| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1 绪论 | 第12-28页 |
| ·燃料乙醇的研究背景 | 第12-16页 |
| ·燃料乙醇生产的概况 | 第12-15页 |
| ·自然界中纤维素生物质及其利用 | 第15-16页 |
| ·自然界发酵产乙醇的微生物 | 第16-18页 |
| ·微生物的木糖代谢 | 第18-24页 |
| ·微生物的木糖代谢途径 | 第18-21页 |
| ·利用木糖酿酒酵母代谢工程 | 第21-23页 |
| ·发酵木糖产乙醇的其它工程菌 | 第23-24页 |
| ·木糖还原酶与木糖醇脱氢酶 | 第24-27页 |
| ·木糖还原酶的结构 | 第24-25页 |
| ·木糖醇脱氢酶的结构 | 第25-27页 |
| ·本研究的目的和主要内容 | 第27-28页 |
| 2 发酵甘蔗渣糖化液产乙醇酵母菌株的筛选 | 第28-39页 |
| ·材料与方法 | 第28-31页 |
| ·实验材料 | 第28页 |
| ·主要仪器 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-31页 |
| ·甘蔗渣糖化 | 第29页 |
| ·酵母菌株分离 | 第29页 |
| ·酵母菌株初筛与复筛 | 第29-30页 |
| ·生长曲线测定 | 第30页 |
| ·菌株鉴定 | 第30页 |
| ·还原糖含量测定 | 第30页 |
| ·乙醇含量测定 | 第30-31页 |
| ·结果与分析 | 第31-37页 |
| ·产乙醇菌株的筛选 | 第31-34页 |
| ·利用甘蔗渣糖化液发酵条件分析 | 第34-36页 |
| ·温度对发酵产乙醇的影响 | 第34页 |
| ·氮源对发酵产乙醇的影响 | 第34-35页 |
| ·起始pH值对发酵产乙醇的影响 | 第35页 |
| ·影响菌株发酵产乙醇的其它因素 | 第35-36页 |
| ·发酵条件优化 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37-39页 |
| 3 木糖代谢关键酶基因克隆与表达 | 第39-62页 |
| ·材料与方法 | 第39-53页 |
| ·实验材料 | 第39-41页 |
| ·菌种与质粒 | 第39页 |
| ·引物 | 第39页 |
| ·主要试剂 | 第39-40页 |
| ·常用培养基 | 第40-41页 |
| ·常用溶液 | 第41页 |
| ·主要仪器 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-53页 |
| ·热带假丝酵母(C.tropicalis)总DNA提取 | 第41-42页 |
| ·C.tropicalis木糖还原酶基因克隆 | 第42-44页 |
| ·PCR扩增目的片段 | 第42-43页 |
| ·T-A克隆及克隆子筛选 | 第43-44页 |
| ·C.tropicalis木糖醇脱氢酶基因克隆 | 第44-46页 |
| ·PCR扩增目的片段 | 第44-45页 |
| ·T-A克隆及克隆子筛选 | 第45-46页 |
| ·质粒构建 | 第46-50页 |
| ·质粒pPIC3.5K-xyl1构建 | 第46-48页 |
| ·质粒pPIC3.5K-xyl1-xyl2构建 | 第48-50页 |
| ·质粒pPIC3.5K-xyl1-xyl2电转化 | 第50-52页 |
| ·GS115感受态细胞制备 | 第50-51页 |
| ·转化及转化子筛选 | 第51-52页 |
| ·重组蛋白表达 | 第52-53页 |
| ·甲醇诱导重组蛋白表达 | 第52页 |
| ·重组蛋白酶活测定 | 第52-53页 |
| ·结果与分析 | 第53-61页 |
| ·C.tropicalis木糖还原酶基因与木糖醇脱氢酶基因克隆 | 第53-55页 |
| ·质粒pPIC3.5K-xyl1构建 | 第55-56页 |
| ·质粒pPIC3.5K-xyl1-xyl2构建 | 第56-57页 |
| ·重组质粒转化 | 第57-58页 |
| ·重组蛋白酶活性测定与分析 | 第58-61页 |
| ·讨论 | 第61-62页 |
| 结论与展望 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-69页 |
| 致谢 | 第69页 |