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西瓜品种和育种材料的DNA指纹分析与分子鉴定

中文摘要第1-10页
ABSTRACT第10-11页
第一章 综述第11-31页
 1 前言第11-13页
 2 文献综述第13-31页
  2.1 分子标记技术研究进展第13-17页
   2.1.1 RFLP标记技术第14-15页
   2.1.2 RAPD标记技术第15页
   2.1.3 SCAR标记技术第15-16页
   2.1.4 STS标记技术第16页
   2.1.5 SSR和ISSR标记技术第16页
   2.1.6 AFLP标记技术第16-17页
   2.1.7 其他新型标记技术第17页
   2.1.8 几种常见DNA指纹图谱技术的比较第17页
  2.2 RAPD技术及其在作物育种上的应用第17-21页
   2.2.1 RAPD标记技术的原理第18页
   2.2.2 RAPD的稳定性研究第18-19页
   2.2.3 RAPD的技术特点及其应用研究进展第19-20页
   2.2.4 展望第20-21页
  2.3 SSR技术及其应用研究进展第21-24页
   2.3.1 DNA重复序列第21页
   2.3.2 SSR基本原理第21-22页
   2.3.3 SSR引物的开发第22页
   2.3.4 SSR标记的特点第22-23页
   2.3.5 SSR标记技术在作物育种中的研究进展第23-24页
   2.3.6 展望第24页
  2.4 AFLP标记及其应用研究进展第24-29页
   2.4.1 AFLP的基本原理第24-25页
   2.4.2 AFLP的技术流程第25-26页
    2.4.2.1 DNA限制性片段的获得及其与接头的连接第25页
    2.4.2.2 限制性片段的选择性扩增第25页
    2.4.2.3 扩增产物凝胶电泳分析第25-26页
   2.4.3 几个与AFLP结果相关因子的分析第26-27页
    2.4.3.1 DNA模板质量和浓度第26页
    2.4.3.2 限制性核酸内切酶的选择和组合第26页
    2.4.3.3 接头设计第26-27页
    2.4.3.4 引物设计第27页
    2.4.3.5 DNA扩增第27页
    2.4.3.6 其他第27页
   2.4.4 AFLP的技术特点和应用前景评价第27-28页
   2.4.5 展望第28-29页
  2.5 分子标记技术在西瓜上的应用第29-31页
   2.5.1 种质资源遗传多样性与亲缘关系第29页
   2.5.2 遗传图谱的构建第29页
   2.5.3 目标性状的连锁分子标记与分子标记辅助育种第29-30页
   2.5.4 品种及杂交种纯度鉴定第30-31页
第二章 西瓜品种和育种材料的RAPD研究及SCAR标记的转化第31-42页
 1 试验材料和方法第31-36页
  1.1 试验材料第31-32页
   1.1.1 西瓜DNA指纹分析所用材料第31-32页
   1.1.2 西瓜杂交种纯度与真实性鉴定所用材料第32页
  1.2 研究方法第32-36页
   1.2.1 DNA的提取第32-33页
    1.2.1.1 CTAB法提取DNA第32页
    1.2.1.2 快速简单DNA提取方法第32-33页
   1.2.2 RAPD-PCR扩增第33页
    1.2.2.1 反应体系第33页
    1.2.2.2 反应程序第33页
    1.2.2.3 电泳检测与数据统计第33页
    1.2.2.4 RAPD引物筛选第33页
   1.2.3 “京欣一号”特异标记OPK14—1500、OPN04—600的回收、克隆与序第33-35页
    1.2.3.1 RAPD产物的回收、纯化第33-34页
    1.2.3.2 RAPD(PCR)产物与载体的连接第34页
    1.2.3.3 RAPD(PCR)产物的克隆第34页
    1.2.3.4 重组质粒的转化与筛选第34-35页
    1.2.3.5 重组质粒的提取与鉴定第35页
    1.2.3.6 目的片段的测序第35页
   1.2.4 SCAR引物的设计及其对“京欣一号”种子纯度的分析第35-36页
    1.2.4.1 SCAR引物的设计第35页
    1.2.4.2 反应体系第35页
    1.2.4.3 反应程序第35-36页
    1.2.4.4 电泳检测扩增产物第36页
 2.结果与分析第36-42页
  2.1 不同引物的扩增结果第36-37页
  2.2 西瓜品种与育种材料的聚类分析第37-38页
  2.3 通过RAPD标记构件西瓜材料的DNA指纹第38-39页
  2.4 “京欣一号”纯度鉴定标记—SCAR标记的转化与应用第39-42页
   2.4.1 “京欣一号”纯度鉴定标记的获得第39页
   2.4.2 SCAR标记的转化第39-41页
   2.4.3 利用SCK14/1500标记和SCN04/600标记进行“京欣一号”杂种纯度鉴定的应用第41-42页
第三章 西瓜品种和育种材料的SSR研究第42-48页
 1 试验材料和方法第42-43页
  1.1 试验材料(同第二章)第42页
  1.2 研究方法第42-43页
   1.2.1 DNA的提取(同第二章)第42页
   1.2.2 SSR扩增与产物检测第42-43页
    1.2.2.1 SSR引物序列第42页
    1.2.2.2 反应程序第42页
    1.2.2.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳第42页
    1.2.2.4 银染检测第42-43页
 2.结果与分析第43-48页
  2.1 不同引物的扩增结果第43-45页
  2.2 利用SSR标记进行小型西瓜品种“京秀”的纯度鉴定研究第45-48页
第四章 西瓜品种和育种材料的AFLP研究第48-54页
 1 试验材料和方法第48-50页
  1.1 试验材料(同第二章)第48页
  1.2 研究方法第48-50页
   1.2.1 DNA的提取(同第二章)第48页
   1.2.2 AFLP扩增与产物检测第48-50页
    1.2.2.1 AFLP扩增体系的建立第48-50页
    1.2.2.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离扩增产物第50页
    1.2.2.3 银染检测扩增产物第50页
    1.2.2.4 AFLP引物组合的选择第50页
 2.结果分析第50-54页
  2.1 不同引物的扩增结果第50-52页
  2.2 利用AFLP标记对西瓜品种与育种材料的聚类分析第52-54页
第五章 RAPD、SSR和AFLP三种标记组合对西瓜材料进行亲缘关系研究第54-56页
第六章 讨论与结论第56-61页
 1.讨论第56-60页
  1.1 应用RAPD、SSR、AFLP标记研究西瓜种质遗传亲缘关系的探讨第56-57页
  1.2 关于西瓜遗传基础相对狭窄的研究探讨第57-58页
  1.3 西瓜材料的DNA指纹构建和西瓜杂交种纯度鉴定的探讨第58-60页
 2.结论第60-61页
参考文献第61-67页
致谢第67页

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