第一章 绪论 | 第1-32页 |
·引言 | 第12-13页 |
·真核启动子的一般特点 | 第13-19页 |
·RNA聚合酶Ⅱ核心启动子(RNA polymerase Ⅱ core promoter) | 第13-17页 |
·上游启动子元件(upstream promoter element) | 第17-19页 |
·植物基因工程启动子研究进展 | 第19-31页 |
·组成型启动子(constitutive promoter) | 第19-24页 |
·组织特异性启动子(tissue-specific promoter) | 第24-29页 |
·诱导型启动子(inducible promoter) | 第29-31页 |
·本论文研究的目的意义 | 第31-32页 |
第二章 材料与方法 | 第32-53页 |
·材料 | 第32-33页 |
·宿主菌与质粒 | 第32页 |
·植物材料 | 第32页 |
·工具酶及生化试剂 | 第32页 |
·主要仪器设备 | 第32页 |
·实验中使用的PCR引物 | 第32-33页 |
·培养基与溶液配制 | 第33-40页 |
·培养基 | 第33-34页 |
·常用基本溶液 | 第34页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第34页 |
·制备质粒DNA所需溶液 | 第34-35页 |
·基因组DNA提取缓冲液 | 第35-36页 |
·Southern杂交所需溶液 | 第36-37页 |
·玉米基因组文库筛选所需溶液 | 第37-38页 |
·GUS组织化学染色溶液 | 第38-39页 |
·GUS定量检测所需溶液 | 第39-40页 |
·实验方法 | 第40-53页 |
·重组质粒DNA的构建 | 第40-42页 |
·玉米基因组文库的筛选 | 第42-47页 |
·根癌农杆菌介导的烟草转化 | 第47-48页 |
·植物总DNA的提取及纯化 | 第48-50页 |
·转基因烟草植株PCR检测 | 第50页 |
·Southern分析 | 第50-52页 |
·GUS活性检测 | 第52-53页 |
第三章 玉米Zpul启动子的分离与功能分析 | 第53-70页 |
·引言 | 第53-54页 |
·材料与方法 | 第53页 |
·材料 | 第53页 |
·方法 | 第53-54页 |
·结果与分析 | 第54-70页 |
·Zpul基因5’侧翼序列的克隆与序列分析 | 第54-60页 |
·Zpul启动子的5’端和3’端缺失 | 第60-61页 |
·zpul5’侧翼序列缺失表达载体的构建 | 第61-64页 |
·转基因烟草植株的获得及其分子检测 | 第64-66页 |
·Zpul启动子功能区域的分析 | 第66-68页 |
·Zpul启动子的时空表达特性分析 | 第68-69页 |
·GUS组织化学染色分析Zpul启动子在不同组织中的表达 | 第69-70页 |
第四章 玉米brittle2与zE19启动子表达特性比较 | 第70-79页 |
·引言 | 第70页 |
·材料与方法 | 第70-71页 |
·材料 | 第70页 |
·方法 | 第70-71页 |
·结果与分析 | 第71-79页 |
·brittle2和zE19启动子的PCR扩增 | 第71-72页 |
·PCR扩增片段的测序与序列分析 | 第72页 |
·真核表达载体的构建 | 第72-74页 |
·烟草的转化与转基因后代的分子检测 | 第74-76页 |
·T0代转基因烟草中brittle2和zE19启动子表达活性的比较 | 第76页 |
·转基因烟草后代的Southern分析 | 第76-77页 |
·T1代转基因烟草brittle2和zE19启动子表达特性分析 | 第77-79页 |
第五章 讨论 | 第79-81页 |
第六章 结论 | 第81-82页 |
参考文献 | 第82-94页 |
致谢 | 第94页 |