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玉米种子特异性表达基因Zpu1和brittle2启动子的分离与功能分析

第一章 绪论第1-32页
   ·引言第12-13页
   ·真核启动子的一般特点第13-19页
     ·RNA聚合酶Ⅱ核心启动子(RNA polymerase Ⅱ core promoter)第13-17页
     ·上游启动子元件(upstream promoter element)第17-19页
   ·植物基因工程启动子研究进展第19-31页
     ·组成型启动子(constitutive promoter)第19-24页
     ·组织特异性启动子(tissue-specific promoter)第24-29页
     ·诱导型启动子(inducible promoter)第29-31页
   ·本论文研究的目的意义第31-32页
第二章 材料与方法第32-53页
   ·材料第32-33页
     ·宿主菌与质粒第32页
     ·植物材料第32页
     ·工具酶及生化试剂第32页
     ·主要仪器设备第32页
     ·实验中使用的PCR引物第32-33页
   ·培养基与溶液配制第33-40页
     ·培养基第33-34页
     ·常用基本溶液第34页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第34页
     ·制备质粒DNA所需溶液第34-35页
     ·基因组DNA提取缓冲液第35-36页
     ·Southern杂交所需溶液第36-37页
     ·玉米基因组文库筛选所需溶液第37-38页
     ·GUS组织化学染色溶液第38-39页
     ·GUS定量检测所需溶液第39-40页
   ·实验方法第40-53页
     ·重组质粒DNA的构建第40-42页
     ·玉米基因组文库的筛选第42-47页
     ·根癌农杆菌介导的烟草转化第47-48页
     ·植物总DNA的提取及纯化第48-50页
     ·转基因烟草植株PCR检测第50页
     ·Southern分析第50-52页
     ·GUS活性检测第52-53页
第三章 玉米Zpul启动子的分离与功能分析第53-70页
   ·引言第53-54页
   ·材料与方法第53页
     ·材料第53页
     ·方法第53-54页
   ·结果与分析第54-70页
     ·Zpul基因5’侧翼序列的克隆与序列分析第54-60页
     ·Zpul启动子的5’端和3’端缺失第60-61页
     ·zpul5’侧翼序列缺失表达载体的构建第61-64页
     ·转基因烟草植株的获得及其分子检测第64-66页
     ·Zpul启动子功能区域的分析第66-68页
     ·Zpul启动子的时空表达特性分析第68-69页
     ·GUS组织化学染色分析Zpul启动子在不同组织中的表达第69-70页
第四章 玉米brittle2与zE19启动子表达特性比较第70-79页
   ·引言第70页
   ·材料与方法第70-71页
     ·材料第70页
     ·方法第70-71页
   ·结果与分析第71-79页
     ·brittle2和zE19启动子的PCR扩增第71-72页
     ·PCR扩增片段的测序与序列分析第72页
     ·真核表达载体的构建第72-74页
     ·烟草的转化与转基因后代的分子检测第74-76页
     ·T0代转基因烟草中brittle2和zE19启动子表达活性的比较第76页
     ·转基因烟草后代的Southern分析第76-77页
     ·T1代转基因烟草brittle2和zE19启动子表达特性分析第77-79页
第五章 讨论第79-81页
第六章 结论第81-82页
参考文献第82-94页
致谢第94页

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