| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-8页 |
| 第一部分 研究背景 | 第8-28页 |
| 一、人p16~(INK4a) 基因及其转录调控机制的研究进展 | 第8-13页 |
| (一) 细胞周期调控的分子机制 | 第8-9页 |
| (二) 人p16~(INK4a) 基因的概述 | 第9-12页 |
| (三) 人p16~(INK4a) 基因的转录调控 | 第12-13页 |
| 二、转录因子 ZBP-89、YY1 的研究进展 | 第13-15页 |
| (一) 转录因子ZBP-89 概述 | 第13页 |
| (二) 转录因子YY1 概述 | 第13-15页 |
| 三、组蛋白乙酰化修饰与真核生物基因的转录调控 | 第15-25页 |
| (一) 真核生物的染色质结构与转录调控的关系 | 第15页 |
| (二) 组蛋白乙酰化修饰与转录调控 | 第15-16页 |
| (三) 蛋白乙酰化修饰酶 | 第16-18页 |
| (四) 组蛋白去乙酰化酶 | 第18-25页 |
| 四、本论文研究的内容和意义 | 第25-28页 |
| (一) 立题依据 | 第25-26页 |
| (二) 本文的研究内容和意义 | 第26-28页 |
| 第二部分 实验材料与方法 | 第28-44页 |
| 一、实验材料 | 第28-29页 |
| (一) 质粒 | 第28页 |
| (二) 报告基因质粒的构建 | 第28页 |
| (三) 蛋白和抗体 | 第28页 |
| (四) 哺乳动物细胞系 | 第28-29页 |
| (五) 试剂 | 第29页 |
| 二、实验方法 | 第29-44页 |
| I. 分子生物学试验方法 | 第29-37页 |
| (一) 分子克隆 | 第29页 |
| (二) DNA的琼脂糖电泳 | 第29页 |
| (三) 质粒大量制备的方法 | 第29-31页 |
| (四) 哺乳动物细胞总RNA的提取和反转录 | 第31-32页 |
| (五) 逆转录 | 第32-33页 |
| (六) PCR | 第33-34页 |
| (七) 染色质免疫沉淀实验 | 第34-36页 |
| (八) RNA干涉(RNAi) | 第36-37页 |
| II. 细胞生物学实验方法 | 第37-42页 |
| (一) 哺乳动物细胞系的培养 | 第37页 |
| (二) 真核生物细胞的瞬时转染和荧光素酶报告基因检测 | 第37-38页 |
| (三) ROCHE 罗氏转染 | 第38页 |
| (四) 蛋白质的Western Blotting 分析 | 第38-41页 |
| (五) 免疫共沉淀实验 | 第41-42页 |
| (六) 免疫荧光染色 | 第42页 |
| (七) 衰老相关的半乳糖苷酶活性检测 | 第42页 |
| III. 统计分析 | 第42-44页 |
| 第三部分 实验结果与分析 | 第44-55页 |
| 一、ZBP-89 影响NCI-H460 细胞衰老 | 第44-45页 |
| 二、ZBP-89通过抑制p161NK4a基因表达影响细胞的衰老 | 第45-46页 |
| 三、HDAC3 和 HDAC4 通过下调p16 来抑制细胞的衰老 | 第46-48页 |
| 四、HDAC3 和 HDAC4 结合在p16 启动子上介导组蛋白的低乙酰化 | 第48-49页 |
| 五、HDAC3 被ZBP-89 招募至p16 启动子上 | 第49-50页 |
| 六、转录因子 YY1 通过抑制 p16 表达影响细胞衰老 | 第50-52页 |
| 七、蛋白因子 ZBP-89, YY1, HDAC3 和 HDAC4 间的相互作用 | 第52-55页 |
| 第四部分 讨论 | 第55-57页 |
| 主要结论和创新点 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 附录 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 在学期间公开发表论文及著作情况 | 第67页 |
