| 目录 | 第1-11页 |
| 第一章 综述 | 第11-18页 |
| 1 前言 | 第11-16页 |
| ·泛素基因概述 | 第11-12页 |
| ·泛素-蛋白酶体途径的组成 | 第12-13页 |
| ·泛素化和去泛素化 | 第13页 |
| ·泛素-蛋白酶体途径介导的蛋白水解过程 | 第13-14页 |
| ·真菌泛素的研究现状 | 第14-15页 |
| ·红曲菌分子水平研究进展 | 第15-16页 |
| 2 研究内容、目的和意义 | 第16-17页 |
| 3 技术路线 | 第17-18页 |
| 第二章 橙色红曲菌AS3.4384泛素基因的克隆分析 | 第18-49页 |
| 1 材料与仪器 | 第18-22页 |
| 2 实验方法 | 第22-31页 |
| ·橙色红曲菌AS3.4384基因组DNA提取 | 第22页 |
| ·六种限制性内切酶分别酶切橙色红曲菌AS3.4384基因组DNA | 第22-23页 |
| ·探针的制备 | 第23-25页 |
| ·Southern杂交 | 第25-27页 |
| ·重组质粒的构建 | 第27-29页 |
| ·大肠杆菌DH5a感受态细胞的制备及CaCl_2诱导转化 | 第29页 |
| ·菌落原位杂交筛选阳性克隆子 | 第29-30页 |
| ·克隆子鉴定与测序分析 | 第30-31页 |
| 3 实验结果与分析 | 第31-44页 |
| ·橙色红曲菌AS3.4384基因组DNA的提取 | 第31页 |
| ·六种限制性内切酶分别酶切橙色红曲菌AS3.4384基因组DNA | 第31-32页 |
| ·PGR扩Y_(130)中泛素基因EST片段 | 第32-33页 |
| ·Southern杂交 | 第33-34页 |
| ·克隆子筛选 | 第34-36页 |
| ·测序结果分析 | 第36-44页 |
| 讨论 | 第44-48页 |
| 小结 | 第48-49页 |
| 第三章 橙色红曲菌AS3.4384基因组文库的构建与筛选含泛素基因的阳性克隆子 | 第49-65页 |
| 1 材料与仪器 | 第49-52页 |
| 2 实验方法 | 第52-58页 |
| ·PCR引物的设计 | 第52页 |
| ·Sau3Al酶部分酶切橙色红曲菌AS3.4384基因组DNA | 第52-53页 |
| ·回收Sau3Al酶酶切橙色红曲菌AS3.4384基因组的产物 | 第53页 |
| ·PCR验证回收的酶切产物中是否有泛素基因 | 第53-54页 |
| ·pUC119/BamHl/BAP与2.3中回收的酶切产物连接 | 第54页 |
| ·大肠杆菌DH5a感受态细胞的制备 | 第54-55页 |
| ·电击转化 | 第55页 |
| ·库容量的大小的计算 | 第55页 |
| ·构建克隆子混合池和质粒混合池 | 第55-56页 |
| ·PCR法筛选阳性克隆池和阳性克隆子 | 第56-58页 |
| 3 实验结果与分析 | 第58-63页 |
| ·Sau3Al酶部分酶切AS3.4384基因组DNA最佳条件 | 第58页 |
| ·PCR验证回收的酶切产物中是否有泛素基因 | 第58-59页 |
| ·库容量的计算 | 第59-60页 |
| ·阳性克隆池的筛选 | 第60-61页 |
| ·阳性克隆子的筛选 | 第61-63页 |
| 小结 | 第63-64页 |
| 创新 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 个人简历 | 第72页 |
| 发表文章： | 第72-73页 |
| 论文原创性声明 | 第73页 |
