| 第一篇 酪氨酸激酶 JAK2 与真性红细胞增多症 | 第1-43页 |
| 第一章 前言 | 第9-27页 |
| 第一节 酪氨酸激酶的分类 | 第10-13页 |
| 1. 受体型蛋白激酶 | 第10-12页 |
| 2. 非受体型蛋白激酶 | 第12-13页 |
| 第二节 JAK 家族酪氨酸激酶与 JAK-STAT 信号转导途径 | 第13-21页 |
| 1. JAK 家族酪氨酸激酶 | 第13-15页 |
| 2. JAK-STAT信号转导途径 | 第15-19页 |
| 3. JAK/STAT 信号转导通路与疾病的关系 | 第19-21页 |
| 第三节 JAK2 的突变与真性红细胞增多症 | 第21-24页 |
| 1. 真性红细胞增多症 | 第21页 |
| 2. PV 发病机理的研究进展 | 第21-24页 |
| 第四节 研究目的与理论意义 | 第24页 |
| 1. 研究目的 | 第24页 |
| 2. 理论意义 | 第24页 |
| 参考文献 | 第24-27页 |
| 第二章 等位基因 PCR 检测 JAK2V617F 的基因突变 | 第27-42页 |
| 第一节 实验材料 | 第27-28页 |
| 第二节 实验方法 | 第28-34页 |
| 1. 收集全血标本及提取基因组 DNA | 第28-29页 |
| 2. 基本分子生物学实验方法 | 第29页 |
| 3. pKS-JAK2 及pKS-JAK2V617F 的克隆 | 第29-31页 |
| 4. 应用等位基因特异性 PCR 检测 JAKV617F 突变体 | 第31-34页 |
| 第三节 结果与讨论 | 第34-42页 |
| 1. pKS-JAK2 及pKS-JAK2V617F 的克隆 | 第34-35页 |
| 2. ASP 检测 JAK2V617F 突变体的敏感性及特异性分析 | 第35页 |
| 3. JAK2V617F 的点突变频率检测 | 第35-37页 |
| 4. 检测样本的血常规检测结果分析 | 第37-42页 |
| 第三章 结论 | 第42页 |
| 参考文献 | 第42-43页 |
| 第二篇 应用 RNAi 技术研究线虫酪氨酸磷酸酶 PRL 的生物学功能 | 第43-116页 |
| 第一章 前言 | 第43-71页 |
| 第一节 PRL 亚家族酪氨酸磷酸酶 | 第43-46页 |
| 第二节 RNA 干扰 | 第46-52页 |
| 1. RNAi 的机理 | 第46-48页 |
| 2. RNAi 的特征 | 第48-49页 |
| 3. RNAi 的生物学功能 | 第49-50页 |
| 4. 待解决的问题 | 第50-52页 |
| 第三节 秀丽新杆线虫 | 第52-60页 |
| 1. 什么是线虫 | 第52-56页 |
| 2. 为什么线虫是一个优秀的模式生物 | 第56-57页 |
| 3. RNAi 在线虫中的实现方法 | 第57-60页 |
| 第四节 线虫生命周期的调节 | 第60-64页 |
| 第五节 研究目的和理论意义 | 第64页 |
| 1. 研究目的 | 第64页 |
| 2. 理论意义 | 第64页 |
| 参考文献 | 第64-71页 |
| 第二章 cPRL 基因的克隆表达 | 第71-83页 |
| 第一节 实验材料 | 第71-72页 |
| 第二节 实验方法 | 第72-76页 |
| 1. 基本分子生物学实验方法 | 第72页 |
| 2. 引物设计 | 第72页 |
| 3. 目的片段的扩增 | 第72-73页 |
| 4. 克隆载体的构建和测定 | 第73-74页 |
| 5. 表达载体的构建和诱导表达 | 第74-76页 |
| 第三节 结果与讨论 | 第76-80页 |
| 1. 目的片段的扩增 | 第76页 |
| 2. 克隆载体的构建 | 第76-79页 |
| 3. 表达载体构建的结果验证 | 第79-80页 |
| 4. 目的蛋白的可溶性表达 | 第80页 |
| 本章小结 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-83页 |
| 第三章 cPRL 基因表达产物的分离纯化及抗体制备 | 第83-90页 |
| 第一节 实验材料 | 第83-84页 |
| 第二节 实验方法 | 第84-88页 |
| 1. 线虫 PRL 蛋白的分离纯化 | 第84-85页 |
| 2. 线虫 PRL 抗体的制备 | 第85-86页 |
| 3. 线虫 PRL 抗体的纯化 | 第86-88页 |
| 第三节 实验结果 | 第88-89页 |
| 1. cPRL蛋白的分离纯化 | 第88页 |
| 2. 免疫家兔后抗体效价的检测 | 第88-89页 |
| 3. 多克隆抗体经纯化后抗体效价的检测 | 第89页 |
| 本章小结 | 第89-90页 |
| 第四章 干扰cPRL 基因后对线虫表型的影响 | 第90-115页 |
| 第一节 实验材料 | 第90-92页 |
| 第二节 实验方法 | 第92-103页 |
| 1. 表达cPRL dsRNA 菌株的构建 | 第92-93页 |
| 2. 对照组菌株的构建 | 第93-94页 |
| 3. 线虫的一般培养 | 第94-96页 |
| 4. 对线虫cPRL 基因的干扰 | 第96-98页 |
| 5. 干扰后对线虫表型的观测 | 第98-100页 |
| 6. 线虫cPRL 基因表达位点的研究 | 第100-102页 |
| 7. 研究线虫cPRL 基因在线虫生命周期的表达 | 第102-103页 |
| 第三节 实验结果 | 第103-114页 |
| 1. dsRNA 表达载体的构建 | 第103-104页 |
| 2. 对照组细菌构建 | 第104页 |
| 3. Western Blotting 检测干扰效果 | 第104页 |
| 4. 干扰后线虫表型变化的观测 | 第104-112页 |
| 5. cPRL 表达位点的研究 | 第112-113页 |
| 6. 线虫cPRL 基因在线虫发育时期中表达的研究 | 第113-114页 |
| 本章小结 | 第114-115页 |
| 第五章 结论 | 第115-116页 |
| 攻博期间发表的学术论文及其他成果 | 第116-118页 |
| 中文摘要 | 第118-124页 |
| 英文摘要 | 第124-130页 |
| 致谢 | 第130页 |
