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鳗弧菌主要致病因子的研究

第一章 引言第1-56页
 第一节 病原菌致病机制第12-45页
  1.1 宿主-寄生生物关系第12-13页
  1.2 细菌毒力的定义及其鉴定第13-16页
  1.3 细菌病致病机制第16-45页
   1.3.1 病原菌在存储宿主中停留第18页
   1.3.2 转移至宿主第18页
   1.3.3 病原菌的附着与定居第18-22页
   1.3.4 侵袭第22-24页
   1.3.5 病原菌生存策略第24-26页
   1.3.6 病原菌逃避或对抗宿主防御的机制第26-33页
   1.3.7 病原离开宿主第33-34页
   1.3.8 致病菌毒素第34-38页
   1.3.9 病原菌毒力因子的调控第38-41页
   1.3.10 细菌毒力的体内遗传分析第41-45页
 第二节 水产动物弧菌病第45-47页
 第三节 鳗弧菌致病机理第47-56页
  3.1 流行病学第47页
  3.2 血清型和分类第47-48页
  3.3 致病性作用与毒力决定因子第48-56页
   3.3.1 鞭毛第48-49页
   3.3.2 外膜蛋白第49-50页
   3.3.3 铁摄取机制第50-51页
   3.3.4 黏附和侵袭宿主第51-52页
   3.3.5 内毒素第52页
   3.3.6 胞外酶第52-53页
   3.3.7 溶血素第53-54页
   3.3.8 密度感应系统第54-56页
第二章 鳗弧菌主要致病因子的确定第56-69页
 1 材料和方法第56-59页
 2 结果第59-66页
  2.1 LPS的毒性第59-60页
  2.2 ECP的特性第60页
  2.3 胞外产物(ECP)的毒性第60页
  2.4 主要致病因子的分离纯化与毒性鉴定第60-63页
  2.5 纯化毒素的半数致死量第63页
  2.6 毒素蛋白的性质第63-66页
 3 讨论第66-69页
第三章 鳗弧菌金属蛋白酶基因的克隆和突变株的构建第69-90页
 第一节 金属蛋白酶的基因克隆第69-74页
  1 材料和方法第70-71页
  2 结果与讨论第71-74页
   2.1 金属蛋白酶N端部分氨基酸序列的测定第71页
   2.2 金属蛋白酶基因序列第71-74页
 第二节 鳗弧菌金属蛋白酶基因突变株的构建第74-90页
  1 材料和方法第77-83页
  2 结果第83-88页
   2.1 金属蛋白酶基因同源片段的PCR扩增结果第83页
   2.2 PCR产物的T载体克隆结果第83-84页
   2.3 重组质粒T-PCR以及pNQ705质粒的大量提取和酶切纯化第84页
   2.4 自杀重组质粒pLV5的构建第84-85页
   2.5 M3接合子构建第85-86页
   2.6 鳗弧菌蛋白酶基因突变株MC-1的初步表型鉴定第86-88页
  3 讨论第88-90页
第四章 鳗弧菌M3及其金属蛋白酶单克隆抗体的制备第90-110页
 第一节 鳗弧菌M3生长条件及其对金属蛋白酶产量影响的研究第90-98页
  1 材料和方法第90-91页
  2 结果第91-96页
   2.1 鳗弧菌M3在2216E培养基中的生长曲线及其胞外产物中金属蛋白酶活力曲线第91-92页
   2.2 NaCl浓度、pH值及温度对M3生长及产酶条件影响的响应面分析第92-94页
   2.3 培养基中不同氮源对菌体生长及蛋白酶产量的影响第94-95页
   2.4 不同蛋白胨浓度对菌体生长及蛋白酶产量的影响第95页
   2.5 不同碳源物质对菌体生长及蛋白酶产量的影响第95-96页
  3 讨论第96-98页
 第二节 鳗弧菌M3单克隆抗体的制备第98-106页
  1 材料和方法第99-103页
  2 结果第103-105页
   2.1 单抗的获得第103页
   2.2 鳗弧菌单克隆抗体性质研究第103-105页
  3 讨论第105-106页
 第三节 鳗弧菌金属蛋白酶单克隆抗体的制备及鉴定第106-110页
  1 材料和方法第106-107页
  2 结果第107-108页
   2.1 金属蛋白酶的制备第107-108页
   2.2 金属蛋白酶单抗细胞株的建立第108页
   2.3 蛋白质印迹图谱第108页
   2.4 蛋白酶活性抑制实验第108页
   2.5 单克隆抗体的免疫球蛋白亚型第108页
  3 讨论第108-110页
结论第110-112页
参考文献第112-134页
附录1:缩略语表第134-135页
附录2:各种培养基和溶液第135-138页
发表文章第138-139页
致谢第139页

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