第一章 引言 | 第1-56页 |
第一节 病原菌致病机制 | 第12-45页 |
1.1 宿主-寄生生物关系 | 第12-13页 |
1.2 细菌毒力的定义及其鉴定 | 第13-16页 |
1.3 细菌病致病机制 | 第16-45页 |
1.3.1 病原菌在存储宿主中停留 | 第18页 |
1.3.2 转移至宿主 | 第18页 |
1.3.3 病原菌的附着与定居 | 第18-22页 |
1.3.4 侵袭 | 第22-24页 |
1.3.5 病原菌生存策略 | 第24-26页 |
1.3.6 病原菌逃避或对抗宿主防御的机制 | 第26-33页 |
1.3.7 病原离开宿主 | 第33-34页 |
1.3.8 致病菌毒素 | 第34-38页 |
1.3.9 病原菌毒力因子的调控 | 第38-41页 |
1.3.10 细菌毒力的体内遗传分析 | 第41-45页 |
第二节 水产动物弧菌病 | 第45-47页 |
第三节 鳗弧菌致病机理 | 第47-56页 |
3.1 流行病学 | 第47页 |
3.2 血清型和分类 | 第47-48页 |
3.3 致病性作用与毒力决定因子 | 第48-56页 |
3.3.1 鞭毛 | 第48-49页 |
3.3.2 外膜蛋白 | 第49-50页 |
3.3.3 铁摄取机制 | 第50-51页 |
3.3.4 黏附和侵袭宿主 | 第51-52页 |
3.3.5 内毒素 | 第52页 |
3.3.6 胞外酶 | 第52-53页 |
3.3.7 溶血素 | 第53-54页 |
3.3.8 密度感应系统 | 第54-56页 |
第二章 鳗弧菌主要致病因子的确定 | 第56-69页 |
1 材料和方法 | 第56-59页 |
2 结果 | 第59-66页 |
2.1 LPS的毒性 | 第59-60页 |
2.2 ECP的特性 | 第60页 |
2.3 胞外产物(ECP)的毒性 | 第60页 |
2.4 主要致病因子的分离纯化与毒性鉴定 | 第60-63页 |
2.5 纯化毒素的半数致死量 | 第63页 |
2.6 毒素蛋白的性质 | 第63-66页 |
3 讨论 | 第66-69页 |
第三章 鳗弧菌金属蛋白酶基因的克隆和突变株的构建 | 第69-90页 |
第一节 金属蛋白酶的基因克隆 | 第69-74页 |
1 材料和方法 | 第70-71页 |
2 结果与讨论 | 第71-74页 |
2.1 金属蛋白酶N端部分氨基酸序列的测定 | 第71页 |
2.2 金属蛋白酶基因序列 | 第71-74页 |
第二节 鳗弧菌金属蛋白酶基因突变株的构建 | 第74-90页 |
1 材料和方法 | 第77-83页 |
2 结果 | 第83-88页 |
2.1 金属蛋白酶基因同源片段的PCR扩增结果 | 第83页 |
2.2 PCR产物的T载体克隆结果 | 第83-84页 |
2.3 重组质粒T-PCR以及pNQ705质粒的大量提取和酶切纯化 | 第84页 |
2.4 自杀重组质粒pLV5的构建 | 第84-85页 |
2.5 M3接合子构建 | 第85-86页 |
2.6 鳗弧菌蛋白酶基因突变株MC-1的初步表型鉴定 | 第86-88页 |
3 讨论 | 第88-90页 |
第四章 鳗弧菌M3及其金属蛋白酶单克隆抗体的制备 | 第90-110页 |
第一节 鳗弧菌M3生长条件及其对金属蛋白酶产量影响的研究 | 第90-98页 |
1 材料和方法 | 第90-91页 |
2 结果 | 第91-96页 |
2.1 鳗弧菌M3在2216E培养基中的生长曲线及其胞外产物中金属蛋白酶活力曲线 | 第91-92页 |
2.2 NaCl浓度、pH值及温度对M3生长及产酶条件影响的响应面分析 | 第92-94页 |
2.3 培养基中不同氮源对菌体生长及蛋白酶产量的影响 | 第94-95页 |
2.4 不同蛋白胨浓度对菌体生长及蛋白酶产量的影响 | 第95页 |
2.5 不同碳源物质对菌体生长及蛋白酶产量的影响 | 第95-96页 |
3 讨论 | 第96-98页 |
第二节 鳗弧菌M3单克隆抗体的制备 | 第98-106页 |
1 材料和方法 | 第99-103页 |
2 结果 | 第103-105页 |
2.1 单抗的获得 | 第103页 |
2.2 鳗弧菌单克隆抗体性质研究 | 第103-105页 |
3 讨论 | 第105-106页 |
第三节 鳗弧菌金属蛋白酶单克隆抗体的制备及鉴定 | 第106-110页 |
1 材料和方法 | 第106-107页 |
2 结果 | 第107-108页 |
2.1 金属蛋白酶的制备 | 第107-108页 |
2.2 金属蛋白酶单抗细胞株的建立 | 第108页 |
2.3 蛋白质印迹图谱 | 第108页 |
2.4 蛋白酶活性抑制实验 | 第108页 |
2.5 单克隆抗体的免疫球蛋白亚型 | 第108页 |
3 讨论 | 第108-110页 |
结论 | 第110-112页 |
参考文献 | 第112-134页 |
附录1:缩略语表 | 第134-135页 |
附录2:各种培养基和溶液 | 第135-138页 |
发表文章 | 第138-139页 |
致谢 | 第139页 |