中文摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-7页 |
第一章 文献综述 | 第7-19页 |
·SOD的发现 | 第7页 |
·SOD的种类及分布 | 第7-9页 |
·生物体内氧自由基的产生及其清除系统 | 第9-13页 |
·自由基 | 第9-10页 |
·氧与自由基 | 第10页 |
·氧自由基产生的原因 | 第10-11页 |
·机体内氧自由基的清除 | 第11-13页 |
·SOD在维持氧自由基平衡中的作用 | 第13页 |
·SOD基因的克隆及表达 | 第13-19页 |
·SOD基因工程研究 | 第13-15页 |
·酵母作为外源基因表达系统的研究进展 | 第15-19页 |
第二章 实验材料与方法 | 第19-31页 |
·实验材料 | 第19-25页 |
·质粒、菌株和引物 | 第19-20页 |
·主要实验仪器 | 第20-21页 |
·主要试剂 | 第21-22页 |
·培养基 | 第22-23页 |
·主要溶液 | 第23-25页 |
·实验方法 | 第25-31页 |
·酵母基因组DNA的快速分离 | 第25页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第25-26页 |
·DNA的限制酶消化 | 第26-27页 |
·DNA的琼脂糖凝胶电泳 | 第27页 |
·从琼脂糖中回收DNA | 第27页 |
·DNA的连接反应 | 第27-28页 |
·PCR扩增反应 | 第28页 |
·酵母细胞的转化方法 | 第28-29页 |
·一步基因置换法缺失目的基因 | 第29-30页 |
·SOD酶活力的测定方法 | 第30-31页 |
第三章 结果与分析 | 第31-45页 |
·出发菌株营养缺陷型的构建 | 第31-34页 |
·质粒pUC18-ura3 构建 | 第31-32页 |
·ura3 菌株的构建 | 第32-34页 |
·SOD表达菌株的构建 | 第34-38页 |
·YEplac195-PGA载体的构建 | 第34-35页 |
·YEplac195-PSGA载体的构建 | 第35页 |
·YEplac195-PSGA载体的在LN1中的表达 | 第35-38页 |
·转基因菌株生长特性 | 第38-42页 |
·生长曲线的绘制 | 第38-40页 |
·不同发酵条件下 SOD酶活性的测定 | 第40-42页 |
·SOD在菌株热激反应中功能的研究 | 第42-45页 |
·YCplac33-PSGA载体的构建 | 第42-43页 |
·SOD在不同载体下的表达比较 | 第43页 |
·SOD酶在菌株菌株热激反应中功能的研究 | 第43-45页 |
第四章 结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-50页 |
发表论文和科研情况说明 | 第50-51页 |
致谢 | 第51页 |