茶叶中β-葡萄糖苷酶基因cDNA克隆与序列分析
| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-7页 |
| 引言 | 第7-15页 |
| 1 β-葡萄糖苷酶的研究意义 | 第7-8页 |
| 2 β-葡萄糖苷酶的研究进展 | 第8-11页 |
| 3 β-葡萄糖苷酶与茶叶醇系香气 | 第11-12页 |
| ·醇系香气前体 | 第11页 |
| ·β-葡萄糖苷酶对香气的贡献 | 第11-12页 |
| 4 β-葡萄糖苷酶与茶树病虫害 | 第12-13页 |
| 5 研究内容与技术路线 | 第13-15页 |
| ·研究内容 | 第13-14页 |
| ·技术路线 | 第14-15页 |
| 材料与方法 | 第15-29页 |
| 1 材料 | 第15页 |
| 2 仪器与试剂 | 第15-16页 |
| ·主要仪器设备 | 第15页 |
| ·主要试剂 | 第15-16页 |
| 3 方法 | 第16-29页 |
| ·RNA提取和检测 | 第16-17页 |
| ·总RNA的提取 | 第16页 |
| ·RNA的检测 | 第16-17页 |
| ·RT-PCR反应 | 第17-19页 |
| ·简并引物设计与合成 | 第17-18页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第18页 |
| ·PCR反应 | 第18-19页 |
| ·RT-PCR产物的克隆及测序 | 第19-23页 |
| ·PCR产物纯化 | 第19页 |
| ·PCR产物和T-载体的连接 | 第19-20页 |
| ·重组质粒的转化与筛选 | 第20-21页 |
| ·质粒DNA的小量制备 | 第21-22页 |
| ·PCR产物的酶切检测 | 第22页 |
| ·DNA序列的测定 | 第22-23页 |
| ·β-葡萄糖苷酶cDNA的3’／5’RACE反应 | 第23-27页 |
| ·cDNA的5’RACE反应 | 第25-26页 |
| ·cDNA的3’RACE反应 | 第26-27页 |
| ·β-葡萄糖苷酶cDNA基因序列的扩增 | 第27-28页 |
| ·全长序列的引物设计 | 第27页 |
| ·基因序列的扩增 | 第27-28页 |
| ·序列分析和蛋白预测 | 第28-29页 |
| 结果与分析 | 第29-43页 |
| 1 总RNA的提取 | 第29页 |
| 2 RT-PCR扩增及其产物的克隆与分析 | 第29-31页 |
| ·RT-PCR扩增 | 第29-30页 |
| ·特异性片段的连接、转化和酶切鉴定 | 第30-31页 |
| ·RT-PCR产物的测序 | 第31页 |
| 3 3’／5’RACE扩增 | 第31-35页 |
| ·3’RACE扩增 | 第31-33页 |
| ·5’RACE扩增 | 第33-35页 |
| 4 β-glucosidase基因全长序列的扩增 | 第35-40页 |
| 5 Glc基因序列及其蛋白质生物信息学分析 | 第40-43页 |
| ·Glc基因cDNA全序列分析 | 第40页 |
| ·预测蛋白的特征分析 | 第40-42页 |
| ·Glc基因系统进化树分析 | 第42-43页 |
| 讨论 | 第43-48页 |
| 结论 | 第48-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 作者简介 | 第59-62页 |
