| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-32页 |
| 1 香蕉束顶病毒(BBTV)及其引起的危害 | 第9-24页 |
| ·BBTV的分类地位及生物学特征 | 第9-10页 |
| ·香蕉束顶病的病理学特性 | 第10-12页 |
| ·BBTV侵染对香蕉内源激素的影响 | 第11页 |
| ·BBTV在感病植株中的运转 | 第11-12页 |
| ·BBTV的株系及寄主研究 | 第12-13页 |
| ·BBTV的株系分化 | 第12页 |
| ·BBTV的寄主范围及其在病害流行中的作用 | 第12-13页 |
| ·香蕉束顶病毒的分子生物学研究进展 | 第13-20页 |
| ·BBTV结构组分的研究 | 第14-17页 |
| ·BBTV的复制策略 | 第17-18页 |
| ·BBTV启动子的研究进展 | 第18-19页 |
| ·展望 | 第19-20页 |
| ·BBTV的检测技术 | 第20-24页 |
| ·PCR检测香蕉束顶病毒 | 第20-21页 |
| ·酶联免疫吸附测定技术 | 第21-23页 |
| ·应用Digoxigenin标记的cDNA探针检测香蕉束顶病毒 | 第23-24页 |
| 2 植物基因工程及其在抗病育种中的应用 | 第24-30页 |
| ·基因工程的发展历程 | 第24-25页 |
| ·原核表达体系的研究与应用 | 第25-28页 |
| ·概述 | 第25-26页 |
| ·PET表达系统 | 第26-28页 |
| ·抗病毒育种的研究进展 | 第28-30页 |
| ·蛋白质介导的抗性 | 第28-29页 |
| ·RNA介导的抗性 | 第29-30页 |
| 3 本研究的立题依据 | 第30-32页 |
| ·目的意义 | 第30页 |
| ·研究内容 | 第30-31页 |
| ·本研究的技术路线 | 第31-32页 |
| 第二章 BBTV六个组分全序列的克隆与序列分析 | 第32-48页 |
| 1 材料与试剂 | 第32页 |
| ·植物材料 | 第32页 |
| ·菌种与质粒 | 第32页 |
| ·试剂 | 第32页 |
| 2 方法 | 第32-39页 |
| ·感病香蕉植株总DNA的提取 | 第32-33页 |
| ·引物设计 | 第33-34页 |
| ·PCR扩增反应 | 第34-35页 |
| ·PCR产物的回收 | 第35页 |
| ·pGEM-T-EASY VECTOR与PCR产物的连接 | 第35-36页 |
| ·连接产物的转化 | 第36-37页 |
| ·感受态细胞(E.coli DH5α)的制备 | 第36页 |
| ·转化 | 第36-37页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第37-39页 |
| ·重组质粒DNA的小量制备 | 第37-38页 |
| ·酶切鉴定 | 第38页 |
| ·重组质粒的序列测定 | 第38页 |
| ·测序结果的分析 | 第38-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-48页 |
| ·DNA1组分的克隆与序列分析 | 第39-40页 |
| ·DNA2组分的克隆与序列分析 | 第40-41页 |
| ·DNA3组分的克隆与序列分析 | 第41-43页 |
| ·DNA4组分的克隆与序列分析 | 第43-44页 |
| ·DNA5组分的克隆与序列分析 | 第44-45页 |
| ·DNA6组分的克隆与序列分析 | 第45-46页 |
| ·六个组分的共有区序列的分析 | 第46-48页 |
| 第三章 BBTV-CP基因的表达与分析 | 第48-61页 |
| 1 材料与试剂 | 第48页 |
| ·材料 | 第48页 |
| ·菌种与质粒 | 第48页 |
| ·试剂 | 第48页 |
| 2 方法 | 第48-54页 |
| ·CP基因的引物设计 | 第48-49页 |
| ·CP基因的克隆 | 第49页 |
| ·pTEC酶切及CP基因的回收 | 第49-50页 |
| ·pET载体酶切及大片段回收 | 第50页 |
| ·连接反应 | 第50-51页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第51页 |
| ·重组质粒DNA的大量制备及纯化 | 第51-52页 |
| ·重组质粒转化宿主菌 | 第52页 |
| ·BBTV-CP基因的表达 | 第52-53页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第53-54页 |
| ·考马斯亮蓝染色和脱色 | 第54页 |
| 3 结果与分析 | 第54-61页 |
| ·BBTV-CP基因的克隆 | 第54-55页 |
| ·重组载体PET-22B-CP和PET-30A-CP的酶切鉴定 | 第55-57页 |
| ·重组表达载体PET-22B-CP和PET-30A-CP的序列分析 | 第57-59页 |
| ·基因表达产物分析 | 第59-60页 |
| ·表达含量的测定 | 第60-61页 |
| 第四章 讨论 | 第61-66页 |
| 1 BBTV株系鉴定的研究 | 第61-62页 |
| 2 DNA序列CR-M区段的分析 | 第62页 |
| 3 DNA2编码区的推测 | 第62-63页 |
| 4 外源基因表达的影响因素 | 第63-66页 |
| ·表达载体 | 第63-64页 |
| ·宿主菌 | 第64-65页 |
| ·抗生素的影响 | 第65-66页 |
| 结论 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-75页 |
| 附录 | 第75-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
