| 致谢 | 第1-4页 |
| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 前言 | 第8-10页 |
| 1.课题研究的背景及意义 | 第8-9页 |
| 2.工作假说和研究内容 | 第9页 |
| 3.本论文的主要创新点 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-23页 |
| ·草菇概况 | 第10-12页 |
| ·草菇的分类地位 | 第10页 |
| ·草菇栽培的起源与发展 | 第10-11页 |
| ·草菇菌丝生长发育的条件 | 第11页 |
| ·草菇的生殖和生活史 | 第11页 |
| ·草菇的营养与药用价值 | 第11-12页 |
| ·纤维素酶 | 第12-15页 |
| ·纤维素酶的组成和性质 | 第12页 |
| ·产生纤维素酶的微生物 | 第12-13页 |
| ·纤维素酶的作用机制 | 第13-14页 |
| ·纤维素酶的应用 | 第14-15页 |
| ·葡聚糖内切酶 | 第15-17页 |
| ·纤维素酶合成的调控 | 第17-20页 |
| ·组成型的纤维素酶 | 第17页 |
| ·酶的诱导调控 | 第17-19页 |
| ·分解代谢物阻遏 | 第19-20页 |
| ·纤维素酶表达的检测方法 | 第20-23页 |
| ·酶活测定 | 第20页 |
| ·Western blotting | 第20-22页 |
| ·半定量RT-PCR | 第22-23页 |
| 第二章 重组葡聚糖内切酶的纯化及其一级抗体的制备 | 第23-37页 |
| ·材料 | 第23-25页 |
| ·菌种 | 第23页 |
| ·实验药品 | 第23页 |
| ·实验试剂 | 第23-24页 |
| ·仪器 | 第24页 |
| ·培养基 | 第24-25页 |
| ·方法 | 第25-30页 |
| ·葡聚糖内切酶活力的测定 | 第25页 |
| ·蛋白质含量的测定 | 第25-26页 |
| ·重组葡聚糖内切酶的表达 | 第26页 |
| ·重组葡聚糖内切酶的纯化 | 第26-27页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第27-29页 |
| ·葡聚糖内切酶一级抗体的纯化 | 第29-30页 |
| ·结果与分析 | 第30-35页 |
| ·葡聚糖内切酶酶活标准曲线的制作 | 第30-31页 |
| ·蛋白质含量测定标准曲线的制作 | 第31页 |
| ·重组葡聚糖内切酶的培养、分离和纯化 | 第31-34页 |
| ·亲和层析柱纯化一级抗体 | 第34-35页 |
| ·讨论 | 第35-36页 |
| ·小结 | 第36-37页 |
| 第三章 WESTERN BLOTTING 技术检测草菇胞外葡聚糖内切酶EG1 的诱导表达 | 第37-55页 |
| ·材料 | 第37-39页 |
| ·供试菌株 | 第37页 |
| ·实验药品 | 第37页 |
| ·实验器材 | 第37-38页 |
| ·培养基 | 第38-39页 |
| ·方法 | 第39-44页 |
| ·草菇诱导产酶培养 | 第39-42页 |
| ·Western blotting | 第42-44页 |
| ·结果与分析 | 第44-51页 |
| ·不同碳源对草菇EG1 的诱导 | 第44-45页 |
| ·微晶纤维素对草菇EG1 的诱导 | 第45页 |
| ·天然稻草培养对草菇EG1 的诱导 | 第45-46页 |
| ·α-乳糖对草菇EG1 的诱导 | 第46-47页 |
| ·纤维二糖对草菇EG1 的诱导 | 第47-49页 |
| ·山梨糖对草菇EG1 的诱导 | 第49页 |
| ·α-乳糖与山梨糖对草菇EG1 的诱导 | 第49-50页 |
| ·α-乳糖与纤维二糖对草菇EG1 的诱导 | 第50页 |
| ·纤维二糖与山梨糖对草菇EG1 的诱导 | 第50-51页 |
| ·讨论 | 第51-53页 |
| ·小结 | 第53-55页 |
| 第四章 半定量RT-PCR 技术分析葡聚糖内切酶EG1 的MRNA 转录水平 | 第55-65页 |
| ·材料 | 第55-56页 |
| ·菌丝 | 第55页 |
| ·药品与试剂 | 第55页 |
| ·实验仪器 | 第55-56页 |
| ·方法 | 第56-59页 |
| ·总RNA 提取方法 | 第56-57页 |
| ·cDNA 合成 | 第57页 |
| ·引物的设计 | 第57-58页 |
| ·PCR 扩增循环次数的确定 | 第58页 |
| ·内标基因(gpd)和目的基因(e91)的定量扩增 | 第58-59页 |
| ·结果与分析 | 第59-63页 |
| ·α-乳糖诱导下不同时间草菇菌丝总RNA 提取结果 | 第59页 |
| ·PCR 扩增循环次数的确定 | 第59-61页 |
| ·gpd 基因和e91 基因在最佳循环数条件下的PCR 扩增 | 第61-63页 |
| ·讨论 | 第63-64页 |
| ·小结 | 第64-65页 |
| 总结 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-71页 |
| 详细摘要 | 第71-74页 |
