| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-9页 |
| 前言 | 第9-12页 |
| 第一部分：重组腺病毒Ad-Asmyc、Ad-P53对体外培养的人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞生长及增殖的影响 | 第12-30页 |
| 实验目的 | 第12页 |
| 技术路线 | 第12页 |
| 实验材料 | 第12-14页 |
| 实验方法 | 第14-19页 |
| 一、重组体腺病毒的构建、扩增和滴度测定 | 第14-15页 |
| 1、重组体腺病毒的构建 | 第14页 |
| 2、重组体腺病毒扩增、纯化、保存 | 第14-15页 |
| 3、病毒滴度测定 | 第15页 |
| 二、腺病毒对滑膜细胞的体外感染 | 第15-16页 |
| 1、原代滑膜细胞培养 | 第15页 |
| 2、病毒体外感染细胞 | 第15页 |
| 3、测定腺病毒对滑膜细胞的感染率 | 第15-16页 |
| 三、腺病毒介导的反义C-MYC、P53基因对体外培养的人RA滑膜细胞生长及增殖的影响 | 第16-19页 |
| 1、原代滑膜细胞培养 | 第16页 |
| 2、MTT(四氮唑蓝比色法)检测细胞活性 | 第16页 |
| 3、流式细胞仪对细胞周期及凋亡的分析 | 第16页 |
| 4、Hoechst 33258荧光染色法 | 第16页 |
| 5、凋亡细胞的DNA缺口末端标记(TUNEL)检测 | 第16-17页 |
| 6、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析P53、C-MYCmRNA的表达 | 第17-18页 |
| 7、免疫组化检测P53、C-MYC蛋白的表达 | 第18-19页 |
| 实验结果 | 第19-30页 |
| 一、重组腺病毒的扩增滴度 | 第19页 |
| 二、腺病毒对滑膜成纤维细胞的转导效率 | 第19页 |
| 三、腺病毒重组体Ad-LacZ对RA患者和兔滑膜成纤维细胞生长及增殖的影响 | 第19-21页 |
| 四、腺病毒介导的P53促进RA滑膜成纤维细胞表达P53 | 第21-23页 |
| 五、腺病毒介导的反义C-MYC抑制滑膜成纤维细胞表达C-MYC | 第23-25页 |
| 六、腺病毒介导的P53和反义C-MYC抑制滑膜细胞生长并诱导其凋亡 | 第25-30页 |
| 第二部分：人白介素-1β(hIL-1β)诱导的兔膝关节炎模型的建立 | 第30-38页 |
| 实验目的 | 第30-31页 |
| 实验材料 | 第31页 |
| 实验方法 | 第31-34页 |
| 1、MFG-hIL-1β-neo-HIG-82细胞系培养 | 第31页 |
| 2、兔原代成纤维细胞培养 | 第31-32页 |
| 3、RT-PCR检测滑膜细胞hIL-1β mRNA的表达情况 | 第32页 |
| 4、复制兔膝关节炎模型 | 第32-33页 |
| 5、滑膜组织病理学分析 | 第33页 |
| 6、关节炎评分 | 第33页 |
| 7、ELISA检测hIL-1β蛋白的表达 | 第33-34页 |
| 实验结果 | 第34-38页 |
| 1、hIL-1β mRNA和蛋白在离体基因转移过程中的表达 | 第34-35页 |
| 2、hIL-1β局部基因转移对兔全身和关节局部的影响 | 第35-38页 |
| 第三部分：腺病毒介导的反义C-MYC、P53基因治疗兔膝关节炎模型的实验研究 | 第38-48页 |
| 实验目的 | 第38页 |
| 技术路线 | 第38-39页 |
| 实验方法 | 第39-41页 |
| 一、腺病毒介导的反义C-MYC、P53基因对体外培养的兔膝关节滑膜成纤维细胞生长及增殖的影响 | 第39页 |
| 二、X-gal染色检测腺病毒对滑膜组织的体内转染 | 第39页 |
| 三、腺病毒介导的反义C-MYC、P53基因治疗兔膝关节炎模型的体内实验 | 第39-41页 |
| 1、复制兔膝关节炎模型 | 第39页 |
| 2、分组 | 第39页 |
| 3、检测治疗效果 | 第39-40页 |
| 4、TUNEL法检测滑膜组织细胞凋亡 | 第40页 |
| 5、RT-PCR检测滑膜组织C-MYC、P53 mRNA表达 | 第40页 |
| 6、免疫组化染色 | 第40-41页 |
| 实验结果 | 第41-48页 |
| 一、腺病毒介导的反义C-MYC、P53基因明显抑制体外培养的兔滑膜成纤维细胞生长 | 第41页 |
| 二、腺病毒对滑膜组织的体内转染情况 | 第41-42页 |
| 三、腺病毒介导的反义C-MYC、P53基因对兔膝关节炎模型的治疗作用 | 第42-48页 |
| 讨论 | 第48-60页 |
| 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-65页 |
| 文献综述 | 第65-76页 |
| 英文名词及缩写 | 第76-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
