| 第一章 绪言 | 第1-29页 |
| ·衣原体概述 | 第14页 |
| ·衣原体分类 | 第14-15页 |
| ·禽衣原体病 | 第15-16页 |
| ·我国动物衣原体病流行情况 | 第16-18页 |
| ·流行情况 | 第16-18页 |
| ·衣原体分子生物学结构与功能 | 第18-23页 |
| ·基因组研究进展 | 第18-21页 |
| ·蛋白组学研究进展 | 第21-23页 |
| ·鹦鹉热衣原体疫苗研究进展 | 第23-25页 |
| ·减毒活疫苗 | 第23页 |
| ·灭活疫苗 | 第23-24页 |
| ·基因工程疫苗 | 第24-25页 |
| ·结语 | 第25页 |
| ·腺病毒载体的应用 | 第25-27页 |
| ·腺病毒概况 | 第25页 |
| ·腺病毒载体在疫苗研究中的应用 | 第25-27页 |
| ·我国动物衣原体病研究概况 | 第27-29页 |
| 第二章 鸡源鹦鹉热衣原体分离与鉴定 | 第29-35页 |
| ·材料和方法 | 第29-30页 |
| ·鸡胚、实验动物及试剂 | 第29页 |
| ·方法 | 第29-30页 |
| ·结果 | 第30-34页 |
| ·血清学检查 | 第30页 |
| ·病原分离鉴定 | 第30-34页 |
| ·讨论 | 第34-35页 |
| 第三章 鸡衣原体病PCR诊断方法的研究 | 第35-41页 |
| ·材料 | 第35页 |
| ·菌种、仪器及试剂 | 第35页 |
| ·引物 | 第35页 |
| ·方法 | 第35-38页 |
| ·鸡衣原体基因组DNA的提取 | 第35-36页 |
| ·PCR反应体系及条件 | 第36-37页 |
| ·PCR产物的观察 | 第37页 |
| ·减蛋综合症病毒(EDS76V)DNA、新城疫病毒(NDV)RNA、传染性支气管炎病毒(IBV)的RT-PCR | 第37-38页 |
| ·鸡衣原体MOMP蛋白基因引物特异性检测 | 第38页 |
| ·鸡衣原体PCR灵敏度的检测 | 第38页 |
| ·鸡衣原体病PCR诊断与间接血凝(IHA)试验敏感性的比较 | 第38页 |
| ·鸡源鹦鹉热衣原体病PCR诊断稳定性试验 | 第38页 |
| ·结果 | 第38-40页 |
| ·套式PCR反应结果 | 第38-39页 |
| ·PCR反应特异性试验结果 | 第39页 |
| ·灵敏度试验 | 第39页 |
| ·鸡衣原体病PCR诊断与间接血凝(IHA)试验敏感性的比较 | 第39页 |
| ·鸡衣原体病PCR诊断方法稳定性试验 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-41页 |
| 第四章 鸡源鹦鹉热衣原体MOMP基因的克隆与序列分析 | 第41-46页 |
| ·材料和方法 | 第41-43页 |
| ·试剂 | 第41页 |
| ·鸡源鹦鹉热衣原体(CpL株)MOMP基因的PCR产物琼脂糖凝胶电泳 | 第41页 |
| ·PCR产物回收 | 第41-42页 |
| ·回收的PCR产物与pMD-18T载体的连接与转化 | 第42页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第42页 |
| ·重组质粒酶切鉴定 | 第42-43页 |
| ·重组质粒PCR鉴定 | 第43页 |
| ·序列测定 | 第43页 |
| ·序列同源性分析 | 第43页 |
| ·结果 | 第43-45页 |
| ·重组质粒酶切鉴定 | 第44页 |
| ·重组质粒PCR鉴定 | 第44页 |
| ·序列同源性比较 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45-46页 |
| 第五章 鸡源鹦鹉热衣原体MOMP基因重组腺病毒载体的构建 | 第46-55页 |
| ·材料与方法 | 第46-50页 |
| ·质粒载体与宿主菌 | 第46页 |
| ·引物 | 第46-47页 |
| ·MOMP基因的PCR扩增 | 第47-48页 |
| ·MOMP片段与pMD18-simple T载体的连接 | 第48页 |
| ·MOMP基因片段插入穿梭载体 | 第48-49页 |
| ·BJ5183感受态细胞的制备 | 第49页 |
| ·细菌内同源重组 | 第49-50页 |
| ·结果 | 第50-52页 |
| ·MOMP／pMD18-simple-T重组质粒PCR鉴定 | 第50-51页 |
| ·MOMP／pMD18-simple-T重组质粒酶切鉴定 | 第51页 |
| ·重组穿梭质粒酶切鉴定和PCR鉴定 | 第51页 |
| ·重组穿梭质粒序列测定 | 第51-52页 |
| ·重组腺病毒质粒PCR鉴定和酶切鉴定 | 第52页 |
| ·讨论 | 第52-55页 |
| 第六章 鸡源鹦鹉热衣原体MOMP基因重组腺病毒质粒转染与鉴定 | 第55-63页 |
| ·材料与方法 | 第55-58页 |
| ·细胞、菌株和试剂 | 第55页 |
| ·重组腺病毒质粒转染HEK293细胞 | 第55-56页 |
| ·重组腺病毒的培养 | 第56页 |
| ·PCR检测目的基因 | 第56页 |
| ·间接免疫荧光检测目的基因的表达 | 第56-57页 |
| ·重组腺病毒与减蛋综合征阳性血清的中和试验 | 第57页 |
| ·重组腺病毒稳定性试验 | 第57页 |
| ·有限稀释法测定重组腺病毒毒价 | 第57页 |
| ·重组腺病毒噬斑试验测定毒价 | 第57-58页 |
| ·重组腺病毒电镜观察 | 第58页 |
| ·结果 | 第58-62页 |
| ·重组腺病毒转染HEK293细胞 | 第58页 |
| ·PCR检测MOMP基因 | 第58-59页 |
| ·间接免疫荧光检测MOMP基因的表达 | 第59页 |
| ·重组腺病毒减蛋综合征阳性血清中和试验 | 第59-60页 |
| ·重组腺病毒稳定性检测 | 第60页 |
| ·重组腺病毒毒价测定 | 第60-61页 |
| ·重组腺病毒噬斑试验测定毒价 | 第61页 |
| ·重组腺病毒电镜观察 | 第61-62页 |
| ·讨论 | 第62-63页 |
| 第七章 鸡源鹦鹉热衣原体MOMP基因重组腺病毒的SPF雏鸡免疫试验 | 第63-70页 |
| ·材料与方法 | 第63-64页 |
| ·细胞和培养基 | 第63页 |
| ·重组腺病毒制备 | 第63页 |
| ·CpL鸡胚适应毒 | 第63页 |
| ·试验动物及分组 | 第63页 |
| ·血清抗体效价测定 | 第63-64页 |
| ·重组腺病毒血清抗体检测 | 第64页 |
| ·攻毒保护试验 | 第64页 |
| ·结果 | 第64-69页 |
| ·免疫前的鹦鹉热衣原体抗体水平 | 第64-65页 |
| ·免疫后血清抗体的测定 | 第65-68页 |
| ·肌肉免疫和皮下免疫抗体水平比较 | 第68页 |
| ·重组腺病毒血清抗体的测定 | 第68页 |
| ·攻毒保护试验结果 | 第68-69页 |
| ·讨论 | 第69-70页 |
| 第八章 鸡源鹦鹉热衣原体MOMP基因重组腺病毒本动物试验及生物学评价 | 第70-77页 |
| ·材料与方法 | 第70-71页 |
| ·细胞和培养基 | 第70页 |
| ·重组腺病毒制备 | 第70页 |
| ·CpL鸡胚适应毒 | 第70页 |
| ·试验动物及分组 | 第70页 |
| ·抗MOMP抗体持续水平监测 | 第70页 |
| ·淋巴细胞增殖试验 | 第70-71页 |
| ·攻毒试验 | 第71页 |
| ·重组腺病毒安全性评价 | 第71页 |
| ·疫苗保存期试验 | 第71页 |
| ·结果 | 第71-75页 |
| ·抗MOMP抗体水平变化检测 | 第71-72页 |
| ·淋巴细胞增殖试验 | 第72页 |
| ·攻毒试验 | 第72-73页 |
| ·重组腺病毒安全性评价 | 第73-74页 |
| ·疫苗保存期试验 | 第74-75页 |
| ·讨论 | 第75-77页 |
| 第九章 结论 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-90页 |
| 附录 | 第90-99页 |
| 致谢 | 第99-100页 |
| 作者简历 | 第100页 |
