中文摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-11页 |
第一章 综述 | 第11-31页 |
1 前言 | 第11-13页 |
2 文献综述 | 第13-31页 |
2.1 分子标记技术研究进展 | 第13-17页 |
2.1.1 RFLP标记技术 | 第14-15页 |
2.1.2 RAPD标记技术 | 第15页 |
2.1.3 SCAR标记技术 | 第15-16页 |
2.1.4 STS标记技术 | 第16页 |
2.1.5 SSR和ISSR标记技术 | 第16页 |
2.1.6 AFLP标记技术 | 第16-17页 |
2.1.7 其他新型标记技术 | 第17页 |
2.1.8 几种常见DNA指纹图谱技术的比较 | 第17页 |
2.2 RAPD技术及其在作物育种上的应用 | 第17-21页 |
2.2.1 RAPD标记技术的原理 | 第18页 |
2.2.2 RAPD的稳定性研究 | 第18-19页 |
2.2.3 RAPD的技术特点及其应用研究进展 | 第19-20页 |
2.2.4 展望 | 第20-21页 |
2.3 SSR技术及其应用研究进展 | 第21-24页 |
2.3.1 DNA重复序列 | 第21页 |
2.3.2 SSR基本原理 | 第21-22页 |
2.3.3 SSR引物的开发 | 第22页 |
2.3.4 SSR标记的特点 | 第22-23页 |
2.3.5 SSR标记技术在作物育种中的研究进展 | 第23-24页 |
2.3.6 展望 | 第24页 |
2.4 AFLP标记及其应用研究进展 | 第24-29页 |
2.4.1 AFLP的基本原理 | 第24-25页 |
2.4.2 AFLP的技术流程 | 第25-26页 |
2.4.2.1 DNA限制性片段的获得及其与接头的连接 | 第25页 |
2.4.2.2 限制性片段的选择性扩增 | 第25页 |
2.4.2.3 扩增产物凝胶电泳分析 | 第25-26页 |
2.4.3 几个与AFLP结果相关因子的分析 | 第26-27页 |
2.4.3.1 DNA模板质量和浓度 | 第26页 |
2.4.3.2 限制性核酸内切酶的选择和组合 | 第26页 |
2.4.3.3 接头设计 | 第26-27页 |
2.4.3.4 引物设计 | 第27页 |
2.4.3.5 DNA扩增 | 第27页 |
2.4.3.6 其他 | 第27页 |
2.4.4 AFLP的技术特点和应用前景评价 | 第27-28页 |
2.4.5 展望 | 第28-29页 |
2.5 分子标记技术在西瓜上的应用 | 第29-31页 |
2.5.1 种质资源遗传多样性与亲缘关系 | 第29页 |
2.5.2 遗传图谱的构建 | 第29页 |
2.5.3 目标性状的连锁分子标记与分子标记辅助育种 | 第29-30页 |
2.5.4 品种及杂交种纯度鉴定 | 第30-31页 |
第二章 西瓜品种和育种材料的RAPD研究及SCAR标记的转化 | 第31-42页 |
1 试验材料和方法 | 第31-36页 |
1.1 试验材料 | 第31-32页 |
1.1.1 西瓜DNA指纹分析所用材料 | 第31-32页 |
1.1.2 西瓜杂交种纯度与真实性鉴定所用材料 | 第32页 |
1.2 研究方法 | 第32-36页 |
1.2.1 DNA的提取 | 第32-33页 |
1.2.1.1 CTAB法提取DNA | 第32页 |
1.2.1.2 快速简单DNA提取方法 | 第32-33页 |
1.2.2 RAPD-PCR扩增 | 第33页 |
1.2.2.1 反应体系 | 第33页 |
1.2.2.2 反应程序 | 第33页 |
1.2.2.3 电泳检测与数据统计 | 第33页 |
1.2.2.4 RAPD引物筛选 | 第33页 |
1.2.3 “京欣一号”特异标记OPK14—1500、OPN04—600的回收、克隆与序 | 第33-35页 |
1.2.3.1 RAPD产物的回收、纯化 | 第33-34页 |
1.2.3.2 RAPD(PCR)产物与载体的连接 | 第34页 |
1.2.3.3 RAPD(PCR)产物的克隆 | 第34页 |
1.2.3.4 重组质粒的转化与筛选 | 第34-35页 |
1.2.3.5 重组质粒的提取与鉴定 | 第35页 |
1.2.3.6 目的片段的测序 | 第35页 |
1.2.4 SCAR引物的设计及其对“京欣一号”种子纯度的分析 | 第35-36页 |
1.2.4.1 SCAR引物的设计 | 第35页 |
1.2.4.2 反应体系 | 第35页 |
1.2.4.3 反应程序 | 第35-36页 |
1.2.4.4 电泳检测扩增产物 | 第36页 |
2.结果与分析 | 第36-42页 |
2.1 不同引物的扩增结果 | 第36-37页 |
2.2 西瓜品种与育种材料的聚类分析 | 第37-38页 |
2.3 通过RAPD标记构件西瓜材料的DNA指纹 | 第38-39页 |
2.4 “京欣一号”纯度鉴定标记—SCAR标记的转化与应用 | 第39-42页 |
2.4.1 “京欣一号”纯度鉴定标记的获得 | 第39页 |
2.4.2 SCAR标记的转化 | 第39-41页 |
2.4.3 利用SCK14/1500标记和SCN04/600标记进行“京欣一号”杂种纯度鉴定的应用 | 第41-42页 |
第三章 西瓜品种和育种材料的SSR研究 | 第42-48页 |
1 试验材料和方法 | 第42-43页 |
1.1 试验材料(同第二章) | 第42页 |
1.2 研究方法 | 第42-43页 |
1.2.1 DNA的提取(同第二章) | 第42页 |
1.2.2 SSR扩增与产物检测 | 第42-43页 |
1.2.2.1 SSR引物序列 | 第42页 |
1.2.2.2 反应程序 | 第42页 |
1.2.2.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第42页 |
1.2.2.4 银染检测 | 第42-43页 |
2.结果与分析 | 第43-48页 |
2.1 不同引物的扩增结果 | 第43-45页 |
2.2 利用SSR标记进行小型西瓜品种“京秀”的纯度鉴定研究 | 第45-48页 |
第四章 西瓜品种和育种材料的AFLP研究 | 第48-54页 |
1 试验材料和方法 | 第48-50页 |
1.1 试验材料(同第二章) | 第48页 |
1.2 研究方法 | 第48-50页 |
1.2.1 DNA的提取(同第二章) | 第48页 |
1.2.2 AFLP扩增与产物检测 | 第48-50页 |
1.2.2.1 AFLP扩增体系的建立 | 第48-50页 |
1.2.2.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离扩增产物 | 第50页 |
1.2.2.3 银染检测扩增产物 | 第50页 |
1.2.2.4 AFLP引物组合的选择 | 第50页 |
2.结果分析 | 第50-54页 |
2.1 不同引物的扩增结果 | 第50-52页 |
2.2 利用AFLP标记对西瓜品种与育种材料的聚类分析 | 第52-54页 |
第五章 RAPD、SSR和AFLP三种标记组合对西瓜材料进行亲缘关系研究 | 第54-56页 |
第六章 讨论与结论 | 第56-61页 |
1.讨论 | 第56-60页 |
1.1 应用RAPD、SSR、AFLP标记研究西瓜种质遗传亲缘关系的探讨 | 第56-57页 |
1.2 关于西瓜遗传基础相对狭窄的研究探讨 | 第57-58页 |
1.3 西瓜材料的DNA指纹构建和西瓜杂交种纯度鉴定的探讨 | 第58-60页 |
2.结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-67页 |
致谢 | 第67页 |