第一章 绪论 | 第1-27页 |
·猪瘟病毒的分子生物学研究进展 | 第12-22页 |
·猪瘟病毒的形态及理化特性 | 第12-13页 |
·猪瘟病毒的基因组结构 | 第13-14页 |
·猪瘟病毒的侵入及复制 | 第14-15页 |
·CSFV的编码蛋白及其功能 | 第15-19页 |
·CSFV非编码区的结构与功能 | 第19-20页 |
·猪瘟病毒的生物型 | 第20-21页 |
·猪瘟病毒的遗传分型 | 第21-22页 |
·单克隆抗体在CSFV研究中的应用 | 第22-25页 |
·McAb在CSFV鉴别诊断方面的应用 | 第22页 |
·McAb在研究CSFV抗原和蛋白结构间关系方面的应用 | 第22-23页 |
·McAb在鉴定CSFV保护性抗原蛋白方面的应用 | 第23页 |
·McAb在研究CSFV抗原变异方面的应用 | 第23-24页 |
·McAb在CSFV蛋白质抗原表位研究方面的应用 | 第24-25页 |
·本研究的背景与目的 | 第25-27页 |
第二章 猪瘟病毒弱毒E2基因的克隆及表达 | 第27-35页 |
·材料与方法 | 第27-31页 |
·毒株、菌株与质粒 | 第27页 |
·工具酶及试剂 | 第27-28页 |
·主要实验仪器 | 第28页 |
·引物的设计与合成 | 第28页 |
·病毒RNA提取 | 第28页 |
·CSFV tE2基因片段的RT-PCR扩增和克隆 | 第28-29页 |
·表达载体的构建与鉴定 | 第29页 |
·蛋白的诱导表达及纯化 | 第29-30页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第30页 |
·酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第30页 |
·Western blotting分析 | 第30-31页 |
·结果 | 第31-34页 |
·tE2基因片段正确插入表达载体中 | 第31-32页 |
·重组蛋白获得高效表达 | 第32-33页 |
·重组蛋白能被猪瘟病毒特异性血清所识别 | 第33-34页 |
·讨论 | 第34-35页 |
第三章 针对猪瘟病毒E2蛋白单克隆抗体的制备 | 第35-45页 |
·材料与方法 | 第35-39页 |
·细胞、实验动物及试剂 | 第35页 |
·试剂配制 | 第35-36页 |
·抗原的制备 | 第36页 |
·动物免疫 | 第36页 |
·细胞融合 | 第36-37页 |
·阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第37页 |
·阳性杂交瘤细胞的纯化 | 第37-38页 |
·单克隆抗体的大量制备 | 第38页 |
·ELISA | 第38页 |
·免疫过氧化物酶单层试验(IPMA) | 第38页 |
·Western blotting分析 | 第38-39页 |
·单克隆抗体的亚型鉴定 | 第39页 |
·结果 | 第39-43页 |
·筛选出一株分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞 | 第39页 |
·单克隆抗体能与免疫原发生特异性反应 | 第39-40页 |
·单克隆抗体能与猪瘟病毒发生特异性反应 | 第40-42页 |
·单克隆抗体能够识别杆状病毒表达的重组E2蛋白 | 第42-43页 |
·单克隆抗体属于IgG1亚型 | 第43页 |
·讨论 | 第43-45页 |
第四章 结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
作者简历 | 第54页 |