人乳铁蛋白基因克隆、表达及转基因动物制备
| 摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-14页 |
| 一 研究背景 | 第11-12页 |
| 二 选题依据及目的意义 | 第12-13页 |
| 三 实验技术路线 | 第13-14页 |
| 第二章 文献综述 | 第14-52页 |
| 一 乳铁蛋白研究现状 | 第14-25页 |
| (一) 分布及含量 | 第14-16页 |
| (二) 结构及特性 | 第16-19页 |
| (三) 乳铁蛋白的代谢 | 第19-20页 |
| (四) 生物学功能 | 第20-23页 |
| (五) 乳铁蛋白基因 | 第23-24页 |
| (六) 重组人乳铁蛋白 | 第24页 |
| (七) 应用展望 | 第24-25页 |
| 二 乳腺生物反应器研究进展 | 第25-32页 |
| (一) 乳腺生物反应器优势及存在的问题 | 第25-26页 |
| (二) 乳腺生物反应器的表达构件 | 第26-29页 |
| (三) 乳腺生物反应器研究状况 | 第29-32页 |
| 三 转基因动物研究 | 第32-41页 |
| (一) 转基因动物开发价值比较 | 第32页 |
| (二) 转基因动物制备方法 | 第32-38页 |
| (三) 外源基因载体 | 第38-41页 |
| 四 转基因动物研究中存在的问题 | 第41-44页 |
| 参考文献 | 第44-52页 |
| 第三章 人乳铁蛋白基因克隆及载体构建 | 第52-72页 |
| 一 材料与试剂 | 第52页 |
| 二 实验方法 | 第52-56页 |
| 1 山羊β-乳球蛋白基因5′端调控序列的克隆 | 第52-53页 |
| 2 人乳铁蛋白cDNA克隆 | 第53-55页 |
| 3 载体构建 | 第55-56页 |
| 三 结果与分析 | 第56-69页 |
| 四 讨论 | 第69-70页 |
| 五 小结 | 第70页 |
| 参考文献 | 第70-72页 |
| 第四章 人乳铁蛋白cDNA的细胞表达 | 第72-91页 |
| 一 材料及试剂 | 第72-73页 |
| 二 实验方法 | 第73-78页 |
| 1 G418细胞毒性的检测 | 第73页 |
| 2 激素诱导条件的选择 | 第73-74页 |
| 3 细胞转染及筛选 | 第74-75页 |
| 4 转染细胞的PCR检测 | 第75页 |
| 5 转染细胞的固定化培养 | 第75-76页 |
| 6 转染细胞诱导表达及样品处理 | 第76页 |
| 7 诱导产物检测 | 第76-77页 |
| 8 重组人乳铁蛋白分析 | 第77-78页 |
| 三 结果与分析 | 第78-86页 |
| 四 讨论 | 第86-89页 |
| 五 小结 | 第89页 |
| 参考文献 | 第89-91页 |
| 第五章 转人乳铁蛋白基因小鼠制备及外源基因表达 | 第91-102页 |
| 一 材料及主要试剂 | 第92页 |
| 二 实验方法 | 第92-94页 |
| 1 质粒注入 | 第92页 |
| 2 子鼠PCR检测 | 第92-93页 |
| 3 子鼠Southern检测 | 第93-94页 |
| 4 乳汁Dot-ELISA检测 | 第94页 |
| 5 乳汁Western blotting检测 | 第94页 |
| 6 ELISA法测定乳汁中重组蛋白含量 | 第94页 |
| 三 结果与分析 | 第94-98页 |
| 四 讨论 | 第98-100页 |
| 五 小结 | 第100页 |
| 参考文献 | 第100-102页 |
| 第六章 转基因兔及羊的制备 | 第102-123页 |
| 一 材料及主要试剂 | 第103页 |
| 二 实验方法 | 第103-106页 |
| 1 睾丸组织注射法 | 第103-105页 |
| 2 输精管内成熟精子转染法 | 第105-106页 |
| 三 结果与分析 | 第106-115页 |
| 四 讨论 | 第115-119页 |
| 五 小结 | 第119-120页 |
| 参考文献 | 第120-123页 |
| 第七章 结论与展望 | 第123-126页 |
| 一 主要结论 | 第123-124页 |
| 二 本论文的创新之处 | 第124-125页 |
| 三 有待于进一步开展的工作 | 第125页 |
| 四 展望 | 第125-126页 |
| 缩略语 | 第126-128页 |
| 附录 | 第128-130页 |
| 完成的论文 | 第130-131页 |
| 个人简历 | 第131-132页 |
| 致谢 | 第132-134页 |
