| 图片目录 | 第1-12页 |
| 表格目录 | 第12-13页 |
| 中文摘要 | 第13-16页 |
| 英文摘要 | 第16-19页 |
| 第一章 盐藻超微结构的观察及渗透调节力的测定 | 第19-30页 |
| 摘要 | 第19页 |
| 关键词 | 第19页 |
| 引言 | 第19-20页 |
| 1 材料和方法 | 第20-21页 |
| ·材料 | 第20页 |
| ·盐藻(D.salina) | 第20页 |
| ·盐藻液体培养基 | 第20页 |
| ·主要仪器 | 第20页 |
| ·方法 | 第20-21页 |
| ·盐藻的培养 | 第20页 |
| ·扫描电镜观察 | 第20页 |
| ·透射电镜观察 | 第20-21页 |
| ·盐藻的渗透震动 | 第21页 |
| ·倒置显微镜观察 | 第21页 |
| 2 结果 | 第21-27页 |
| ·盐藻的超微结构 | 第21-22页 |
| ·高盐震动下盐藻细胞结构的变化 | 第22-25页 |
| ·盐藻在不同盐浓度下的生长状态 | 第25-26页 |
| ·盐藻在渗透震动下的形态变化 | 第26-27页 |
| 3 讨论 | 第27-29页 |
| 参考文献 | 第29-30页 |
| 第二章 盐生杜氏藻烯醇酶基因的克隆 | 第30-49页 |
| 摘要 | 第30页 |
| 关键词 | 第30页 |
| 引言 | 第30-31页 |
| 1 材料与方法 | 第31-37页 |
| ·材料 | 第31页 |
| ·实验用藻种、工程菌和克隆载体 | 第31页 |
| ·实验用试剂盒、工具酶和其它试剂 | 第31页 |
| ·引物合成和测序 | 第31页 |
| ·方法 | 第31-37页 |
| ·盐生杜氏藻培养 | 第31页 |
| ·杜氏盐藻总RNA的提取 | 第31-32页 |
| ·杜氏盐藻总RNA质量分析 | 第32页 |
| ·盐生杜氏藻烯醇酶基因部分cDNA片段的克隆 | 第32-33页 |
| ·盐藻烯醇酶基因全长cDNA克隆的原理及流程图 | 第33-34页 |
| ·3'RACE | 第34-36页 |
| ·5'-RACE | 第36-37页 |
| ·烯醇酶基因全长cDNA的拼接及克隆 | 第37页 |
| 2 结果 | 第37-41页 |
| ·盐生杜氏藻总RNA的质量分析 | 第37-38页 |
| ·简并PCR引物的设计 | 第38-39页 |
| ·盐生杜氏藻烯醇酶基因部分cDNA片段的克隆 | 第39页 |
| ·盐生杜氏藻烯醇酶基因全长cDNA的获得 | 第39-41页 |
| 3 讨论 | 第41-46页 |
| ·盐生杜氏藻总RNA提取的改进 | 第41页 |
| ·简并引物设计的的改 | 第41-42页 |
| ·RACE技术的局限性及改进与优化 | 第42-45页 |
| ·RACE在植物基因克隆上的技术优势、应用现状及其发展前景 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-49页 |
| 第三章 烯醇酶基因的序列分析 | 第49-66页 |
| 摘要 | 第49页 |
| 关键词 | 第49页 |
| 引言 | 第49页 |
| 1 方法 | 第49-50页 |
| ·序列相似性比对 | 第49-50页 |
| ·序列读框分析 | 第50页 |
| ·蛋白质性质分析 | 第50页 |
| ·蛋白质一级结构分析 | 第50页 |
| ·蛋白质保守结构域分析(RPS-BLAST) | 第50页 |
| ·BLOCKs分析 | 第50页 |
| ·蛋白质低复杂度分析 | 第50页 |
| ·蛋白质高级结构预测 | 第50页 |
| ·盐藻烯醇酶基因的进化地位分析 | 第50页 |
| 2 结果与讨论 | 第50-65页 |
| ·BLASTn | 第50-52页 |
| ·序列读框分析 | 第52页 |
| ·序列BLASTx比对结果 | 第52-53页 |
| ·最长读框蛋白质性质分析 | 第53-55页 |
| ·蛋白质一级结构分析 | 第55-59页 |
| ·蛋白质保守结构域分析(RPS-BLAST) | 第55-57页 |
| ·BLOCKs分析 | 第57-59页 |
| ·蛋白质低复杂度分析 | 第59页 |
| ·蛋白质二级结构预测 | 第59-60页 |
| ·蛋白质三级结构预测 | 第60-61页 |
| ·盐藻烯醇酶基因序列分析及进化地位分析 | 第61-65页 |
| 3 小结 | 第65-66页 |
| 第四章 渗透震动下盐藻烯醇酶基因的差异表达 | 第66-76页 |
| 摘要 | 第66页 |
| 关键词 | 第66页 |
| 引言 | 第66-67页 |
| 1 材料和方法 | 第67-69页 |
| ·材料 | 第67页 |
| ·实验用藻种 | 第67页 |
| ·实验用试剂盒、工具酶和其它试剂 | 第67页 |
| ·引物合成 | 第67页 |
| ·方法 | 第67-69页 |
| ·盐生杜氏藻的低渗、高渗震动培养 | 第67页 |
| ·盐生杜氏藻总RNA的提取 | 第67-68页 |
| ·非变性凝胶电泳和总RNA的质量检测 | 第68页 |
| ·cDNA的合成 | 第68-69页 |
| ·RT-PCR | 第69页 |
| ·循环参数确定 | 第69页 |
| ·差异表达的测定 | 第69页 |
| 2 结果 | 第69-72页 |
| ·总RNA的提取 | 第69-70页 |
| ·内标基因的选择及循环参数的确定 | 第70-71页 |
| ·渗透震动下烯醇酶基因的差异表达 | 第71-72页 |
| 3 讨论 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-76页 |
| 第五章 盐藻烯醇酶基因表达载体的构建及其根癌农杆菌转化 | 第76-84页 |
| 摘要 | 第76页 |
| 关键词 | 第76页 |
| 引言 | 第76-77页 |
| 1 材料与方法 | 第77-80页 |
| ·材料 | 第77页 |
| ·菌株和质粒 | 第77页 |
| ·酶与试剂盒 | 第77页 |
| ·引物及测序 | 第77页 |
| ·试剂 | 第77页 |
| ·方法 | 第77-80页 |
| ·载体pCAMBIA2301G的构建 | 第77-78页 |
| ·载体pCAMBIA2301G-DSG10的构建 | 第78-79页 |
| ·大肠杆菌CaCl_2法感受态细胞的制备及转化 | 第79页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第79页 |
| ·用PCR方法检测连接子 | 第79-80页 |
| 2 结果与分析 | 第80-82页 |
| ·载体pCAMBIA2301G的构建 | 第80-81页 |
| ·载体pCAMBIA2301G-enolase的构建 | 第81页 |
| ·根癌农杆菌的转化 | 第81-82页 |
| 3 讨论 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-84页 |
| 第六章 烯醇酶基因转化烟草及植株再生 | 第84-92页 |
| 摘要 | 第84页 |
| 关键词 | 第84页 |
| 引言 | 第84-85页 |
| 1 材料和方法 | 第85-87页 |
| ·材料 | 第85-86页 |
| ·根癌农杆菌菌株 | 第85页 |
| ·植物材料 | 第85页 |
| ·培养基 | 第85-86页 |
| ·方法 | 第86-87页 |
| ·农杆菌的培养 | 第86页 |
| ·叶盘法转化烟草 | 第86页 |
| ·诱导丛生芽 | 第86页 |
| ·诱导生根 | 第86-87页 |
| ·无菌苗的继代培养 | 第87页 |
| ·再生植株的移栽 | 第87页 |
| 2 结果 | 第87-89页 |
| ·叶盘法转化烟草 | 第87页 |
| ·诱导丛生芽 | 第87-88页 |
| ·诱导生根 | 第88-89页 |
| ·移栽 | 第89页 |
| 3 讨论 | 第89-91页 |
| ·农杆菌的培养 | 第89页 |
| ·叶盘法转化烟草 | 第89-90页 |
| ·诱导丛生芽 | 第90页 |
| ·诱导生根 | 第90页 |
| ·移栽 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-92页 |
| 第七章 转基因烟草的鉴定 | 第92-110页 |
| 摘要 | 第92页 |
| 关键词 | 第92页 |
| 引言 | 第92页 |
| 1 材料与方法 | 第92-101页 |
| ·材料 | 第92-95页 |
| ·植物材料 | 第92-93页 |
| ·酶与试剂盒 | 第93页 |
| ·试剂 | 第93-95页 |
| ·方法 | 第95-101页 |
| ·CTAB法小量抽提植物总DNA | 第95页 |
| ·CTAB法大量抽提植物总DNA | 第95-96页 |
| ·转基因烟草的PCR检测 | 第96-97页 |
| ·烟草RNA的提取及检测 | 第97页 |
| ·Southern杂交 | 第97-99页 |
| ·Northren杂交 | 第99-101页 |
| 2 结果 | 第101-107页 |
| ·PCR检测 | 第101-102页 |
| ·Southern杂交 | 第102-105页 |
| ·总DNA质量 | 第102页 |
| ·总DNA酶切、电泳及浓缩 | 第102-103页 |
| ·探针标记 | 第103-104页 |
| ·Southern杂交结果 | 第104-105页 |
| ·Northren杂交结果 | 第105-106页 |
| ·转基因烟草的耐盐功能鉴定 | 第106-107页 |
| 3 讨论 | 第107-109页 |
| ·PCR检测 | 第107页 |
| ·DNA样品的制备 | 第107页 |
| ·电泳、转膜和固定 | 第107-108页 |
| ·预杂交和杂交 | 第108页 |
| ·关于探针制备 | 第108-109页 |
| 参考文献 | 第109-110页 |
| 文献综述 | 第110-145页 |
| 第一节 植物的盐胁迫 | 第111-114页 |
| 一、 盐胁迫对光能吸收和转换的影响 | 第111页 |
| 二、 盐胁迫对电子传递的影响 | 第111-112页 |
| 三、 盐胁迫对光合碳同化的影响 | 第112-113页 |
| 四、 盐胁迫与其它环境胁迫因子的协同影响 | 第113-114页 |
| 第二节 植物盐适应的生理机制 | 第114-121页 |
| 一、 离子平衡 | 第115-117页 |
| 二、 渗透压平衡 | 第117-120页 |
| 三、 氧化还原状态的平衡 | 第120页 |
| 四、 水分平衡 | 第120-121页 |
| 第三节 盐胁迫诱导的信号传导途径 | 第121-126页 |
| 一、 依赖于植物激素ABA(abscisicacid)的信号传导途径 | 第121-123页 |
| 二、 DREB途径 | 第123-125页 |
| 三、 SOS途径 | 第125-126页 |
| 四、 蛋白激酶途径 | 第126页 |
| 第四节 盐藻的耐盐性研究 | 第126-134页 |
| 一、 概述 | 第126-128页 |
| 二、 盐藻渗透调节机理的研究 | 第128-134页 |
| 1 盐藻对不同浓度的盐离子的适应是由胞内甘油的代谢来实现的 | 第128-129页 |
| 2 渗透压调节中甘油的代谢与培养基中的离子无关 | 第129-130页 |
| 3 渗透震动下甘油的代谢途径 | 第130-132页 |
| 4 渗透调节的启动 | 第132-133页 |
| 5 盐藻中盐诱导差异表达蛋白的研究 | 第133-134页 |
| 第五节 耐盐植物研究的方法及展望 | 第134-138页 |
| 一、 关于耐盐性研究的模式生物 | 第134-135页 |
| 二、 耐盐植物的研究方法及展望 | 第135-138页 |
| 1 ) 基因工程方法 | 第135页 |
| 2 ) 基因组学方法 | 第135-138页 |
| 参考文献 | 第138-145页 |
| 致谢 | 第145-146页 |
| 在校期间发表文章情况 | 第146-147页 |
| 声明 | 第147页 |
