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陆地棉耐盐相关GhERF基因的克隆及分析

摘要第1-7页
Abstract第7-9页
目录第9-12页
英文缩略词第12-13页
第一章 文献综述第13-24页
   ·植物的耐盐机理第13-15页
     ·植物解毒途径第13-14页
     ·维持植物体内离子平衡和渗透调节平衡平衡第14-15页
     ·影响植株的正常生长第15页
   ·ERF 转录因子在植物胁迫应答中的作用及其研究进展第15-19页
     ·AP2/ERF 家族的分类第16页
     ·ERF 家族蛋白的序列结构和其功能第16-17页
     ·ERF 类转录因子在植物抗逆功能上研究第17-18页
     ·ERF 基因转录后修饰和蛋白间互作第18-19页
   ·新基因挖掘主要的方法第19-21页
     ·利用基因芯片的技术克隆目的基因第19页
     ·基因文库技术分离目的基因第19页
     ·根据材料 mRNA 的种类及其模板量分离目的基因第19-20页
     ·根据 DNA 的插入产生的突变分离新基因第20页
     ·利用图位克隆的方法精细定位目的基因第20-21页
     ·用生物信息学方法筛选新基因第21页
   ·检测基因表达模式的方法第21-23页
     ·实时荧光定量 PCR第21-22页
     ·半定量 PCR第22页
     ·Northern 杂交第22-23页
   ·目的和意义第23-24页
第二章 材料与方法第24-38页
   ·实验材料第24-26页
     ·棉花材料第24页
     ·实验菌株和载体第24页
     ·实验中所用仪器第24页
     ·实验中常用培养基和溶液配置第24-26页
   ·实验方法第26-38页
     ·材料的培育和处理第26-27页
     ·棉花基因组 RNA 的提取第27页
     ·RNA 纯化步骤:第27-28页
     ·RNA 反转录第28页
     ·获得含有 AP2/ERF 结构域的 EST 序列第28页
     ·荧光定量 PCR 反应体系第28-29页
     ·陆地棉 TM-1 基因组 DNA 的提取第29-30页
     ·引物设计第30-31页
     ·GhERF36、GhERF56、GhERF79 基因 PCR第31页
     ·纯化回收 PCR 产物第31页
     ·PCR 产物连接 pMD 18-T 载体第31-32页
     ·制备大肠杆菌 DH5α感受态细胞第32页
     ·克隆载体转化大肠杆菌 DH5α和蓝白斑筛选第32-33页
     ·提取阳性克隆的质粒第33页
     ·双酶切检测阳性克隆第33页
     ·序列的分析和系统发育分析第33-34页
     ·融合基因的克隆第34页
     ·菌落 PCR 检测阳性克隆第34-35页
     ·构建表达载体第35-36页
     ·农杆菌感受态细胞的制备第36页
     ·转化农杆菌感受态细胞第36页
     ·亚细胞定位第36页
     ·分析盐胁迫下三个基因在耐盐型和盐敏感型材料中的表达模式第36页
     ·分析外源激素处理条件下三个基因在陆地棉 TM-1 中的表达模式第36-38页
第三章 实验结果与分析第38-48页
   ·基因的筛选第38页
   ·基因克隆第38-39页
   ·GhERF36、GhERF56、GhERF79 系统发育分析第39-41页
   ·亚细胞定位第41-42页
   ·盐胁迫下基因在耐盐材料和盐敏感材料中的表达模式第42-43页
   ·外源激素处理下基因的表达模式第43-48页
第四章 讨论第48-50页
第五章 结论第50-51页
参考文献第51-58页
致谢第58-59页
作者简历第59页

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