| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-21页 |
| 1．1 纤维素结构 | 第9-10页 |
| 1．2 纤维素酶分类 | 第10-11页 |
| 1．3 纤维素酶分子的结构与空间构象 | 第11-14页 |
| 1．4 瑞氏木霉内切葡聚糖酶I的分子结构与性质 | 第14-15页 |
| 1．5 本文的工作重点及意义 | 第15-16页 |
| 1．6 噬菌体表面展示技术概述 | 第16-20页 |
| 1．7 本文工作内容 | 第20-21页 |
| 第二章 瑞氏木霉内切葡聚糖酶I(EGI)及其纤维素结合结构域(CBD)在丝状噬菌体表面展示系统中的展示 | 第21-43页 |
| 2．1 导言 | 第21页 |
| 2．2 材料与方法 | 第21-35页 |
| 2．2．1 材料 | 第21-23页 |
| 2．2．2 实验方法 | 第23-35页 |
| 2．3 结果与分析 | 第35-42页 |
| 2．3．1 瑞氏木霉内切葡聚糖酶I基因的克隆、在大肠杆菌 TGI中表达及噬菌体展示 | 第35-39页 |
| 2．3．1．1 质粒构建，转化子验证 | 第36-37页 |
| 2．3．1．2 ELISA测定吸附性 | 第37页 |
| 2．3．1．3 测定酶活 | 第37-39页 |
| 2．3．2 瑞氏木霉内切葡聚糖酶I吸附结构域CBD基因的克隆、在大肠杆菌TGI中表达及噬菌体展示 | 第39-42页 |
| 2．3．2．1 质粒构建，转化子验证 | 第39-41页 |
| 2．3．2．2 ELISA测定吸附性 | 第41-42页 |
| 2．4 本章小结 | 第42-43页 |
| 第三章 瑞氏木霉内切葡聚糖酶I(EGI)及其吸附结构域(CBD)在大肠杆菌HB2151中的诱导表达 | 第43-52页 |
| 3．1 导言 | 第43页 |
| 3．2 材料与方法 | 第43-46页 |
| 3．2．1 材料 | 第43-44页 |
| 3．2．2 实验方法 | 第44-46页 |
| 3．3 结果与讨论 | 第46-51页 |
| 3．3．1 转染子的验证 | 第47-48页 |
| 3．3．2 游离蛋白分泌位置的确定 | 第48-50页 |
| 3．3．3 CBD游离蛋白的纯化 | 第50-51页 |
| 3．4 本章小结 | 第51-52页 |
| 第四章 应用易错 PCR技术构建 CBD基因突变体菌种库 | 第52-71页 |
| 4．1 导言 | 第52-53页 |
| 4．2 构建点突变 | 第53-63页 |
| 4．2．1 材料与方法 | 第53-55页 |
| 4．2．2 实验方法 | 第55-60页 |
| 4．2．3 结果与分析 | 第60-63页 |
| 4．2．3．1 双链 DNA碱变性 | 第60-61页 |
| 4．2．3．2 BMH71-18mutS转化子的获得和验证 | 第61页 |
| 4．2．3．3 JM109转化子提取质粒 | 第61-62页 |
| 4．2．3．4 pCANTAB 5E-cbd突变子测序结果 | 第62-63页 |
| 4．3 易错 PCR构建cbd突变菌种库 | 第63-70页 |
| 4．3．1 GeneMorph Random Mutagenesis Kit介绍 | 第63-65页 |
| 4．3．2 材料与方法 | 第65-68页 |
| 4．3．3 结果与分析 | 第68-70页 |
| 4．3．3．1 易错 PCR | 第68页 |
| 4．3．3．2 优化制备电转化感受态细胞条件 | 第68-69页 |
| 4．3．3．3 优化连接效率 | 第69-70页 |
| 4．3．3．4 突变体菌种库 | 第70页 |
| 4．4 本章小结 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第77页 |
