| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-23页 |
| ·CRISPR系统的发现 | 第11-15页 |
| ·CRISPR系统研究进展 | 第15-16页 |
| ·原核生物中的CRISPR系统简述 | 第16-18页 |
| ·结核病的现状 | 第18-19页 |
| ·结核病病原体-结核分枝杆菌 | 第19-21页 |
| ·本研究的实验方案 | 第21页 |
| ·本研究的意义和目的 | 第21-23页 |
| 第二章 重组蛋白的构建与纯化 | 第23-38页 |
| ·材料 | 第23-25页 |
| ·菌株 | 第23页 |
| ·培养基 | 第23页 |
| ·试剂 | 第23-24页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳用溶液及缓冲液 | 第24页 |
| ·SDS-PAGE电泳用溶液及缓冲液 | 第24页 |
| ·实验仪器 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-33页 |
| ·目的基因的扩增 | 第25-31页 |
| ·表达载体的构建 | 第31-32页 |
| ·感受态细胞的转化 | 第32-33页 |
| ·蛋白质的表达与纯化 | 第33页 |
| ·蛋白质的纯度与分析 | 第33页 |
| ·蛋白质的浓度测定 | 第33页 |
| ·结果与分析 | 第33-37页 |
| ·Rv2816基因的克隆和表达纯化 | 第33-34页 |
| ·Rv2817基因的克隆和表达纯化 | 第34-35页 |
| ·Rv2824基因的克隆和表达纯化 | 第35-37页 |
| ·结论 | 第37-38页 |
| 第三章 Cas6蛋白在的切割作用 | 第38-47页 |
| ·Cas6蛋白研究现状 | 第38-39页 |
| ·实验材料 | 第39-40页 |
| ·试剂 | 第39页 |
| ·缓冲液 | 第39-40页 |
| ·实验仪器 | 第40页 |
| ·实验方法 | 第40-44页 |
| ·底物切割实验 | 第40-43页 |
| ·RNA电泳 | 第43页 |
| ·凝胶迁移 | 第43-44页 |
| ·Northern印迹法检测 | 第44页 |
| ·结果与分析 | 第44-46页 |
| ·Cas6蛋白对CRISPR repeat RNA切割活性实验 | 第44-45页 |
| ·Cas6蛋白对CRISPR spacer RNA切割活性实验 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46-47页 |
| 第四章 结论与展望 | 第47-49页 |
| ·实验结论 | 第47页 |
| ·展望 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-52页 |
| 附录 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第54页 |