摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
目录 | 第9-12页 |
英文缩略词 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-24页 |
·植物的耐盐机理 | 第13-15页 |
·植物解毒途径 | 第13-14页 |
·维持植物体内离子平衡和渗透调节平衡平衡 | 第14-15页 |
·影响植株的正常生长 | 第15页 |
·ERF 转录因子在植物胁迫应答中的作用及其研究进展 | 第15-19页 |
·AP2/ERF 家族的分类 | 第16页 |
·ERF 家族蛋白的序列结构和其功能 | 第16-17页 |
·ERF 类转录因子在植物抗逆功能上研究 | 第17-18页 |
·ERF 基因转录后修饰和蛋白间互作 | 第18-19页 |
·新基因挖掘主要的方法 | 第19-21页 |
·利用基因芯片的技术克隆目的基因 | 第19页 |
·基因文库技术分离目的基因 | 第19页 |
·根据材料 mRNA 的种类及其模板量分离目的基因 | 第19-20页 |
·根据 DNA 的插入产生的突变分离新基因 | 第20页 |
·利用图位克隆的方法精细定位目的基因 | 第20-21页 |
·用生物信息学方法筛选新基因 | 第21页 |
·检测基因表达模式的方法 | 第21-23页 |
·实时荧光定量 PCR | 第21-22页 |
·半定量 PCR | 第22页 |
·Northern 杂交 | 第22-23页 |
·目的和意义 | 第23-24页 |
第二章 材料与方法 | 第24-38页 |
·实验材料 | 第24-26页 |
·棉花材料 | 第24页 |
·实验菌株和载体 | 第24页 |
·实验中所用仪器 | 第24页 |
·实验中常用培养基和溶液配置 | 第24-26页 |
·实验方法 | 第26-38页 |
·材料的培育和处理 | 第26-27页 |
·棉花基因组 RNA 的提取 | 第27页 |
·RNA 纯化步骤: | 第27-28页 |
·RNA 反转录 | 第28页 |
·获得含有 AP2/ERF 结构域的 EST 序列 | 第28页 |
·荧光定量 PCR 反应体系 | 第28-29页 |
·陆地棉 TM-1 基因组 DNA 的提取 | 第29-30页 |
·引物设计 | 第30-31页 |
·GhERF36、GhERF56、GhERF79 基因 PCR | 第31页 |
·纯化回收 PCR 产物 | 第31页 |
·PCR 产物连接 pMD 18-T 载体 | 第31-32页 |
·制备大肠杆菌 DH5α感受态细胞 | 第32页 |
·克隆载体转化大肠杆菌 DH5α和蓝白斑筛选 | 第32-33页 |
·提取阳性克隆的质粒 | 第33页 |
·双酶切检测阳性克隆 | 第33页 |
·序列的分析和系统发育分析 | 第33-34页 |
·融合基因的克隆 | 第34页 |
·菌落 PCR 检测阳性克隆 | 第34-35页 |
·构建表达载体 | 第35-36页 |
·农杆菌感受态细胞的制备 | 第36页 |
·转化农杆菌感受态细胞 | 第36页 |
·亚细胞定位 | 第36页 |
·分析盐胁迫下三个基因在耐盐型和盐敏感型材料中的表达模式 | 第36页 |
·分析外源激素处理条件下三个基因在陆地棉 TM-1 中的表达模式 | 第36-38页 |
第三章 实验结果与分析 | 第38-48页 |
·基因的筛选 | 第38页 |
·基因克隆 | 第38-39页 |
·GhERF36、GhERF56、GhERF79 系统发育分析 | 第39-41页 |
·亚细胞定位 | 第41-42页 |
·盐胁迫下基因在耐盐材料和盐敏感材料中的表达模式 | 第42-43页 |
·外源激素处理下基因的表达模式 | 第43-48页 |
第四章 讨论 | 第48-50页 |
第五章 结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
作者简历 | 第59页 |