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GST单克隆抗体的制备及双夹心ELISA检测H5亚型禽流感病毒抗体方法的建立

1 引言第1-13页
   ·GST研究进展第9-10页
     ·GST的概述第9页
     ·GST在分子生物学中的应用第9-10页
   ·单克隆抗体研究进展第10页
   ·禽流感病毒HA蛋白第10页
   ·禽流感抗体检测方法的研究概况第10-11页
   ·本研究的目的和意义第11-12页
   ·研究内容与技术路线第12页
   ·研究目标第12-13页
2 实验材料第13-17页
   ·试剂第13-15页
   ·动物和细胞第15页
   ·仪器第15-16页
   ·质粒及阳性血清第16-17页
3 试验方法第17-26页
   ·GST蛋白的表达及纯化第17页
   ·GST单克隆抗体的制备第17-23页
     ·免疫小鼠第17页
     ·ELISA抗原最适包被浓度的确定第17-18页
     ·血清效价的测定第18页
     ·杂交瘤细胞株的建立第18-21页
     ·腹水型单克隆抗体制备及纯化第21-22页
     ·单克隆抗体特性的鉴定第22-23页
     ·GST单克隆抗体的Western-Blot检测第23页
   ·GST—HA1融合蛋白的表达第23-24页
     ·基因工程重组菌的诱导表达第23页
     ·菌体的超声裂解第23-24页
     ·GST—HA1融合蛋白的Western-Blot检测第24页
   ·双夹心ELISA方法的建立第24-26页
     ·GST单抗和GST—HA1抗原包被浓度的确定第24页
     ·血清样品的检测第24页
     ·与其他血清的交叉反应第24-25页
     ·双夹心ELISA的稳定性第25-26页
4 结果与分析第26-35页
   ·GST蛋白的表达和纯化第26页
   ·GST单克隆抗体的制备第26-32页
     ·ELISA抗原最适包被浓度的确定第26-27页
     ·小鼠血清效价的检测第27页
     ·融合细胞的筛选及克隆第27页
     ·杂交瘤细胞株的建立第27-28页
     ·腹水的收集第28-29页
     ·单克隆抗体的纯化(辛酸—硫酸铵法)第29-30页
     ·纯化后单克隆抗体的浓度第30页
     ·单克隆抗体效价的测定第30页
     ·单克隆抗体亚类的鉴定第30页
     ·单克隆抗体分子量测定第30-31页
     ·单克隆抗体的免疫印迹第31-32页
   ·GST—HA1融合蛋白的表达第32-33页
     ·GST—HA1融合蛋白的电泳分析第32页
     ·GST—HA1融合蛋白免疫印迹第32-33页
   ·双夹心ELISA方法的初步建立第33-35页
     ·GST单克隆抗体及GST—HA1抗原浓度的确定第33页
     ·血清样品的检测第33-34页
     ·与其他血清的交叉反应第34页
     ·双夹心ELISA的稳定性第34-35页
5 讨论第35-39页
   ·单克隆抗体的制备第35-36页
     ·骨髓瘤细胞系的选择第35页
     ·细胞融合及筛选第35页
     ·单克隆抗体的纯化第35-36页
   ·GST单克隆抗体的应用前景第36页
   ·GST—HA1融合蛋白的表达第36页
   ·双夹心ELISA检测方法的初步建立第36-37页
   ·关于ELISA的操作第37-39页
     ·ELISA中血清样品的稀释第37-38页
     ·ELISA操作中的注意事项第38-39页
6 结论第39-40页
参考文献第40-44页
在读期间发表的学术论文第44-45页
作者简历第45-46页
致谢第46-47页
吉林畜牧兽医第47-51页

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