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无核荔枝花与果实发育相关基因的克隆和功能分析

第一章 前言第1-35页
 1.综述第12-32页
   ·荔枝开花的特点及环境影响因素第12-14页
     ·荔枝的花芽分化第12页
     ·影响荔枝花芽分化的环境因素第12-14页
   ·荔枝的结实特点及其影响因素第14-17页
     ·荔枝胚胎发育的类型第14页
     ·荔枝胚胎的发生发育第14-15页
     ·假种皮的发育与成熟第15-16页
     ·影响果实发育的因素第16-17页
   ·植物花的发育与MADS盒基因的关系第17-22页
     ·花的分化发育过程及其调控基因第18-19页
     ·MADS盒基因与花器官形成的关系第19-22页
   ·植物胚胎发育生理生化机制的研究第22-26页
     ·植物激素与果实发育的关系第22-23页
     ·植物激素与无核果实的关系第23-25页
     ·植物激素诱导无核果实的应用研究第25-26页
   ·植物胚胎发育的基因调控第26-29页
     ·原胚期的基因调控第26-27页
     ·球形胚-心形胚过度期的基因调控第27-28页
     ·器官形成与成熟期的基因调控第28-29页
   ·荔枝的分子生物学研究第29-30页
   ·抑制消减杂交(SSH)的特点第30-32页
 2 研究的目的和意义第32-33页
 3 实验设计第33-35页
第二章 无核荔枝花发育相关MADS-box基因的克隆第35-47页
 1 材料与方法第35-42页
   ·材料第35页
   ·方法第35-42页
     ·无核荔枝花蕾总RNA的提取第35-37页
     ·RT-PCR引物设计与合成第37页
     ·RT-PCR扩增第37-38页
     ·RT-PCR片段的回收第38-39页
     ·回收的RT-PCR片段与T-载体连接第39页
     ·感受态细胞的制备第39页
     ·重组质粒转化感受态细胞第39-40页
     ·提取白色单菌落的质粒酶切鉴定阳性及测序第40页
     ·3’-RACE法获得目标片段的3’端序列第40-42页
     ·序列分析第42页
 2.结果与分析第42-46页
   ·无核荔枝花蕾总RNA的提取结果第42-43页
   ·RT-PCR和3’-RACE及回收条带第43-44页
   ·阳性克隆的鉴定第44页
   ·目标片段的测序分析与同源性比较第44-46页
 3 讨论第46-47页
第三章 LMADS1在基因组中的拷贝数及其表达特异性分析第47-55页
 1 材料与方法第47-51页
   ·材料第47页
   ·方法第47-51页
     ·LMADS1在基因组中拷贝数的Southern blot分析第47-50页
     ·LMADS1在不同器官表达差异的Northern blot分析第50-51页
 2 结果与分析第51-53页
   ·Southern blot分析结果第51-53页
     ·无核荔枝叶片基因组DNA的提取及其酶切第51-52页
     ·探针制备和Southern杂交第52-53页
   ·LMADS1的表达特异性分析第53页
 3.讨论第53-55页
第四章 LMADS1的功能分析第55-67页
 1 材料与方法第55-60页
   ·材料第55页
   ·方法第55-60页
     ·载体构建第55-57页
     ·农杆菌转化第57-58页
     ·真空渗透法与浸泡法转化拟南芥第58-59页
     ·筛选转化子第59页
     ·转基因植株的PCR检测及Southern blot分析第59-60页
 2 结果与分析第60-66页
   ·植物表达载体pLMAD的构建第60-63页
   ·LMADS1基因转化拟南芥第63-66页
     ·PCR检测第63-64页
     ·转化效率及T1代植株的生长情况第64-65页
     ·Sourhern blot分析结果第65-66页
     ·转基因拟南芥植株的生长发育第66页
 3 讨论第66-67页
第五章 无核荔枝果实发育相关基因的克隆第67-85页
 1 材料与方法第67-77页
   ·材料第67页
   ·方法第67-77页
     ·无核幼果与有核幼果总RNA的提取第67页
     ·RNA电泳检测第67页
     ·mRNA的纯化第67-68页
     ·无核幼果与有核幼果的表达差异分析第68-75页
     ·Reverse Northern Dot-Blot鉴定阳性差异片段第75-76页
     ·Northern Blot分析第76-77页
     ·序列分析第77页
 2 结果与分析第77-84页
   ·无核荔枝无核幼果和有核幼果总RNA的提取结果第77-78页
   ·无核幼果与有核幼果表达差异SSH结果第78-84页
     ·PCR扩增结果分析第78页
     ·差减cDNA文库筛选第78-79页
     ·Reverse Northern Dot-Blot分析第79-80页
     ·Northern Blot分析第80-81页
     ·差减cDNA克隆的测序及序列分析第81-84页
 3 讨论第84-85页
结论第85-87页
参考文献第87-98页
致谢第98页

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