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山羊精原细胞体外分离及培养分化与移植

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-11页
第一部分 文献综述第11-33页
 第一章 精原干细胞环境与精子发生第11-23页
   ·精原干细胞环境第11-17页
     ·精原干细胞大环境-睾丸第11-12页
     ·精原干细胞小环境-曲细精管及睾丸间质第12-15页
     ·精原干细胞微环境-血睾屏障憩室第15-17页
   ·精子发生第17-23页
     ·精原细胞发生第17-18页
     ·精母细胞减数分裂第18-19页
     ·精子形态发生第19-20页
     ·精子释放第20页
     ·精子发生效率第20-21页
     ·精子发生的内分泌调控第21-23页
 第二章 精原干细胞体外操作第23-33页
   ·精原干细胞移植第23-27页
     ·供体细胞分离与纯化第23-24页
     ·精原干细胞体外培养第24-26页
     ·精原干细胞移植第26-27页
     ·受体动物处理第27页
   ·精原干细胞介导转基因第27-33页
     ·精原干细胞转基因优势第27-28页
     ·精原干细胞体内转染法第28-29页
     ·精原干细胞体外转染移植法第29-31页
     ·展望第31-33页
第二部分 试验研究第33-52页
 第三章 山羊精原干细胞分离第33-39页
   ·材料与方法第33-34页
     ·材料第33页
       ·睾丸组织第33页
       ·主要试剂、溶液、仪器与耗材第33页
     ·方法第33-34页
       ·取材与曲细精管离散第33页
       ·生精上皮细胞的酶解分离第33-34页
       ·睾丸组织切片及碱性磷酸酶染色第34页
       ·细胞总数和细胞存活率第34页
       ·圆形细胞比率及细胞团块数第34页
       ·原代培养细胞贴壁率第34页
       ·体外培养细胞AKP 染色第34页
       ·显著性分析第34页
   ·结果与分析第34-37页
     ·睾丸显微结构及AKP 染色第34-35页
     ·组织及细胞离散情况比较第35页
     ·细胞总数比较第35页
     ·存活率比较第35页
     ·圆形细胞比率比较第35-36页
     ·细胞贴壁率比较第36页
     ·曲细精管细胞AKP 染色第36-37页
   ·讨论第37-39页
 第四章 山羊精原干细胞体外培养分化第39-45页
   ·材料与方法第39-40页
     ·材料第39页
       ·试验动物第39页
       ·主要试剂、溶液第39页
       ·主要仪器耗材第39页
     ·方法第39-40页
       ·取材第39页
       ·原代细胞分离培养第39页
       ·传代培养第39-40页
       ·饲养层的制备第40页
       ·分化培养第40页
       ·精原干细胞的鉴定第40页
   ·结果第40-44页
     ·曲细精管细胞分离效果第40页
     ·SSCs 与Sertoli细胞原代共培养第40-41页
     ·SSCs 的增殖与分化第41-43页
     ·曲细精管显微结构及AKP 染色第43-44页
   ·讨论第44-45页
 第五章 山羊精原干细胞移植第45-52页
   ·材料与方法第45-47页
     ·材料第45页
       ·试验动物第45页
       ·主要试剂、溶液第45页
       ·主要仪器耗材第45页
     ·方法第45-47页
       ·取材与细胞分离第45-46页
       ·细胞离体睾丸移植第46页
       ·细胞在体睾丸移植第46-47页
       ·移植效果检测第47页
   ·结果第47-50页
     ·睾丸输出管移植第47-48页
     ·睾丸网移植第48-50页
     ·在体睾丸网移植第50页
     ·不同年龄段受体移植效果第50页
   ·讨论第50-52页
结论第52-53页
进一步研究设想第53-54页
参考文献第54-61页
致谢第61-62页
作者简介第62页

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