-24页
     ·特异性噬菌体抗体库的筛选和富集第21-22页
     ·噬菌体抗体库筛选方法第22-24页
   ·噬菌体抗体亲和力的成熟第24-25页
   ·噬菌体抗体库技术的优点第25-26页
     ·噬菌体抗体技术已初步具备相当量的库容第25页
     ·噬菌体抗体技术无需免疫动物第25页
     ·适于大规模工业化生产第25页
     ·噬菌体抗体库能够模拟天然抗体库第25-26页
     ·抗体表型和基因型一致第26页
     ·人源性抗体免疫原性低第26页
     ·能够得到机体处于正常状态下不易产生的自身抗体第26页
     ·噬菌体单链抗体不含Fc 段,分子量小,穿透力强第26页
   ·噬菌体抗体库技术存在的问题第26-27页
   ·噬菌体抗体库技术的应用第27-30页
     ·在寄生虫学研究领域第27页
     ·在肿瘤研究领域第27-28页
     ·在自身免疫疾病的研究领域第28页
     ·在输血医学中的应用第28页
     ·医学基础性研究第28页
     ·医学微生物研究领域第28页
     ·在诊断和治疗方面的应用第28-29页
     ·药物靶向治疗方面第29-30页
 第二章 单链抗体的研究及其应用研究进展第30-42页
   ·单链抗体的特点第30-31页
     ·单价单链抗体的特点第30-31页
     ·单链抗体多聚体的特点第31页
     ·双特异性单链抗体的特点第31页
   ·单链抗体的分子结构及其生物学特性第31-32页
   ·单链抗体的基因来源第32页
   ·单链抗体VH与VL的拼接方法第32页
   ·单链抗体基因的连接方式第32-33页
   ·单链抗体基因的构建第33页
   ·单链抗体的表达载体及噬粒载体PCANTAB-5E第33-35页
   ·单链抗体的表达系统第35-37页
     ·原核细胞表达系统第35-36页
     ·真核细胞表达系统第36页
     ·植物表达系统第36页
     ·杆状病毒表达系统第36-37页
     ·哺乳动物表达系统第37页
     ·噬菌体表达系统第37页
   ·单链抗体的应用前景第37-42页
     ·基础理论研究第37-38页
     ·研究寄生虫的抗原表位第38页
     ·研究自身免疫疾病第38页
     ·临床疾病的诊断与治疗第38-41页
     ·细胞内免疫第41页
     ·其它第41-42页
试验研究第42-72页
 第三章 甘肃棘豆草中苦马豆素的提取分离工艺比较研究第42-52页
   ·材料与方法第42-44页
     ·试验材料第42-43页
     ·试验方法第43-44页
   ·结果与分析第44-48页
     ·植物样品中生物碱提取结果第44页
     ·薄层层析(TLC)检查结果第44-47页
     ·甘肃棘豆总生物碱中苦马豆素分离结果第47-48页
     ·单体化合物结构鉴定结果第48页
   ·讨论第48-51页
     ·苦马豆素的提取第48-50页
     ·甘肃棘豆中苦马豆素的提取研究第50页
     ·影响苦马豆素提取率的因素第50-51页
   ·小结第51-52页
 第四章 苦马豆素-HSA 对小鼠的免疫原性研究第52-61页
   ·材料与方法第52-57页
     ·试验材料第52-54页
     ·试验方法第54-57页
   ·结果与分析第57页
     ·IHA 试验结果第57页
     ·间接ELISA 试验结果第57页
   ·讨论第57-60页
     ·人工抗原的免疫原性第57-58页
     ·抗半抗原抗体的检测第58-60页
   ·小结第60-61页
 第五章 苦马豆素单链抗体基因的构建第61-72页
   ·材料与方法第61-67页
     ·试验材料第61-63页
     ·试验方法第63-67页
   ·结果与分析第67-68页
     ·免疫鼠血清效价测定及总RNA 的提取结果第67页
     ·PCR 扩增VH﹑VL基因及定量结果第67页
     ·PCR 加端修饰VL基因结果第67-68页
     ·单链抗体基因(ScFv)的组装结果第68页
   ·讨论第68-70页
     ·RNA 的提取及cDNA 第一条链的合成第68-69页
     ·单连抗体基因的引物设计及PCR 扩增第69-70页
   ·小结第70-72页
结论第72-73页
参考文献第73-82页
致谢第82-83页
作者简介第83页

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