中文摘要 | 第1-6页 |
目录 | 第6-10页 |
文献综述 | 第10页 |
1 杨树抗虫基因工程研究进展 | 第10-19页 |
1.1 已克隆的抗虫基因类型 | 第10-12页 |
1.1.1 苏云金杆菌晶体蛋白(或内毒素)基因Bt | 第10-11页 |
1.1.2 蛋白酶抑制剂基因PI | 第11页 |
1.1.3 外源凝集素基因 | 第11页 |
1.1.4 昆虫毒素基因 | 第11页 |
1.1.5 其它类型的抗虫基因 | 第11-12页 |
1.2 遗传转化技术 | 第12-13页 |
1.2.1 农杆菌介导法 | 第12页 |
1.2.2 PEG法 | 第12页 |
1.2.3 基因枪法 | 第12-13页 |
1.3 转基因植株的分子生物学检测 | 第13页 |
1.3.1 ELISA酶标记免疫吸附测定法 | 第13页 |
1.3.2 Southern blotting(DNA印迹法) | 第13页 |
1.3.3 Western吸印法 | 第13页 |
1.4 转基因植株的抗虫性生物测定 | 第13-14页 |
1.5 抗虫转基因杨树研究进展 | 第14-15页 |
1.6 问题与展望 | 第15-18页 |
1.6.1 最佳外植体再生体系的建立 | 第15页 |
1.6.2 遗传转化技术中存在的问题 | 第15-16页 |
1.6.3 昆虫对转基因植物产生抗性的问题 | 第16-18页 |
1.6.3.1 “高剂量/避难所”策略 | 第16页 |
1.6.3.2 基因策略 | 第16-17页 |
1.6.3.3 基因启动子及基因表达策略 | 第17-18页 |
引言 | 第18-19页 |
2 转双价抗虫基因741毛白杨的抗虫性生物测定 | 第19-40页 |
2.1 几种测试昆虫简介 | 第19-21页 |
2.1.1 杨扇舟蛾(Clostera anachoreta(Fabricius) | 第19页 |
2.1.2 美国白蛾(Hyphantria cunea(Drury)) | 第19-20页 |
2.1.3 舞毒蛾(Lymantria dispar(Linnaeus)) | 第20页 |
2.1.4 杨小舟蛾(Micromelalopha troglodyta(Graeser) | 第20-21页 |
2.1.5 古毒蛾(Orgyia antiqua(Linnaeus)) | 第21页 |
2.2 材料与方法 | 第21-23页 |
2.2.1 材料 | 第22页 |
2.2.1.1 植物材料 | 第22页 |
2.2.1.2 测试昆虫 | 第22页 |
2.2.2 方法 | 第22-23页 |
2.2.2.1 群体饲虫试验 | 第22-23页 |
2.2.2.2 单体饲虫试验 | 第23页 |
2.2.2.3 计算方法 | 第23页 |
2.3 结果与分析 | 第23-38页 |
2.3.1 转基因无性系抗虫性评价 | 第23-31页 |
2.3.1.1 转基因无性系抗虫性分级 | 第23-25页 |
2.3.1.2 高抗和中抗无性系毒杀昆虫的比较 | 第25-29页 |
2.3.1.3 各无性系抗虫性与气温的关系 | 第29-31页 |
2.3.1.4 1998—2000年昆虫总死亡率的比较 | 第31页 |
2.3.2 转基因无性系对昆虫生长发育的影响 | 第31-37页 |
2.3.2.1 昆虫的蜕皮指数 | 第31页 |
2.3.2.2 各发育龄期历期及各龄期发育速率 | 第31-36页 |
2.3.2.3 昆虫体重增长速率及蛹重 | 第36-37页 |
2.3.3 无菌试管苗与室外移栽苗的抗虫性 | 第37页 |
2.3.4 饲虫试验方法探讨 | 第37-38页 |
2.3.4.1 田间群体饲虫试验方法 | 第37页 |
2.3.4.2 美国白蛾的测试方法 | 第37-38页 |
2.3.4.3 饲虫试验中应注意的问题 | 第38页 |
2.4 结论与讨论 | 第38-40页 |
3 转基因741毛白杨对桑天牛的抗性鉴定 | 第40-47页 |
3.1 材料与方法 | 第40-41页 |
3.1.1 试验材料 | 第40-41页 |
3.1.1.1 植物材料 | 第40-41页 |
3.1.1.2 供试昆虫 | 第41页 |
3.1.1.3 试验地点 | 第41页 |
3.1.2 试验方法 | 第41页 |
3.1.2.1 树上套笼接虫方法 | 第41页 |
3.1.2.2 调查内容和方法 | 第41页 |
3.2 结果与分析 | 第41-45页 |
3.2.1 1999年树上套笼接桑天牛试验 | 第41-44页 |
3.2.2 2000年树上套笼接桑天牛试验 | 第44-45页 |
3.2.2.1 各无性系对桑天牛卵孵化率的影响 | 第44页 |
3.2.2.2 各无性系抗天牛特性的聚类分析 | 第44页 |
3.2.2.3 各无性系中幼虫蛀虫道长度比较 | 第44-45页 |
3.3 结论与讨论 | 第45-47页 |
4 青杨再生体系的建立 | 第47-52页 |
4.1 材料与方法 | 第47-48页 |
4.1.1 材料 | 第47页 |
4.1.2 方法 | 第47-48页 |
4.1.2.1 最适外植体及诱导再生培养基的筛选 | 第47页 |
4.1.2.2 芽的增殖培养 | 第47页 |
4.1.2.3 嫩茎生根培养 | 第47页 |
4.1.2.4 培养条件及所用培养基 | 第47-48页 |
4.2 结果与分析 | 第48-51页 |
4.2.1 最适外植体的筛选 | 第48页 |
4.2.2 叶片诱导体胚或不定芽再生的适宜培养基 | 第48-50页 |
4.2.3 芽的增殖培养基 | 第50-51页 |
4.2.4 嫩茎生根培养基 | 第51页 |
4.3 结论 | 第51-52页 |
5 青杨双价抗虫基因转化的研究 | 第52-57页 |
5.1 材料与方法 | 第52页 |
5.1.1 菌种与质粒 | 第52页 |
5.1.2 植物材料 | 第52页 |
5.1.3 农杆菌培养 | 第52页 |
5.1.4 双价抗虫基因转化 | 第52页 |
5.1.5 转化芽的获得 | 第52页 |
5.1.6 转化再生嫩茎生根 | 第52页 |
5.2 结果与分析 | 第52-56页 |
5.2.1 卡那霉素(Km)对青杨分化的影响 | 第52-54页 |
5.2.2 不同凝固剂对诱导不定芽的影响 | 第54页 |
5.2.3 预培养时间 | 第54页 |
5.2.4 选择压力对诱导分化的影响 | 第54-55页 |
5.2.5 光培养和暗培养 | 第55页 |
5.2.6 转化植株的获得 | 第55-56页 |
5.3 结论 | 第56-57页 |
6 主要结论 | 第57-59页 |
参考文献 | 第59-65页 |
附录 | 第65-66页 |
英文摘要 | 第66-69页 |
致谢 | 第69页 |