目录 | 第1-7页 |
CONTENTS | 第7-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
英文缩略语表 | 第12-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-32页 |
1 Rab蛋白的结构特点、多样性与功能 | 第14-23页 |
·Rab的发现 | 第14-15页 |
·Rab的结构特点 | 第15-17页 |
·Rab的多样性与进化 | 第17-19页 |
·Rab循环 | 第19-20页 |
·Rab的细胞定位与生理功能 | 第20-23页 |
2 原生生物中的Rab及本课题的意义 | 第23-27页 |
·八肋游仆虫及其遗传学特点 | 第23-24页 |
·原生生物中的Rab | 第24-26页 |
·实验室的已有工作及本课题的意义 | 第26-27页 |
3 参考文献 | 第27-32页 |
第二章 八肋游仆虫11种EoRab基因的克隆 | 第32-44页 |
1 材料 | 第32-33页 |
·实验生物、菌株及质粒 | 第32页 |
·试剂和工具酶 | 第32-33页 |
·主要试剂的配制 | 第33页 |
2 方法 | 第33-38页 |
·纤毛虫细胞培养 | 第33-34页 |
·细菌细胞培养 | 第34页 |
·八肋游仆虫大核DNA的制备 | 第34页 |
·EoRab基因5′端序列文库的构建 | 第34页 |
·EoRab基因全序列的克隆 | 第34-36页 |
·EoRab基因片段文库的构建及EoRab基因全序列克隆的相关操作 | 第36-38页 |
3 结果 | 第38-40页 |
·11个EoRab基因的获得 | 第38页 |
·11个EoRab基因的鉴定与系统命名 | 第38-39页 |
·游仆虫中Rab基因的多样性 | 第39-40页 |
4 讨论 | 第40-41页 |
5 参考文献 | 第41-44页 |
第三章 八肋游仆虫EoRab43基因的序列及进化分析 | 第44-52页 |
1 材料 | 第44页 |
2 方法 | 第44-45页 |
·EoRab43基因的克隆 | 第44页 |
·EoRab43基因全序列的获得 | 第44页 |
·EoRab43的序列分析及同源比对 | 第44-45页 |
3 结果 | 第45-47页 |
·EoRab43基因的克隆与鉴定 | 第45页 |
·EoRab43基因核苷酸序列的分析 | 第45-46页 |
·EoRab43基因拟编码蛋白的分析 | 第46-47页 |
4 讨论 | 第47-50页 |
5 参考文献 | 第50-52页 |
第四章 EoRab43蛋白C端的表达及纯化 | 第52-60页 |
1 材料 | 第52-54页 |
·菌株和质粒 | 第52页 |
·试剂和工具酶 | 第52-53页 |
·主要试剂的配制 | 第53-54页 |
2 方法 | 第54-57页 |
·EoRab43基因3′端153bp序列(EoRab43_(153bp))的克隆 | 第54页 |
·重组表达质粒pGEX-6p-1-EoRab43_(153bp)的构建 | 第54-57页 |
3 结果 | 第57-59页 |
·EoRab43基因3′端153bp序列的克隆 | 第57页 |
·重组表达质粒pGEX-6p-1-EoRab43_(153bp)的构建 | 第57-58页 |
·蛋白GST-EoRab43_(50aa)的表达与纯化 | 第58页 |
·融合蛋白GST-EoRab43_(50aa)的Western blotting分析 | 第58-59页 |
4 讨论 | 第59页 |
5 参考文献 | 第59-60页 |
第五章 EoRab43多克隆抗体的制备及其细胞定位分析 | 第60-69页 |
1 材料 | 第60-61页 |
·实验动物及小型器具 | 第60页 |
·主要生化试剂 | 第60页 |
·主要试剂的配制 | 第60-61页 |
2 方法 | 第61-64页 |
·抗原的制备 | 第61页 |
·小鼠免疫 | 第61-62页 |
·ELISA检测抗体效价 | 第62页 |
·八肋游仆虫总蛋白提取 | 第62-63页 |
·八肋游仆虫蛋白提取物的免疫印迹 | 第63页 |
·免疫荧光定位 | 第63-64页 |
3 结果 | 第64-67页 |
·抗体制备及滴度测定 | 第64-65页 |
·抗体的特异性检测 | 第65页 |
·EoRab43的免疫荧光定位 | 第65-67页 |
4 讨论 | 第67-68页 |
5 参考文献 | 第68-69页 |
小结与展望 | 第69-71页 |
本文完成的工作 | 第69-70页 |
本课题的展望 | 第70-71页 |
附录1 主要仪器设备 | 第71-72页 |
附录2 个人简介及硕士期间科研成果 | 第72-74页 |
致谢 | 第74-75页 |