第一章 前言 | 第1-35页 |
1.综述 | 第12-32页 |
·荔枝开花的特点及环境影响因素 | 第12-14页 |
·荔枝的花芽分化 | 第12页 |
·影响荔枝花芽分化的环境因素 | 第12-14页 |
·荔枝的结实特点及其影响因素 | 第14-17页 |
·荔枝胚胎发育的类型 | 第14页 |
·荔枝胚胎的发生发育 | 第14-15页 |
·假种皮的发育与成熟 | 第15-16页 |
·影响果实发育的因素 | 第16-17页 |
·植物花的发育与MADS盒基因的关系 | 第17-22页 |
·花的分化发育过程及其调控基因 | 第18-19页 |
·MADS盒基因与花器官形成的关系 | 第19-22页 |
·植物胚胎发育生理生化机制的研究 | 第22-26页 |
·植物激素与果实发育的关系 | 第22-23页 |
·植物激素与无核果实的关系 | 第23-25页 |
·植物激素诱导无核果实的应用研究 | 第25-26页 |
·植物胚胎发育的基因调控 | 第26-29页 |
·原胚期的基因调控 | 第26-27页 |
·球形胚-心形胚过度期的基因调控 | 第27-28页 |
·器官形成与成熟期的基因调控 | 第28-29页 |
·荔枝的分子生物学研究 | 第29-30页 |
·抑制消减杂交(SSH)的特点 | 第30-32页 |
2 研究的目的和意义 | 第32-33页 |
3 实验设计 | 第33-35页 |
第二章 无核荔枝花发育相关MADS-box基因的克隆 | 第35-47页 |
1 材料与方法 | 第35-42页 |
·材料 | 第35页 |
·方法 | 第35-42页 |
·无核荔枝花蕾总RNA的提取 | 第35-37页 |
·RT-PCR引物设计与合成 | 第37页 |
·RT-PCR扩增 | 第37-38页 |
·RT-PCR片段的回收 | 第38-39页 |
·回收的RT-PCR片段与T-载体连接 | 第39页 |
·感受态细胞的制备 | 第39页 |
·重组质粒转化感受态细胞 | 第39-40页 |
·提取白色单菌落的质粒酶切鉴定阳性及测序 | 第40页 |
·3’-RACE法获得目标片段的3’端序列 | 第40-42页 |
·序列分析 | 第42页 |
2.结果与分析 | 第42-46页 |
·无核荔枝花蕾总RNA的提取结果 | 第42-43页 |
·RT-PCR和3’-RACE及回收条带 | 第43-44页 |
·阳性克隆的鉴定 | 第44页 |
·目标片段的测序分析与同源性比较 | 第44-46页 |
3 讨论 | 第46-47页 |
第三章 LMADS1在基因组中的拷贝数及其表达特异性分析 | 第47-55页 |
1 材料与方法 | 第47-51页 |
·材料 | 第47页 |
·方法 | 第47-51页 |
·LMADS1在基因组中拷贝数的Southern blot分析 | 第47-50页 |
·LMADS1在不同器官表达差异的Northern blot分析 | 第50-51页 |
2 结果与分析 | 第51-53页 |
·Southern blot分析结果 | 第51-53页 |
·无核荔枝叶片基因组DNA的提取及其酶切 | 第51-52页 |
·探针制备和Southern杂交 | 第52-53页 |
·LMADS1的表达特异性分析 | 第53页 |
3.讨论 | 第53-55页 |
第四章 LMADS1的功能分析 | 第55-67页 |
1 材料与方法 | 第55-60页 |
·材料 | 第55页 |
·方法 | 第55-60页 |
·载体构建 | 第55-57页 |
·农杆菌转化 | 第57-58页 |
·真空渗透法与浸泡法转化拟南芥 | 第58-59页 |
·筛选转化子 | 第59页 |
·转基因植株的PCR检测及Southern blot分析 | 第59-60页 |
2 结果与分析 | 第60-66页 |
·植物表达载体pLMAD的构建 | 第60-63页 |
·LMADS1基因转化拟南芥 | 第63-66页 |
·PCR检测 | 第63-64页 |
·转化效率及T1代植株的生长情况 | 第64-65页 |
·Sourhern blot分析结果 | 第65-66页 |
·转基因拟南芥植株的生长发育 | 第66页 |
3 讨论 | 第66-67页 |
第五章 无核荔枝果实发育相关基因的克隆 | 第67-85页 |
1 材料与方法 | 第67-77页 |
·材料 | 第67页 |
·方法 | 第67-77页 |
·无核幼果与有核幼果总RNA的提取 | 第67页 |
·RNA电泳检测 | 第67页 |
·mRNA的纯化 | 第67-68页 |
·无核幼果与有核幼果的表达差异分析 | 第68-75页 |
·Reverse Northern Dot-Blot鉴定阳性差异片段 | 第75-76页 |
·Northern Blot分析 | 第76-77页 |
·序列分析 | 第77页 |
2 结果与分析 | 第77-84页 |
·无核荔枝无核幼果和有核幼果总RNA的提取结果 | 第77-78页 |
·无核幼果与有核幼果表达差异SSH结果 | 第78-84页 |
·PCR扩增结果分析 | 第78页 |
·差减cDNA文库筛选 | 第78-79页 |
·Reverse Northern Dot-Blot分析 | 第79-80页 |
·Northern Blot分析 | 第80-81页 |
·差减cDNA克隆的测序及序列分析 | 第81-84页 |
3 讨论 | 第84-85页 |
结论 | 第85-87页 |
参考文献 | 第87-98页 |
致谢 | 第98页 |