| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-15页 |
| 英文缩略词表 | 第15-17页 |
| 第一章 前言 | 第17-21页 |
| 第二章 背景回顾 | 第21-36页 |
| ·基因治疗的研究进展 | 第21-27页 |
| ·基因治疗的策略和实现途径 | 第21-24页 |
| ·基因治疗的应用现状 | 第24-26页 |
| ·肾癌基因治疗的候选基因 | 第26-27页 |
| ·抑癌基因VHL的研究进展 | 第27-36页 |
| 第三章 TAT-6xHis-VHLβ结构域肾癌抑制融合肽cDNA的克隆及序列分析 | 第36-50页 |
| ·材料和方法 | 第36-45页 |
| ·结果 | 第45-50页 |
| ·PCR扩增结果 | 第45-46页 |
| ·重组质粒pGEM-T/TAT-6×His-VHLβ的构建和鉴定 | 第46-47页 |
| ·克隆基因TAT-6×His-VHLβ序列分析 | 第47-50页 |
| 第四章 融合基因NT4-TAT-6×His-VHLβ的克隆和序列分析 | 第50-58页 |
| ·材料和方法 | 第50-54页 |
| ·结果 | 第54-58页 |
| ·重组质粒pBV220/NT4-TAT-6×His-VHLβ酶切鉴定 | 第54-55页 |
| ·融合基因NT4-TAT-6×His-VHLβ开放阅读框架编码的氨基酸 | 第55-56页 |
| ·pBV220/NT4-TAT-6×His-VHLβ重组质粒构建策略 | 第56-58页 |
| 第五章 构建分泌表达NT4-TAT-6×His-VHLβ的重组腺相关病毒 | 第58-69页 |
| ·材料和方法 | 第58-66页 |
| ·结果 | 第66-69页 |
| ·重组质粒pSSHG-CMV/NT4-TAT-6×His-VHLβ的构建和鉴定 | 第66-67页 |
| ·重组病毒rAAV/NT4-TAT-6×His-VHLβ的包装 | 第67-68页 |
| ·重组病毒滴度的测定 | 第68-69页 |
| 第六章 rAAV/NT4-TAT-6×His-VHLβ的体外生物学效应 | 第69-78页 |
| ·材料和方法 | 第69-73页 |
| ·结果 | 第73-78页 |
| ·真核细胞内TAT-6×His-VHLβcDNA基因表达的鉴定 | 第73-74页 |
| ·NT4-TAT-6×His-VHLβ对人肾癌细胞株GRC-Ⅰ的效应检测 | 第74-78页 |
| 第七章 讨论 | 第78-90页 |
| ·NT4-TAT-6×His-VHLβ融合基因表达盒的设计及导入系统 | 第79-85页 |
| ·有关104-123aaβ结构域 | 第79页 |
| ·穿膜肽TAT;蛋白转导结构域 | 第79-81页 |
| ·信号肽 | 第81-83页 |
| ·腺伴随病毒(AAV)及其载体 | 第83-85页 |
| ·AAV基因组及其一般特性 | 第83-84页 |
| ·AAV载体及包装 | 第84-85页 |
| ·TAT-6×His-VHLβ结构域肾癌抑制融合肽基因的克隆及序列分析 | 第85-86页 |
| ·NT4-TAT-6×His-VHLβ融合基因的合成及序列分析 | 第86-87页 |
| ·重组病毒rAAV/NT4-TAT-6×His-VHLβ的包装 | 第87-88页 |
| ·重组病毒的体外生物学效应 | 第88-90页 |
| 第八章 结论 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-102页 |
| 攻读硕士学位期间的研究成果 | 第102-103页 |
| 致谢 | 第103-104页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第104页 |
