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猪瘟病毒E2蛋白主要抗原区的表达及其单克隆抗体的制备

第一章 绪论第1-27页
   ·猪瘟病毒的分子生物学研究进展第12-22页
     ·猪瘟病毒的形态及理化特性第12-13页
     ·猪瘟病毒的基因组结构第13-14页
     ·猪瘟病毒的侵入及复制第14-15页
     ·CSFV的编码蛋白及其功能第15-19页
     ·CSFV非编码区的结构与功能第19-20页
     ·猪瘟病毒的生物型第20-21页
     ·猪瘟病毒的遗传分型第21-22页
   ·单克隆抗体在CSFV研究中的应用第22-25页
     ·McAb在CSFV鉴别诊断方面的应用第22页
     ·McAb在研究CSFV抗原和蛋白结构间关系方面的应用第22-23页
     ·McAb在鉴定CSFV保护性抗原蛋白方面的应用第23页
     ·McAb在研究CSFV抗原变异方面的应用第23-24页
     ·McAb在CSFV蛋白质抗原表位研究方面的应用第24-25页
   ·本研究的背景与目的第25-27页
第二章 猪瘟病毒弱毒E2基因的克隆及表达第27-35页
   ·材料与方法第27-31页
     ·毒株、菌株与质粒第27页
     ·工具酶及试剂第27-28页
     ·主要实验仪器第28页
     ·引物的设计与合成第28页
     ·病毒RNA提取第28页
     ·CSFV tE2基因片段的RT-PCR扩增和克隆第28-29页
     ·表达载体的构建与鉴定第29页
     ·蛋白的诱导表达及纯化第29-30页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第30页
     ·酶联免疫吸附试验(ELISA)第30页
     ·Western blotting分析第30-31页
   ·结果第31-34页
     ·tE2基因片段正确插入表达载体中第31-32页
     ·重组蛋白获得高效表达第32-33页
     ·重组蛋白能被猪瘟病毒特异性血清所识别第33-34页
   ·讨论第34-35页
第三章 针对猪瘟病毒E2蛋白单克隆抗体的制备第35-45页
   ·材料与方法第35-39页
     ·细胞、实验动物及试剂第35页
     ·试剂配制第35-36页
     ·抗原的制备第36页
     ·动物免疫第36页
     ·细胞融合第36-37页
     ·阳性杂交瘤细胞的筛选第37页
     ·阳性杂交瘤细胞的纯化第37-38页
     ·单克隆抗体的大量制备第38页
     ·ELISA第38页
     ·免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)第38页
     ·Western blotting分析第38-39页
     ·单克隆抗体的亚型鉴定第39页
   ·结果第39-43页
     ·筛选出一株分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞第39页
     ·单克隆抗体能与免疫原发生特异性反应第39-40页
     ·单克隆抗体能与猪瘟病毒发生特异性反应第40-42页
     ·单克隆抗体能够识别杆状病毒表达的重组E2蛋白第42-43页
     ·单克隆抗体属于IgG1亚型第43页
   ·讨论第43-45页
第四章 结论第45-46页
参考文献第46-53页
致谢第53-54页
作者简历第54页

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