| 摘要 | 第1-5页 |
| Summary | 第5-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-15页 |
| 第二章 文献综述 | 第15-28页 |
| 1 口蹄疫病毒受体结合位点 | 第15-16页 |
| 2 整联蛋白的结构与功能 | 第16-17页 |
| 3 整联蛋白αvβ1 | 第17-18页 |
| 4 整联蛋白αvβ3 | 第18-19页 |
| 5 整联蛋白αvβ6 | 第19-20页 |
| 6 整联蛋白αvβ8 | 第20页 |
| 7 硫酸乙酰肝素(heparan sulfate,HS)受体 | 第20-21页 |
| 8 其他细胞受体 | 第21-22页 |
| 9 病毒受体的研究方法 | 第22-25页 |
| ·电镜技术 | 第22页 |
| ·受体基因的克隆及表达 | 第22-23页 |
| ·单克隆抗体法 | 第23页 |
| ·病毒覆盖蛋白结合试验 | 第23-24页 |
| ·噬菌体展示技术 | 第24页 |
| ·DNA重组技术 | 第24页 |
| ·酵母双杂交系统 | 第24-25页 |
| 10 展望 | 第25-28页 |
| 第三章 FMDV受体猪源整联蛋白αvβ6单克隆抗体的制备及鉴定 | 第28-56页 |
| 1 材料 | 第28-30页 |
| ·抗原、细胞株、动物 | 第28页 |
| ·培养基 | 第28页 |
| ·主要试剂 | 第28-29页 |
| ·细胞培养用试剂 | 第28-29页 |
| ·免疫学试剂 | 第29页 |
| ·其他生化试剂 | 第29页 |
| ·主要仪器设备 | 第29-30页 |
| 2 方法 | 第30-42页 |
| ·抗原制备 | 第30-33页 |
| ·重组质粒的诱导表达 | 第30页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE电泳 | 第30-32页 |
| ·表达蛋白的可溶性分析和包涵体的收集与纯化 | 第32-33页 |
| ·动物免疫，筛选方法的建立及小鼠效价测定 | 第33-34页 |
| ·动物免疫 | 第33页 |
| ·筛选方法的建立 | 第33-34页 |
| ·小鼠效价的测定 | 第34页 |
| ·杂交瘤细胞株的建立 | 第34-36页 |
| ·骨髓瘤细胞的准备 | 第34页 |
| ·饲养细胞的准备 | 第34-35页 |
| ·脾细胞的准备 | 第35页 |
| ·细胞的融合 | 第35页 |
| ·杂交瘤细胞的筛选 | 第35-36页 |
| ·杂交瘤细胞的克隆化培养 | 第36页 |
| ·杂交瘤细胞的扩大培养及冻存 | 第36-37页 |
| ·杂交瘤细胞的扩大培养 | 第36页 |
| ·杂交瘤细胞的冻存 | 第36-37页 |
| ·单克隆抗体的大量制备 | 第37页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第37页 |
| ·单克隆抗体的鉴定 | 第37-42页 |
| ·细胞培养上清和腹水效价测定 | 第37-38页 |
| ·抗体亚类鉴定 | 第38页 |
| ·杂交瘤细胞的染色体鉴定 | 第38-39页 |
| ·单克隆抗体的稳定性鉴定 | 第39页 |
| ·杂交瘤细胞体外传代试验 | 第39页 |
| ·杂交瘤细胞连续冻存复苏试验 | 第39页 |
| ·腹水连续传代试验 | 第39页 |
| ·单克隆抗体的特异性鉴定 | 第39-41页 |
| ·间接ELISA法 | 第39页 |
| ·真核表达载体pcDNA3.1（+）-β6p转染CHOK1细胞检测 | 第39-40页 |
| ·G418筛选浓度的确定 | 第39-40页 |
| ·表达载体的转染 | 第40页 |
| ·稳定整合体的筛选 | 第40页 |
| ·单克隆抗体检测β6 亚基在转染细胞中表达 | 第40页 |
| ·单克隆抗体特异性的Western blot分析 | 第40-41页 |
| ·单克隆抗体抗原结合表位的分析 | 第41-42页 |
| ·单克隆抗体饱和值测定 | 第42页 |
| ·单克隆抗体相对亲和力常数的测定 | 第42页 |
| 3 结果 | 第42-51页 |
| ·抗原制备 | 第42-44页 |
| ·表达产物的 SDS-PAGE 电泳 | 第42-43页 |
| ·表达蛋白的可溶性分析和包涵体的收集与纯化 | 第43-44页 |
| ·间接ELISA 法抗原最佳包被浓度的确定 | 第44页 |
| ·全部免疫BALB/c 小鼠抗体效价检测 | 第44页 |
| ·单克隆抗体的筛选及杂交瘤细胞株的建立 | 第44-45页 |
| ·单克隆抗体纯化 | 第45-46页 |
| ·单克隆抗体的亚类鉴定及杂交瘤细胞上清、腹水效价 | 第46页 |
| ·杂交瘤细胞染色体的鉴定 | 第46-47页 |
| ·单克隆抗体的稳定性鉴定 | 第47-48页 |
| ·杂交瘤细胞体外传代试验 | 第47页 |
| ·杂交瘤细胞连续冻存复苏试验 | 第47-48页 |
| ·腹水连续传代试验 | 第48页 |
| ·单克隆抗体的特异性鉴定 | 第48-50页 |
| ·间接ELISA 法 | 第48页 |
| ·真核表达载体转染CHOK1 细胞检测 | 第48-49页 |
| ·单克隆抗体特异性的Western blot 分析 | 第49-50页 |
| ·单克隆抗体抗原结合表位的分析 | 第50页 |
| ·单克隆抗体饱和值测定 | 第50页 |
| ·单克隆抗体相对亲和力常数的测定 | 第50-51页 |
| 4 讨论 | 第51-56页 |
| ·抗原的制备 | 第51-52页 |
| ·动物免疫 | 第52页 |
| ·细胞融合 | 第52-53页 |
| ·杂交瘤细胞株的筛选 | 第53页 |
| ·单克隆抗体的鉴定 | 第53-54页 |
| ·腹水的制备 | 第54页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第54-55页 |
| ·单克隆抗体的抗原结合表位分析、饱和值及亲和力常数的测定 | 第55-56页 |
| 第四章 FMDV 受体猪源整联蛋白αvβ6 的细胞定位及组织分布 | 第56-69页 |
| 1 材料 | 第56-57页 |
| ·动物组织 | 第56页 |
| ·克隆载体 | 第56页 |
| ·主要试剂 | 第56-57页 |
| ·细胞培养试剂 | 第56-57页 |
| ·免疫学试剂 | 第57页 |
| ·其他试剂 | 第57页 |
| ·主要仪器设备 | 第57页 |
| 2 方法 | 第57-61页 |
| ·β6 亚基在转染细胞中的表达分布 | 第57页 |
| ·冰冻组织切片制备 | 第57-58页 |
| ·间接免疫组化法检测整联蛋白αvβ6 的表达分布 | 第58-59页 |
| ·免疫荧光法检测整联蛋白αvβ6 的表达分布 | 第59-61页 |
| ·间接免疫荧光单染法 | 第59-60页 |
| ·间接免疫荧光双染法 | 第60-61页 |
| 3 结果 | 第61-66页 |
| ·β6 亚基在转染细胞中的表达 | 第61页 |
| ·间接免疫组化法检测整联蛋白αvβ6 的表达分布 | 第61-64页 |
| ·间接免疫荧光法检测整联蛋白αvβ6 的表达分布 | 第64-66页 |
| ·间接免疫荧光单染法 | 第64页 |
| ·间接免疫荧光双染法 | 第64-66页 |
| ·整联蛋白αvβ6的组织表达分布优势 | 第66页 |
| 4 讨论 | 第66-69页 |
| ·冰冻组织切片制备 | 第66-67页 |
| ·间接免疫组化法检测整联蛋白αvβ6 的表达分布 | 第67-68页 |
| ·间接免疫荧光法检测整联蛋白αvβ6 的表达分布 | 第68-69页 |
| 第五章 研究结论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-78页 |
| 附录 | 第78-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 导师简介 | 第85-87页 |
| 作者简介 | 第87页 |
