| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 1 绪论 | 第11-20页 |
| ·赖氨酰-TRNA合成酶的研究进展 | 第15页 |
| ·2种赖氨酰-TRNA合成酶的结构与催化机理 | 第15-17页 |
| ·LYSRS的其它生物学功能 | 第17页 |
| ·生物体中同时存在LYSRS-Ⅰ、LYSRS-Ⅱ的生物学意义 | 第17-18页 |
| ·B.CEREUSATCC 14579中LYSRS1与TRNAOTHER的关系 | 第18-19页 |
| ·LYSRSⅠ基因的启动子调控 | 第19-20页 |
| 2 不同启动子长度lysRSI基因的表达情况研究 | 第20-36页 |
| ·材料和试剂 | 第20-21页 |
| ·实验材料 | 第20页 |
| ·实验试剂 | 第20页 |
| ·实验仪器 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-28页 |
| ·实验流程 | 第21页 |
| ·PCR产物片段回收 | 第21-22页 |
| ·感受态细胞的制备和酶连质粒的转化 | 第22页 |
| ·质粒DNA的小量提取 | 第22-23页 |
| ·电转化感受态细胞制备及电转 | 第23页 |
| ·荧光显微镜下观察荧光 | 第23-24页 |
| ·pLys和GFP基因片段的PCR扩增 | 第24-25页 |
| ·pLys-GFP的重叠延伸 | 第25页 |
| ·pLys-GFP片段与PMD18-T载体的TA克隆 | 第25-26页 |
| ·序列测定分析和比较 | 第26页 |
| ·pUBC19-pLys-GFP重组质粒的构建 | 第26-27页 |
| ·不同长度启动子的重组质粒的构建与表达 | 第27-28页 |
| ·结果和分析 | 第28-36页 |
| ·构建不同启动子长度基因片段 | 第28页 |
| ·pUBC19-pLys-GFP重组质粒的构建 | 第28-30页 |
| ·PCR扩增及重叠延伸 | 第30页 |
| ·TA克隆及测序 | 第30页 |
| ·pUBC19-pLys-GFP质粒的构建 | 第30-31页 |
| ·pUBC-P300-GFP、pUBC-P393-GFP和pUBC-P662-GFP重组质粒的构建 | 第31-32页 |
| ·不同启动子长度GFP表达情况 | 第32-36页 |
| 3 转录起始位点的确定 | 第36-49页 |
| ·材料和试剂 | 第36页 |
| ·实验材料 | 第36页 |
| ·实验试剂 | 第36页 |
| ·实验方法 | 第36-41页 |
| ·TriZOL法提取B.c14579的整RNA | 第37页 |
| ·LysRS1基因的转录起始位点 | 第37-40页 |
| ·B.c.14579-pUBC19-P662-GFP的转录起始位点 | 第40页 |
| ·pUBC19质粒上插入一段转录终止子 | 第40页 |
| ·不同长度启动子片段插入pUBC-t1t2质粒中 | 第40-41页 |
| ·结果和分析 | 第41-48页 |
| ·转录起始位点需找策略 | 第41页 |
| ·LysRS1基因转录起始位点 | 第41-42页 |
| ·测序结果及分析 | 第42-43页 |
| ·B.c14579-pUBC-P662-GFP的转录起始位点 | 第43-44页 |
| ·测序结果及分析 | 第44-45页 |
| ·pUBC19质粒上插入转录终止子 | 第45-46页 |
| ·不同长度启动子片段插入pUBC-t1t2质粒中 | 第46页 |
| ·插入终止子对荧光表达的影响 | 第46-48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| 4 lysRSI启动子突变 | 第49-57页 |
| ·材料和试剂 | 第49页 |
| ·实验材料 | 第49页 |
| ·实验试剂 | 第49页 |
| ·实验方法 | 第49-51页 |
| ·去掉启动子624-641之间的18个碱基 | 第49-51页 |
| ·其它突变 | 第51页 |
| ·结果和分析 | 第51-56页 |
| ·T1突变 | 第52-54页 |
| ·其它突变的荧光现象 | 第54-56页 |
| ·讨论 | 第56-57页 |
| 全文总结 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
| 附录 | 第64-65页 |
