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八肋游仆虫Rab家族基因的多样性及一种非典型Rab蛋白的功能分析

目录第1-7页
CONTENTS第7-8页
摘要第8-10页
ABSTRACT第10-12页
英文缩略语表第12-14页
第一章 文献综述第14-32页
 1 Rab蛋白的结构特点、多样性与功能第14-23页
   ·Rab的发现第14-15页
   ·Rab的结构特点第15-17页
   ·Rab的多样性与进化第17-19页
   ·Rab循环第19-20页
   ·Rab的细胞定位与生理功能第20-23页
 2 原生生物中的Rab及本课题的意义第23-27页
   ·八肋游仆虫及其遗传学特点第23-24页
   ·原生生物中的Rab第24-26页
   ·实验室的已有工作及本课题的意义第26-27页
 3 参考文献第27-32页
第二章 八肋游仆虫11种EoRab基因的克隆第32-44页
 1 材料第32-33页
   ·实验生物、菌株及质粒第32页
   ·试剂和工具酶第32-33页
   ·主要试剂的配制第33页
 2 方法第33-38页
   ·纤毛虫细胞培养第33-34页
   ·细菌细胞培养第34页
   ·八肋游仆虫大核DNA的制备第34页
   ·EoRab基因5′端序列文库的构建第34页
   ·EoRab基因全序列的克隆第34-36页
   ·EoRab基因片段文库的构建及EoRab基因全序列克隆的相关操作第36-38页
 3 结果第38-40页
   ·11个EoRab基因的获得第38页
   ·11个EoRab基因的鉴定与系统命名第38-39页
   ·游仆虫中Rab基因的多样性第39-40页
 4 讨论第40-41页
 5 参考文献第41-44页
第三章 八肋游仆虫EoRab43基因的序列及进化分析第44-52页
 1 材料第44页
 2 方法第44-45页
   ·EoRab43基因的克隆第44页
   ·EoRab43基因全序列的获得第44页
   ·EoRab43的序列分析及同源比对第44-45页
 3 结果第45-47页
   ·EoRab43基因的克隆与鉴定第45页
   ·EoRab43基因核苷酸序列的分析第45-46页
   ·EoRab43基因拟编码蛋白的分析第46-47页
 4 讨论第47-50页
 5 参考文献第50-52页
第四章 EoRab43蛋白C端的表达及纯化第52-60页
 1 材料第52-54页
   ·菌株和质粒第52页
   ·试剂和工具酶第52-53页
   ·主要试剂的配制第53-54页
 2 方法第54-57页
   ·EoRab43基因3′端153bp序列(EoRab43_(153bp))的克隆第54页
   ·重组表达质粒pGEX-6p-1-EoRab43_(153bp)的构建第54-57页
 3 结果第57-59页
   ·EoRab43基因3′端153bp序列的克隆第57页
   ·重组表达质粒pGEX-6p-1-EoRab43_(153bp)的构建第57-58页
   ·蛋白GST-EoRab43_(50aa)的表达与纯化第58页
   ·融合蛋白GST-EoRab43_(50aa)的Western blotting分析第58-59页
 4 讨论第59页
 5 参考文献第59-60页
第五章 EoRab43多克隆抗体的制备及其细胞定位分析第60-69页
 1 材料第60-61页
   ·实验动物及小型器具第60页
   ·主要生化试剂第60页
   ·主要试剂的配制第60-61页
 2 方法第61-64页
   ·抗原的制备第61页
   ·小鼠免疫第61-62页
   ·ELISA检测抗体效价第62页
   ·八肋游仆虫总蛋白提取第62-63页
   ·八肋游仆虫蛋白提取物的免疫印迹第63页
   ·免疫荧光定位第63-64页
 3 结果第64-67页
   ·抗体制备及滴度测定第64-65页
   ·抗体的特异性检测第65页
   ·EoRab43的免疫荧光定位第65-67页
 4 讨论第67-68页
 5 参考文献第68-69页
小结与展望第69-71页
 本文完成的工作第69-70页
 本课题的展望第70-71页
附录1 主要仪器设备第71-72页
附录2 个人简介及硕士期间科研成果第72-74页
致谢第74-75页

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