| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 英文缩略表 | 第12-14页 |
| 第一章 综述 | 第14-23页 |
| ·单链抗体 | 第14-15页 |
| ·提高抗体库容量和亲和力 | 第15-21页 |
| ·抗体在体内的成熟 | 第16页 |
| ·抗体库方法 | 第16-19页 |
| ·常用抗体库技术 | 第19-21页 |
| ·研究目的与意义 | 第21-23页 |
| 第二章 口蹄疫病毒单链抗体基因库的构建及分析 | 第23-35页 |
| ·实验材料 | 第23-24页 |
| ·实验试剂 | 第23页 |
| ·脾组织（细胞）、菌株及载体 | 第23页 |
| ·主要溶液及其配制方法 | 第23-24页 |
| ·主要仪器 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-28页 |
| ·技术路线 | 第24页 |
| ·引物设计 | 第24页 |
| ·提取RNA | 第24-25页 |
| ·反转录 | 第25页 |
| ·PCR扩增VH和VL | 第25-26页 |
| ·PCR产物的纯化与回收 | 第26页 |
| ·扩增VHL | 第26页 |
| ·连接与转化 | 第26-27页 |
| ·重组质粒的提取与鉴定 | 第27页 |
| ·scFv基因库的构建与分析1 | 第27-28页 |
| ·结果 | 第28-31页 |
| ·RNA质量 | 第28页 |
| ·VH、VL和VHL的PCR扩增 | 第28页 |
| ·VH、VL和VHL的鉴定及序列分析 | 第28-29页 |
| ·scFv的构建 | 第29页 |
| ·序列分析和比对 | 第29-31页 |
| ·讨论 | 第31-35页 |
| 第三章 口蹄疫病毒单链抗体核糖体展示组件构建 | 第35-48页 |
| ·实验材料 | 第35页 |
| ·实验试剂 | 第35页 |
| ·菌株和载体 | 第35页 |
| ·主要溶液及配制方法 | 第35页 |
| ·主要仪器 | 第35页 |
| ·实验方法 | 第35-39页 |
| ·技术路线 | 第35-36页 |
| ·引物设计 | 第36页 |
| ·Spacer-Linker克隆 | 第36-38页 |
| ·VL-T5te构建 | 第38页 |
| ·T7B-VHL克隆 | 第38-39页 |
| ·核糖体展示文库构建与分析 | 第39页 |
| ·结果 | 第39-46页 |
| ·Spacer-Linker扩增结果及分析 | 第39-41页 |
| ·VL-T5te构建结果 | 第41页 |
| ·T7B-VHL克隆结果 | 第41页 |
| ·RD文库构建 | 第41-43页 |
| ·RD文库分析 | 第43-46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| 第四章 利用核糖体展示技术筛选口蹄疫病毒单链抗体与结构预测 | 第48-60页 |
| ·实验材料 | 第48-49页 |
| ·实验试剂 | 第48页 |
| ·实验溶液及其配制方法 | 第48-49页 |
| ·主要仪器 | 第49页 |
| ·病毒抗原和乳鼠 | 第49页 |
| ·实验方法 | 第49-52页 |
| ·实验技术路线 | 第49-50页 |
| ·引物设计 | 第50页 |
| ·病毒抗原的灭活与纯化 | 第50页 |
| ·核糖体展示 | 第50-52页 |
| ·scFv结构预测 | 第52页 |
| ·结果 | 第52-57页 |
| ·病毒抗原制备与纯化 | 第52页 |
| ·体外转录 | 第52-54页 |
| ·体外翻译与亲和筛选 | 第54页 |
| ·蛋白水平鉴定 | 第54-55页 |
| ·序列分析 | 第55-56页 |
| ·scFv结构预测 | 第56-57页 |
| ·讨论 | 第57-60页 |
| 第五章 口蹄疫病毒单链抗体表达与鉴定 | 第60-73页 |
| ·实验材料 | 第60-61页 |
| ·主要试剂 | 第60页 |
| ·载体和宿主细胞 | 第60页 |
| ·主要实验仪器 | 第60页 |
| ·主要溶液及其配制方法 | 第60-61页 |
| ·实验方法 | 第61-64页 |
| ·引物设计 | 第61页 |
| ·scFv基因克隆 | 第61页 |
| ·PCR产物的回收与纯化 | 第61-62页 |
| ·回收产物与表达载体的酶切、连接与转化 | 第62页 |
| ·重组表达质粒的鉴定 | 第62-63页 |
| ·重组表达质粒的转化 | 第63页 |
| ·重组表达质粒的诱导表达及可溶性分析 | 第63-64页 |
| ·表达产物的Western blotting分析 | 第64页 |
| ·结果 | 第64-71页 |
| ·scFv克隆 | 第64页 |
| ·scFv和载体的酶切 | 第64页 |
| ·重组表达质粒的鉴定 | 第64-65页 |
| ·蛋白表达与可溶性分析 | 第65页 |
| ·表达蛋白的Western blotting分析 | 第65-71页 |
| ·讨论 | 第71-73页 |
| 第六章 全文结论 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 作者简历 | 第81页 |